熒光素雙醋酸酯（FDA）是一種常用的培養(yǎng)動植物細(xì)胞以及植物細(xì)胞原生質(zhì)體的生活力鑒定染料，其染色機(jī)理也利用了死活細(xì)胞在代謝上的差異：FDA本身不產(chǎn)生熒光，也無極性，能自由滲透出入完整的細(xì)胞膜。
當(dāng)FDA進(jìn)入活細(xì)胞后，被細(xì)胞內(nèi)的脂酶分解，生成有極性的、能產(chǎn)生熒光的物質(zhì)——熒光素，該物質(zhì)不能自由透過活的細(xì)胞膜，積累在細(xì)胞膜內(nèi)，因而使有活力的細(xì)胞產(chǎn)生綠色熒光；而無活力的細(xì)胞因不能使FDA分解，而無法產(chǎn)生熒光。
除此之外，還有一些細(xì)胞器的專有染料。如液泡系的專有染料中性紅。中性紅是一種低毒性染料，可以使活細(xì)胞液泡著紅色，而細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不被著色；死細(xì)胞的液泡不被著色或淺染，染料彌散于整個細(xì)胞中，細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)被染成紅色。有時侯為了增加染色效果可以將兩種染料結(jié)合使用，如甲基藍(lán)-中性紅混合染色法。 全自動細(xì)胞計數(shù)儀的壽命。廣東現(xiàn)代細(xì)胞計數(shù)儀哪家便宜
細(xì)胞離心下來的離心速率應(yīng)為多少?
細(xì)胞傳代或凍存時欲回收細(xì)胞，其離心速度一般為800-1000 rpm/min，室溫離心5-8分鐘，轉(zhuǎn)速過高，將造成細(xì)胞破裂死亡。
如何用臺盼蘭計數(shù)活細(xì)胞?
用無血清培養(yǎng)基把細(xì)胞懸液稀釋到200～2000 個/毫升，在0.1 毫升的細(xì)胞懸液中加入0.1 毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻，用血球計數(shù)板計數(shù)細(xì)胞?；罴?xì)胞排斥臺盼蘭，因而染成藍(lán)色的細(xì)胞是死細(xì)胞，注意計數(shù)需在加入臺盼藍(lán)10min內(nèi)完成。有細(xì)胞計數(shù)儀的，可直接用計數(shù)儀進(jìn)行。 上海高科技細(xì)胞計數(shù)儀比較價格全自動細(xì)胞計數(shù)儀的標(biāo)準(zhǔn)是什么？
細(xì)胞傳代培養(yǎng)常見問題匯總
一般拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么?
收到細(xì)胞先不開蓋,用酒精將整個細(xì)胞瓶外壁進(jìn)行消毒，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各兩張)，排除細(xì)胞本身污染的情況。
何時須更換培養(yǎng)基?
視細(xì)胞生長密度而定，常規(guī)細(xì)胞2-3天更換培養(yǎng)基。
細(xì)胞何時進(jìn)行傳代較好?
一般情況下細(xì)胞生長至完全匯合后就應(yīng)該傳代，所有細(xì)胞生長都有一個要求不宜生長過密(也就是常說的長老了)，但有接觸抑制的細(xì)胞，在匯合前就必須進(jìn)行傳代，這類細(xì)胞一般在密度70-80%就進(jìn)行傳代，否則會引起細(xì)胞分化。
染色法鑒定機(jī)理
染色法分化學(xué)染色法和熒光染色法，根據(jù)染色機(jī)理的不同，染料或使死細(xì)胞著色，或使活細(xì)胞著色。死活細(xì)胞在生理機(jī)能和性質(zhì)上的差異主要包括：
死活細(xì)胞細(xì)胞膜通透性的差異：
活細(xì)胞的細(xì)胞膜是一種選擇性膜，對細(xì)胞起保護(hù)和屏障作用，只允許物質(zhì)選擇性的通過；而細(xì)胞死亡之后，細(xì)胞膜受損，通透性增加。常用的以臺盼藍(lán)鑒別細(xì)胞死活的方法就是利用了這一性質(zhì)。
臺盼藍(lán)，又稱錐藍(lán)，是一種陰離子型染料，不能透過完整的細(xì)胞膜。所以經(jīng)臺盼藍(lán)染色后只能使死細(xì)胞著色，而活細(xì)胞不被著色 全自動細(xì)胞計數(shù)儀怎么使用？
細(xì)胞抱團(tuán)怎么處理?
一些懸浮細(xì)胞抱團(tuán)生長是正常現(xiàn)象，大部分懸浮細(xì)胞在細(xì)胞密度很高的情況下，很可能會出現(xiàn)部分細(xì)胞抱團(tuán)生長的現(xiàn)象，聚團(tuán)細(xì)胞很容易死亡并演化成絮狀物，殃及周圍的懸浮細(xì)胞，因此在培養(yǎng)懸浮細(xì)胞時需控制好細(xì)胞密度。如果出現(xiàn)了細(xì)胞團(tuán)，可以通過細(xì)胞篩去掉部分較大的細(xì)胞團(tuán)，也可以嘗試一下方法：將細(xì)胞懸液收集到15 ml離心管中，靜置20 min左右，小心取上層細(xì)胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細(xì)胞團(tuán)，需要大家酌情而定)。 細(xì)胞計數(shù)儀的型號對比。發(fā)展細(xì)胞計數(shù)儀價目表
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傳統(tǒng)手動計數(shù)法
回答這個問題前，我們拿一個可以比較的對象，即原始的細(xì)胞計數(shù)及活率分析方法——1臺光學(xué)顯微鏡+血球計數(shù)板，待測的細(xì)胞懸液樣品被滴加在血球計數(shù)板上，通過肉眼人工計數(shù)統(tǒng)計細(xì)胞數(shù)量和計算細(xì)胞活率。
顯微鏡下我們可以看到血球計數(shù)板上4個區(qū)域，其中的活細(xì)胞和死細(xì)胞數(shù)目被分別統(tǒng)計。這個方法比較大的優(yōu)勢是整套設(shè)備很便宜，配套一塊血球計數(shù)板，以及自配的臺盼藍(lán)溶液即可開始整個實驗，所以使用成本會很低，比較適合高校研究所中用于學(xué)生的教學(xué)實驗。 廣東現(xiàn)代細(xì)胞計數(shù)儀哪家便宜
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