研究初次發(fā)現(xiàn)瘧原蟲傳染小鼠血漿外泌體(exosomes)能夠壓制一些病癥血管生成,并初步闡明其分子機(jī)制。研究加深了對(duì)瘧原蟲傳染宿主所分泌的外泌體與一些病癥血管生成之間的相互作用的認(rèn)識(shí),為開發(fā)瘧原蟲傳染來(lái)源的外泌體作為一種新型抗一些病癥制劑奠定了基礎(chǔ)。研究人員選用肺病小鼠模型作為研究對(duì)象,從傳染瘧原蟲的小鼠血漿中獲得外泌體,并將這些外泌體注射到小鼠的一些病癥內(nèi)部,并與沒(méi)有瘧原蟲傳染的小鼠血漿外泌體進(jìn)行對(duì)照。研究發(fā)現(xiàn),瘧原蟲傳染小鼠的血漿外泌體明顯壓制一些病癥血管的生成。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn),瘧原蟲傳染的小鼠血漿外泌體通過(guò)至少四種特殊的微小RNA(miR16-5p/17-5p/322-5p/497-5p)壓制血管內(nèi)皮細(xì)胞VEGF受體(VEGFR2)的表達(dá)從而阻斷血管生成的信號(hào)通路。這些發(fā)現(xiàn)加深了人們對(duì)瘧原蟲抗病機(jī)理的理解,并為瘧原蟲療法治病一些疾病的臨床研究提供進(jìn)一步的理論依據(jù)。外泌體提取:超濾膜也可用于分離外泌體。昆明正規(guī)外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)
外泌體(Exosomes)是細(xì)胞分泌到胞外的一種囊泡(ExtracellularVesicles,EVs),其大小為30-150nm,具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài),含有豐富的內(nèi)含物(包括核酸、蛋白和脂質(zhì)等),參與細(xì)胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,包括血液、唾液、尿液、乳汁等,同時(shí)也存在于組織樣本中,如腦組織、肌肉組織、脂肪組織等。腦組織分離方法簡(jiǎn)述:將腦組織剪成薄片,放入離心管中加上消化液進(jìn)行消化,經(jīng)水浴、反復(fù)輕輕上下顛倒,再用移液間斷緩慢吹吸至消化結(jié)束。隨后加入培養(yǎng)基于消化液中,混勻,置于冰上。再進(jìn)行一系列的差速超速離心過(guò)程,包括除雜、濾膜過(guò)濾、超離等。較后用PBS重懸外泌體,用重懸后的外泌體進(jìn)行下面的透射電鏡(TEM)、納米粒徑追蹤分子(NTA)和markerWB鑒定。來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中成都正規(guī)外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì):無(wú)需蛋白酶處理。
外泌體在肺病進(jìn)程中的作用:在一些病癥微環(huán)境中,一些病癥細(xì)胞來(lái)源的外泌體能夠誘導(dǎo)CD4+T分化為調(diào)節(jié)性T細(xì)胞,壓制機(jī)體的抗一些病癥免疫反應(yīng);肺病細(xì)胞分泌的外泌體含有miR-21和miR-29a,可在免疫細(xì)胞中結(jié)合并啟動(dòng)TLR8,使TLR介導(dǎo)的NF-κB信號(hào)通路活化,從而導(dǎo)致一些病癥的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。在肺病的侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程中,細(xì)胞間通訊扮演著重要的角色。據(jù)有關(guān)報(bào)道稱,NSCLC分泌的外泌體內(nèi)TGFβ和IL10的高表達(dá)與肺病的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。此外,啟動(dòng)的T細(xì)胞可以通過(guò)調(diào)控Fas信號(hào)通路增加基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)的表達(dá),進(jìn)而促進(jìn)肺病的轉(zhuǎn)移。這些機(jī)制有望成為肺病治病的潛在靶點(diǎn)。雖然大多數(shù)外泌體都是促進(jìn)一些病癥的侵襲與轉(zhuǎn)移,但也有報(bào)道稱,外泌體miR-302b可以通過(guò)壓制TGFβRⅡ來(lái)壓制肺病細(xì)胞的轉(zhuǎn)移與增殖。如純度和回收率低,雜蛋白較多(假陽(yáng)性),顆粒大小不均一,產(chǎn)生難以去除的聚合物。
外泌體與肺病預(yù)后:外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn),外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外,還有研究表明,低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時(shí)發(fā)現(xiàn),NY-ESO-1是其中對(duì)低生存率有顯著影響的標(biāo)志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA,其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表達(dá)均下調(diào),進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)。多聚物沉淀法早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒,現(xiàn)在也被用來(lái)沉淀外泌體。
人體幾乎所有類型的細(xì)胞都能分泌外泌體,外泌體普遍存在并分布于各種體液中,攜帶多種蛋白質(zhì)、mRNA、miRNA和脂質(zhì)類物質(zhì)等,作為重要的傳遞信號(hào)分子,形成了一種全新的細(xì)胞-細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng),可參與細(xì)胞通訊、細(xì)胞遷移、血管新生和一些病癥細(xì)胞生長(zhǎng)等過(guò)程。外泌體與微泡:我們知道,細(xì)胞間相互作用可以通過(guò)釋放蛋白質(zhì)、核酸、脂質(zhì)等分子到胞外與受體結(jié)合從而介導(dǎo)胞內(nèi)細(xì)胞傳導(dǎo)。除此之外,細(xì)胞還可以釋放膜囊泡,外泌體與微泡就是其中兩種,二者相似但形成方式不同:外泌體是細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中的膜囊泡,而微泡則是細(xì)胞出芽與細(xì)胞膜融合后直接脫落形成的囊泡,且外泌體大小均一,直徑在40~100nm,其大小取決于其起源部位以及細(xì)胞中的脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu);而微泡大小不一,直徑在50~1000nm之間。唐山正規(guī)外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹在超速離心力作用下,使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層,是一種區(qū)帶分離法。外泌體的提取、分離方法:免疫親和層析法。南昌正規(guī)外泌體提取試劑
外泌體提取:具有高粘度的生物樣品。昆明正規(guī)外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)
外泌體研究的主要應(yīng)用:外泌體的功能取決于其所來(lái)源的細(xì)胞類型,其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來(lái)源的外泌體參與到一些病癥細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,促進(jìn)了一些病癥的生長(zhǎng)與侵襲。一些病癥。一些病癥轉(zhuǎn)移。來(lái)自白血病干細(xì)胞的外泌體促進(jìn)急性骨髓性白血?。ˋML)細(xì)胞的增殖、遷移和壓制細(xì)胞凋亡。治病靶標(biāo)。利用外泌體遞送小干擾RNA來(lái)沉默KRASG12D,從而特異性高效靶向至胰腺病細(xì)胞,以明顯降低RAS活化、病細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移過(guò)程。免疫。β細(xì)胞將含有蛋白質(zhì)和miRNA的外泌體釋放到細(xì)胞外,并可轉(zhuǎn)移到其他代謝部位或免疫內(nèi)皮細(xì)胞,有利于維持葡萄糖體內(nèi)平衡或造成胰島素抵抗。心血管。外泌體介導(dǎo)miR-155從平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)移到內(nèi)皮細(xì)胞導(dǎo)致了內(nèi)皮細(xì)胞的損傷促進(jìn)動(dòng)脈硬化。分子標(biāo)記。疾病診斷。在酒精性肝病、NASH、菌類性肝炎、藥物性肝損傷和肝細(xì)胞病中發(fā)現(xiàn)循環(huán)EVs的水平上升。預(yù)后標(biāo)志昆明正規(guī)外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)