二價離子抑制胰蛋白酶活性嗎?
二價離子的確抑制胰蛋白酶活性。
使用胰蛋白酶加入EDTA是為什么?
EDTA用來螯合游離的鎂離子和鈣離子,以便保持抑制胰蛋白酶的活性。建議胰蛋白酶處理細(xì)胞前,用EDTA清洗細(xì)胞,以消除來自培養(yǎng)基中所有的二價離子。
可否使用與原先不同的培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),易造成細(xì)胞狀態(tài)不好,**終造成細(xì)胞無法存活。 全自動細(xì)胞計數(shù)儀的款式。廣東標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞計數(shù)儀定制價格
如何讓細(xì)胞計數(shù)更加準(zhǔn)確
對于每種細(xì)胞計數(shù)方法,樣品表面必須是干凈的。任何污染都可能導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。對于人工細(xì)胞計數(shù),這包括移除和清潔玻璃蓋片,然后用70%乙醇然后用水清潔計數(shù)腔。當(dāng)使用一次性塑料載玻片時,每個樣品都需要一個新的載玻片(如果載玻片有兩個分開的腔室,則需要一對樣品)。
加載樣本前需要旋渦震蕩
在裝載樣品之前立即進行漩渦震蕩處理,是確保被分析樣品具有代表性的重要步驟。
不同大小和類型的細(xì)胞將以不同的速率沉降和聚集。在加載樣品之前立即旋轉(zhuǎn)溶液會增加等分的概率,并準(zhǔn)確地反映細(xì)胞培養(yǎng)的特性。 內(nèi)蒙古現(xiàn)代化細(xì)胞計數(shù)儀全自動細(xì)胞計數(shù)儀的優(yōu)點。
培養(yǎng)中常出現(xiàn)一些黑點,是污染嗎?
首先肉眼觀察培養(yǎng)液是否變渾濁,如果變渾濁,基本可以確定是污染;如果肉眼觀察培養(yǎng)液沒有變渾濁:在顯微鏡下觀察黑點大小和形狀是否規(guī)則,是否運動,是做布朗運動還是呈直線型快速移動。如果黑點大小不規(guī)則,做布朗運動,黑點可能是細(xì)胞碎片(可能是細(xì)胞狀態(tài)不佳或者消化過度引起的),也可能是血清反復(fù)凍融產(chǎn)生的蛋白沉淀引起的,也可能是細(xì)胞的代謝產(chǎn)物。如果黑點大小一致,快速移動,很可能是細(xì)菌污染。
全自動細(xì)胞計數(shù)和活率分析
我們國家近十幾年在生物制藥行業(yè)的蓬勃發(fā)展,對于以上這種計數(shù)和活率分析方法,已無法滿足生物制藥研發(fā)和生產(chǎn)發(fā)展的需要,因此正在逐漸被自動化細(xì)胞計數(shù)和活率分析儀所替代。
自動化細(xì)胞計數(shù)和活率分析儀首先解決的是對細(xì)胞做死活標(biāo)記,并且自動統(tǒng)計具體的死活細(xì)胞數(shù)量和計算細(xì)胞活率和濃度。
相比傳統(tǒng)手動計數(shù)法,避免了操作人員用眼疲勞和計數(shù)人為誤差的問題
自動化細(xì)胞計數(shù)和活率分析儀還會保存拍攝的照片,軟件分析使用的細(xì)胞參數(shù)和分析結(jié)果,以便符合法規(guī)要求的數(shù)據(jù)真實性和可追溯性 細(xì)胞計數(shù)儀是什么原理?
實驗中操作和分析軟件的合規(guī)性
合規(guī)性還是針對于質(zhì)控(QC)部門、GMP實驗室和生產(chǎn)車間。因為生產(chǎn)的藥物,各個國家對藥物生產(chǎn)都有嚴(yán)格的法規(guī)要求,包括GMP和FDA等,要求所測試的數(shù)據(jù)是可追蹤的,使用儀器的分析軟件有多級用戶權(quán)限管理和審計追蹤、電子簽名功能(,以保證測試數(shù)據(jù)的完整性、安全性和可靠性。
除此之外,大家還需要結(jié)合自己的預(yù)算,每天要測試的樣品數(shù)量,實驗室可放置儀器的空間大小等其他各個方面綜合起來考慮,終選擇一款合適的細(xì)胞計數(shù)和活率分析儀。 細(xì)胞計數(shù)儀的型號對比。天津使用細(xì)胞計數(shù)儀生產(chǎn)廠家
細(xì)胞計數(shù)儀的檢測結(jié)果可靠嗎?廣東標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞計數(shù)儀定制價格
購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細(xì)胞有嚴(yán)重影響。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–80°C太久。
細(xì)胞生長逐漸變慢是什么原因?
細(xì)胞增殖變慢有以下原因:1. 消化過度 2. 傳代過密 3.細(xì)胞營養(yǎng)不良 4.細(xì)胞頻繁傳代 5.細(xì)胞狀態(tài)不佳或老化 6.細(xì)胞存在污染。 廣東標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞計數(shù)儀定制價格
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