細胞計數(shù)是細胞實驗中非常重要的一個環(huán)節(jié)，科研工作者需要從多方面對培養(yǎng)的細胞進行分析，比如活細胞數(shù)、死細胞數(shù)、細胞存活率等。經(jīng)典的通過臺盼藍染色方法對細胞進行人工計數(shù)，是我們研究細胞必備技能之一。隨著科技發(fā)展，自動化的細胞計數(shù)儀應(yīng)運而生，它以便捷、精細、快速等優(yōu)勢被廣泛應(yīng)用到細胞實驗中。
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培養(yǎng)中常出現(xiàn)一些黑點，是污染嗎?
首先肉眼觀察培養(yǎng)液是否變渾濁，如果變渾濁，基本可以確定是污染;如果肉眼觀察培養(yǎng)液沒有變渾濁：在顯微鏡下觀察黑點大小和形狀是否規(guī)則，是否運動，是做布朗運動還是呈直線型快速移動。如果黑點大小不規(guī)則，做布朗運動，黑點可能是細胞碎片(可能是細胞狀態(tài)不佳或者消化過度引起的)，也可能是血清反復(fù)凍融產(chǎn)生的蛋白沉淀引起的，也可能是細胞的代謝產(chǎn)物。如果黑點大小一致，快速移動，很可能是細菌污染。 福建現(xiàn)代細胞計數(shù)儀細胞計數(shù)儀應(yīng)該怎么選擇？
如何讓細胞計數(shù)更加準(zhǔn)確
對于每種細胞計數(shù)方法，樣品表面必須是干凈的。任何污染都可能導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。對于人工細胞計數(shù)，這包括移除和清潔玻璃蓋片，然后用70%乙醇然后用水清潔計數(shù)腔。當(dāng)使用一次性塑料載玻片時，每個樣品都需要一個新的載玻片(如果載玻片有兩個分開的腔室，則需要一對樣品)。
加載樣本前需要旋渦震蕩
在裝載樣品之前立即進行漩渦震蕩處理，是確保被分析樣品具有代表性的重要步驟。
不同大小和類型的細胞將以不同的速率沉降和聚集。在加載樣品之前立即旋轉(zhuǎn)溶液會增加等分的概率，并準(zhǔn)確地反映細胞培養(yǎng)的特性。
單細胞測序?qū)嶒灥牡谝徊绞菃渭毎麘乙旱闹苽洌鴳乙褐苽渲屑毎嫈?shù)的準(zhǔn)確性直接影響單細胞測序的數(shù)據(jù)質(zhì)量，但是關(guān)于細胞計數(shù)您真的了解嗎？
目前細胞計數(shù)主要使用臺盼藍染色法和雙熒光AO/PI染色法。
1）臺盼藍染色原理：臺盼藍不能透過活細胞正常完整的細胞膜，故活細胞不著色。而死細胞的細胞膜透性增高，可使染料進入細胞內(nèi)而使細胞著色（藍色）。
2）雙熒光AO/PI染色原理：吖啶橙（AO）可以通過完整的細胞膜，嵌入所有細胞（活細胞和死細胞）的細胞核，呈現(xiàn)綠色熒光；碘化丙啶（PI）只能通過不完整的細胞膜，即死細胞的細胞膜，嵌入所有死細胞的細胞核，呈現(xiàn)紅色熒光。
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一般拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？
收到細胞先不開蓋,用酒精將整個細胞瓶外壁進行消毒，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各兩張），排除細胞本身污染的情況。
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全自動細胞計數(shù)儀使用范圍。山東細胞計數(shù)儀銷售廠
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳
研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細胞有嚴(yán)重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認(rèn)為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久。
細胞生長逐漸變慢是什么原因?
細胞增殖變慢有以下原因：1. 消化過度 2. 傳代過密 3.細胞營養(yǎng)不良 4.細胞頻繁傳代 5.細胞狀態(tài)不佳或老化 6.細胞存在污染。 山東細胞計數(shù)儀銷售廠
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