實(shí)驗(yàn)室層析柱是一種常用于實(shí)驗(yàn)室的分離技術(shù)工具,其功能是對(duì)混合物中的化合物進(jìn)行高效、快速、準(zhǔn)確的分離和純化1。它由特定的材料制成,主要由兩部分組成:填料和柱體1。填料是層析柱的,通常由具有特定吸附性能的顆粒狀物質(zhì)制成,這些顆粒物質(zhì)可以根據(jù)其特性分為多種類型,如吸附劑、凝膠劑和離子交換劑等2。填料的種類決定了層析柱的分離機(jī)制,例如吸附層析柱、離子交換層析柱和凝膠層析柱等,分別適用于不同的分離需求1。柱體則是填料的容器,通常由玻璃或不銹鋼等耐壓、耐腐蝕的材料制成1。柱體的設(shè)計(jì)和制造對(duì)于確保層析過(guò)程的穩(wěn)定性和效率至關(guān)重要。層析柱體積從1mL到100L,滿足不同規(guī)模需求!廈門實(shí)驗(yàn)室層析柱圖片
在進(jìn)行分離時(shí),首先將樣品溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲?,然后通過(guò)注射器將樣品注入中壓層析柱。樣品經(jīng)過(guò)填充材料時(shí),其中的不同組分在與填充材料固定相的相互作用下,以不同的速率通過(guò)柱子。這樣,在一定時(shí)間內(nèi),不同組分會(huì)分散在柱子中的不同位置上。為了改變樣品分離的速度和選擇性,還可以改變流動(dòng)相的組成或流速。此外,中壓層析柱通常還配備了檢測(cè)器,如紫外可見光檢測(cè)器或熒光檢測(cè)器,用于檢測(cè)樣品組分的信號(hào)強(qiáng)度和濃度。中壓層析柱具有一些明顯的優(yōu)點(diǎn):1.更高的分離效率和更低的分析成本:中壓層析柱相對(duì)于制備層析柱而言,具有更高的分離效率和更低的分析成本,因此可以用于處理大批量的樣品。湖南工業(yè)化不銹鋼夾套層析柱規(guī)格源景智能,為CDMO企業(yè)提供定制化層析柱!
后一種方法洗脫時(shí),選擇一種與待分離物質(zhì)有較強(qiáng)親和力的物質(zhì)加入洗脫液,這種物質(zhì)與配體競(jìng)爭(zhēng)對(duì)待分離物質(zhì)的結(jié)合,在在適當(dāng)?shù)臈l件下,如這種物質(zhì)與待分離物質(zhì)的親和力強(qiáng)或濃度較大,待分離物質(zhì)就會(huì)基本被這種物質(zhì)結(jié)合而脫離配體,從而被洗脫下來(lái)。例如用染料作為配體分離脫氫酶時(shí),可以選擇NAD+進(jìn)行洗脫,NAD+是脫氫酶的輔酶,它與脫氫酶的親和力要強(qiáng)于染料,所以脫氫酶就會(huì)與NAD+結(jié)合而從配體上脫離。特異性洗脫方法的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng),可以進(jìn)一步消除非特異性吸附的影響,從而得到較高的分辨率。另外對(duì)于待分離物質(zhì)與配體親和力很強(qiáng)的情況,使用非特異性洗脫方法需要較強(qiáng)烈的洗脫條件,很可能使蛋白質(zhì)等生物大分子變性,有時(shí)甚至只能使待分離的生物大分子變性才能夠洗脫下來(lái),使用特異性洗脫則可以避免這種情況。
近年來(lái),柱層析方法進(jìn)行了許多方面的創(chuàng)新,尤其表現(xiàn)在自動(dòng)化和過(guò)程控制領(lǐng)域中。用于流體傳送和數(shù)據(jù)采集的新式精確控制器以及先進(jìn)的處理系統(tǒng)都提高了柱層析的可靠性和重現(xiàn)性。自動(dòng)化促進(jìn)柱層析科學(xué)發(fā)展的一個(gè)領(lǐng)域是裝填工序。將介質(zhì)裝填到層析柱中曾經(jīng)被認(rèn)為是一項(xiàng)需要熟練技巧、勞動(dòng)強(qiáng)度大的生產(chǎn)活動(dòng),需要大量的操作培訓(xùn)才能保證一致性。但是,事實(shí)上,再純熟的人工操作也會(huì)導(dǎo)致不定因素出現(xiàn),并可能破壞批次生產(chǎn)的重復(fù)性。對(duì)藥品的研發(fā)而言,重復(fù)性是非常關(guān)鍵的,若層析柱裝填沒有達(dá)到標(biāo)準(zhǔn),產(chǎn)品純度和產(chǎn)率就會(huì)受影響。嚴(yán)重的結(jié)果是,該批生產(chǎn)會(huì)遭到破壞,導(dǎo)致成本大幅超支和生產(chǎn)停工。高載量層析柱,提升抗體、蛋白純化收率,降低生產(chǎn)成本!
封裝組件:封裝組件是該設(shè)備的另一個(gè)重要組成部分,用于密封色譜柱管的兩端,防止填充劑泄漏。封裝組件通常由橡膠、聚四氟乙烯等材料制成,具有耐高壓、耐腐蝕、密封性好等特點(diǎn)。封裝組件的設(shè)計(jì)和質(zhì)量直接影響到穩(wěn)定性和可靠性。總之,高壓層析柱的結(jié)構(gòu)組成包括色譜柱管、填充劑、連接件、排氣閥、導(dǎo)向桿和封裝組件等部分。這些部分的設(shè)計(jì)和質(zhì)量直接影響到該設(shè)備的性能、穩(wěn)定性和可靠性。在使用高壓層析柱時(shí),用戶應(yīng)充分了解其結(jié)構(gòu)組成,選擇合適的設(shè)備和操作方法,以獲得更好的分離和分析效果。中壓層析柱是一種重要的分離技術(shù),在實(shí)驗(yàn)室和工業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用。為了確保該柱的使用效果和操作安全,用戶在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)和操作時(shí)需要遵守以下注意事項(xiàng)。層析柱選源景,純化工藝更穩(wěn)定!北京動(dòng)態(tài)不銹鋼層析柱圖片
源景智能層析柱,GMP級(jí)生產(chǎn)環(huán)境保障!廈門實(shí)驗(yàn)室層析柱圖片
高壓層析柱是液相色譜分析系統(tǒng)中的組件,它負(fù)責(zé)完成樣品的分離、純化和分析。高壓層析柱的結(jié)構(gòu)組成主要包括以下幾個(gè)部分:1.色譜柱管:色譜柱管是該設(shè)備的主體部分,通常由不銹鋼、玻璃或聚合物等材料制成。它的作用是容納填充劑,并承受高壓。色譜柱管的內(nèi)徑、長(zhǎng)度和填料粒度等因素直接影響到分離效果和分析速度。2.填充劑:填充劑是部分,它決定了樣品分子的分離和純化效果。填充劑通常由硅膠、聚合物、陶瓷等材料制成,表面經(jīng)過(guò)特殊的化學(xué)處理,以提供特定的吸附性能。填充劑的粒度、孔徑、比表面積和表面化學(xué)性質(zhì)等因素直接影響到該設(shè)備的性能。廈門實(shí)驗(yàn)室層析柱圖片