細(xì)胞離心下來的離心速率應(yīng)為多少?
細(xì)胞傳代或凍存時(shí)欲回收細(xì)胞,其離心速度一般為800-1000 rpm/min,室溫離心5-8分鐘,轉(zhuǎn)速過高,將造成細(xì)胞破裂死亡。
如何用臺(tái)盼蘭計(jì)數(shù)活細(xì)胞?
用無血清培養(yǎng)基把細(xì)胞懸液稀釋到200~2000 個(gè)/毫升,在0.1 毫升的細(xì)胞懸液中加入0.1 毫升的0.4%的臺(tái)盼蘭溶液。輕輕混勻,用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞?;罴?xì)胞排斥臺(tái)盼蘭,因而染成藍(lán)色的細(xì)胞是死細(xì)胞,注意計(jì)數(shù)需在加入臺(tái)盼藍(lán)10min內(nèi)完成。有細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的,可直接用計(jì)數(shù)儀進(jìn)行。 全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的對(duì)比數(shù)據(jù)。江蘇自動(dòng)化細(xì)胞計(jì)數(shù)儀要多少錢
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室之凈化工作臺(tái)
凈化工作臺(tái):操作簡(jiǎn)單,安裝方便,占用空間小且凈化效果很好。一般細(xì)菌培養(yǎng)室使用的凈化工作臺(tái)主要有兩種:a)側(cè)流式或稱垂直式b)外流式或稱水平層流式。
凈化工作臺(tái)工作原理(大致相同)——通常是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過濾器初濾,由離心風(fēng)機(jī)壓入靜壓箱,再經(jīng)高效空氣過濾器精濾,由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風(fēng)速通過無菌區(qū),從而形成無塵無菌的高潔凈度工作環(huán)境。
側(cè)流式工作臺(tái)—空氣凈化后的氣流由左或右側(cè)通過工作臺(tái)面流向?qū)?cè),也有從上向下或從下向上流向?qū)?cè),形成氣流屏障保持工作區(qū)無菌。工作臺(tái)結(jié)構(gòu)為封閉式。
外流式(水平式)工作臺(tái)—凈化后的空氣面向操作者流動(dòng),因而外方氣流不致混入操作,但進(jìn)行有害物質(zhì)實(shí)驗(yàn)操作則對(duì)操作者不利。工作臺(tái)結(jié)構(gòu)為開放式(已少用)。 云南通用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀怎么使用?
細(xì)胞活力鑒定——臺(tái)盼藍(lán)染色法
臺(tái)盼藍(lán)(Trypan Blue),也稱二胺藍(lán)(Diamine Blue)和加拉藍(lán)(Niagra Blue),是一種用于選擇性著色死細(xì)胞和即將死亡的細(xì)胞的重要染料。這種染料不能進(jìn)入細(xì)胞膜完整的細(xì)胞,而能在細(xì)胞膜受損的死細(xì)胞或即將死亡的細(xì)胞內(nèi)迅速積累,從而在顯微鏡下顯出藍(lán)色。若染色時(shí)間過長(zhǎng),臺(tái)盼藍(lán)可能通過胞吞或胞飲作用進(jìn)入細(xì)胞。
拓開細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,擁有自動(dòng)化,合規(guī)化,高通量等優(yōu)勢(shì),能夠幫助您在實(shí)驗(yàn)室里高效率,高標(biāo)準(zhǔn)的完成細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞檢測(cè)等工作,是您細(xì)胞科研領(lǐng)域的強(qiáng)力伙伴。
細(xì)胞接種密度多少合適?
依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的接種密度或稀釋分盤的比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無法生長(zhǎng)的一個(gè)重要原因。按照我們的經(jīng)驗(yàn):一般倍增時(shí)間24 h內(nèi)的細(xì)胞,傳代比率1:6-1:12為宜,倍增時(shí)間24-48 h的細(xì)胞,傳代比率1:3-1:8為宜,倍增時(shí)間超過48h的細(xì)胞, 傳代比率1:2-1:4為宜。
如何預(yù)防細(xì)胞培養(yǎng)中黑點(diǎn)的產(chǎn)生?
掌握細(xì)胞傳代的比較好時(shí)機(jī),不要細(xì)胞長(zhǎng)老了再傳代;掌握好消化時(shí)間,防止消化過度產(chǎn)生細(xì)胞碎片;減少血清等試劑的凍融次數(shù);將培養(yǎng)液的PH調(diào)到比較好;嚴(yán)格控制水質(zhì)和器皿的清潔。 全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的缺點(diǎn)。
如何讓細(xì)胞計(jì)數(shù)更加的準(zhǔn)確
優(yōu)化細(xì)胞計(jì)數(shù)的設(shè)備配置
無論是手動(dòng)計(jì)數(shù)還是依靠TANK-CA0008全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀自帶軟件算法計(jì)數(shù),調(diào)整焦距和曝光設(shè)置都很重要,以確保細(xì)胞盡可能有比較好的可見性/能見度,終獲得準(zhǔn)確的細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果。比較好的聚焦和曝光將在細(xì)胞膜和背景之間,有非常非常非常鮮明的對(duì)比。
血球計(jì)數(shù)板的腔室需要調(diào)整到合適的高度
血球計(jì)數(shù)板有多種型號(hào)規(guī)格可供選擇。不同型號(hào)的腔室高度和深度在設(shè)計(jì)上都差異巨大。實(shí)驗(yàn)人員在計(jì)算細(xì)胞數(shù)量時(shí)要注意一些細(xì)節(jié)以避免錯(cuò)誤。 全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的檢測(cè)速度。北京使用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀比較價(jià)格
細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的使用評(píng)價(jià)。江蘇自動(dòng)化細(xì)胞計(jì)數(shù)儀要多少錢
培養(yǎng)中常出現(xiàn)一些黑點(diǎn),是污染嗎?
首先肉眼觀察培養(yǎng)液是否變渾濁,如果變渾濁,基本可以確定是污染;如果肉眼觀察培養(yǎng)液沒有變渾濁:在顯微鏡下觀察黑點(diǎn)大小和形狀是否規(guī)則,是否運(yùn)動(dòng),是做布朗運(yùn)動(dòng)還是呈直線型快速移動(dòng)。如果黑點(diǎn)大小不規(guī)則,做布朗運(yùn)動(dòng),黑點(diǎn)可能是細(xì)胞碎片(可能是細(xì)胞狀態(tài)不佳或者消化過度引起的),也可能是血清反復(fù)凍融產(chǎn)生的蛋白沉淀引起的,也可能是細(xì)胞的代謝產(chǎn)物。如果黑點(diǎn)大小一致,快速移動(dòng),很可能是細(xì)菌污染。 江蘇自動(dòng)化細(xì)胞計(jì)數(shù)儀要多少錢
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