單細胞測序?qū)嶒灥牡谝徊绞菃渭毎麘乙旱闹苽?，而懸液制備中細胞計?shù)的準確性直接影響單細胞測序的數(shù)據(jù)質(zhì)量，但是關于細胞計數(shù)您真的了解嗎？
目前細胞計數(shù)主要使用臺盼藍染色法和雙熒光AO/PI染色法。
1）臺盼藍染色原理：臺盼藍不能透過活細胞正常完整的細胞膜，故活細胞不著色。而死細胞的細胞膜透性增高，可使染料進入細胞內(nèi)而使細胞著色（藍色）。
2）雙熒光AO/PI染色原理：吖啶橙（AO）可以通過完整的細胞膜，嵌入所有細胞（活細胞和死細胞）的細胞核，呈現(xiàn)綠色熒光；碘化丙啶（PI）只能通過不完整的細胞膜，即死細胞的細胞膜，嵌入所有死細胞的細胞核，呈現(xiàn)紅色熒光。
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細胞培養(yǎng)實驗室之孵育區(qū)以及制備，儲藏，清洗和消毒滅菌區(qū)
孵育區(qū)
本區(qū)對無菌的要求雖不比無菌區(qū)嚴格，但仍需清潔無塵，因此也應設置在干擾少而非來往穿行的區(qū)域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進行，后者費用高，一般實驗室多采用孵箱進行工作。
制備區(qū)
在該區(qū)主要進行培養(yǎng)液及有關培養(yǎng)用的液體等的制備。
儲藏區(qū)
主要存放各類冰箱、干燥箱、液氮罐、無菌培養(yǎng)液、培養(yǎng)瓶等，此環(huán)境也需要清潔無塵。
清洗和消毒滅菌區(qū)
清潔和消毒滅菌區(qū)應與其他區(qū)域分開，主要進行所有細胞培養(yǎng)器皿的清洗、準備、消毒及三蒸水制備等工作。 浙江常規(guī)細胞計數(shù)儀代理商全自動細胞計數(shù)儀的標準是什么？
實驗中操作和分析軟件的合規(guī)性
合規(guī)性還是針對于質(zhì)控（QC）部門、GMP實驗室和生產(chǎn)車間。因為生產(chǎn)的藥物，各個國家對藥物生產(chǎn)都有嚴格的法規(guī)要求，包括GMP和FDA等，要求所測試的數(shù)據(jù)是可追蹤的，使用儀器的分析軟件有多級用戶權限管理和審計追蹤、電子簽名功能（，以保證測試數(shù)據(jù)的完整性、安全性和可靠性。
除此之外，大家還需要結合自己的預算，每天要測試的樣品數(shù)量，實驗室可放置儀器的空間大小等其他各個方面綜合起來考慮，終選擇一款合適的細胞計數(shù)和活率分析儀。
對比細胞計數(shù)儀和血球計數(shù)板。
對比1:準確度主觀差異性不論采用哪種細胞計數(shù)方法，依靠操作人員的判斷都會導致結果出錯。TANK-CA0008全自動細胞計數(shù)儀器采用了先進的算法來確定比較好焦距和光強度；可去除諸多主觀變量，同時還可節(jié)省時間。利用定量方法，根據(jù)細胞大小、亮度和圓度對細胞進行設門，而不是依靠操作人員的判斷，這有助于減少主觀性錯誤，提高樣本和用戶間的重復性
1. 采用血球計數(shù)板與 TANK-CA0008全自動細胞計數(shù)儀器進行計數(shù)的用戶差異比較。由三位不同的操作人員，采用 TANK-CA0008全自動 細胞 計數(shù)儀以及血球計數(shù)板和顯微鏡，對相同的 A549、COS-7、HeLa 和 U2OS 細胞樣本進行計數(shù)。血球計數(shù)板的用戶間差 異明顯高于TANK-CA0008全自動細胞計數(shù) 儀器。 細胞計數(shù)儀的體積有多大？
細胞傳代培養(yǎng)常見問題匯總
一般拿到細胞后，應該注意什么?
收到細胞先不開蓋,用酒精將整個細胞瓶外壁進行消毒，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各兩張)，排除細胞本身污染的情況。
何時須更換培養(yǎng)基?
視細胞生長密度而定，常規(guī)細胞2-3天更換培養(yǎng)基。
細胞何時進行傳代較好?
一般情況下細胞生長至完全匯合后就應該傳代，所有細胞生長都有一個要求不宜生長過密(也就是常說的長老了)，但有接觸抑制的細胞，在匯合前就必須進行傳代，這類細胞一般在密度70-80%就進行傳代，否則會引起細胞分化。 全自動細胞計數(shù)儀的優(yōu)點。黑龍江細胞計數(shù)儀廠家現(xiàn)貨
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眾所周知，活細胞密度(VCD)和活率(viability)是評估哺乳動物細胞系生長狀態(tài)的重要指標。生物制藥研發(fā)人員進行懸浮細胞培養(yǎng)，每天所不能避免的工作，就是取樣計數(shù)。使用細胞計數(shù)板進行人工計數(shù)無疑是金標準方法。
但這個傳統(tǒng)方法其勞動強度十分驚人，樣品量少的時候還能吃得消，樣品量大一些，甚至于要做大規(guī)模的DOE實驗時，估計很多實驗人員想死的心都會有。而且人工計數(shù)有較強的主觀性，對操作人員的經(jīng)驗及操作熟練度有一定要求，導致有時候數(shù)據(jù)的重現(xiàn)性和可比性會受到質(zhì)疑。
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