糖原染色的原理與操作方法是什么:(1)原理:過碘酸將血細胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,定位于細胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。細胞的組織化學方法,是研究細胞成分常用的方法之一。它是利用化學試劑與細胞內(nèi)的某些物質(zhì)進行化學反應,從而在細胞局部形成有色沉淀物,再通過顯微鏡對組織內(nèi)的生物化學成分進行定性、定位、定量研究自早幼粒階段以后的粒細胞和幼單核細胞可呈弱陽性反應。江西口碑好的糖原染色試劑盒廠家直銷
糖原染色的參考值及臨床意義:1.慢性淋巴細胞白血病、淋巴肉瘤等惡性淋巴細胞增生性疾病,其淋巴細胞的PSA染色積分值增高;等淋巴細胞良性增生時,淋巴細胞積分值正常。醫(yī)|學教育網(wǎng)搜集整理故該試驗可用于鑒別良性與惡性淋巴細胞增生性疾病。2.紅白血病時幼紅細胞的PAS染色呈強陽性反應,積分值增高;溶血性貧血及巨幼細胞性貧血時,幼紅細胞的PAS染色積分值在正常范圍內(nèi),故該試驗也可用于紅白血病的診斷及鑒別幼紅細胞增多的性質(zhì)。3.急性粒細胞白血病時,原始及幼稚粒細胞PAS染色常呈陰性反應;急性淋巴細胞白血病時,原始及幼稚淋巴細胞常呈陽性反應;急性單核細胞白血病時,原始及幼稚單核細胞多呈強陽性反應。故PAS染色有助于三種急性白血病類型的鑒別。江西咨詢糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價本試劑盒適用于骨髓細胞涂片,血液細胞涂片。
糖原染色臨床意義:1、急性淋巴細胞白血病、淋巴組織惡性增生性疾病、紅白血病、戈謝病的原始細胞呈強陽性反應或陽性反應;缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙、骨髓增生異常綜合征亦可呈陽性反應;急性粒細胞白血病、急性單核細胞白血病、良性淋巴細胞增多癥、尼曼-皮克細胞呈陰性反應或弱陽性反應。巨幼細胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血等,幼紅細胞為陰性反應。偶有個別幼紅細胞呈陽性反應。2、幫助鑒別不典型巨核細胞和霍奇金細胞,巨核細胞呈強陽性反應;霍奇金細胞呈弱陽性或陰性反應。3、幫助鑒別白血病細胞和腺骨髓轉(zhuǎn)移的腺細胞,腺細胞呈陽性反應。
糖原染色法:染色原理細胞胞漿中存在糖原或多糖類物質(zhì)(如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等),過碘酸能使細胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化為二醛基,其與Schiff試劑中的無色品紅結(jié)合后呈現(xiàn)紫紅色,沉積在細胞內(nèi)多糖所在之處。染色步驟:1.組織石蠟包埋切片后脫蠟至水,蒸餾水洗2min(細胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗);2.滴加過碘酸溶液,氧化5min;3.蒸餾水洗10min;4.滴加Schiff試劑,侵染10-20min;5.傾去Schiff試劑,流水沖洗10min;6.滴加蘇木素染色液,染核1-2min;7.流水沖洗5min;8.酸性乙醇分化液分化。主要用來顯示糖原和其他多糖物質(zhì),因此也稱作糖原染色。
染色的一般原則:因檢測細胞的類型、凋亡誘導劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補償也不同,因此建議每次檢測均需使用凋亡誘導處理的細胞做單陽對照,進行熒光補償?shù)恼{(diào)節(jié)。標記抗體常用熒光素FITC,EGFP激發(fā)光:488nm發(fā)射光:525nm;使用面較廣,價格便宜。PE激發(fā)光488nm發(fā)射光575nm,此熒光的激發(fā)效率較佳,故此熒光得到的信號較強;檢測某些弱表達的抗原,推薦使用此熒光素。價格較FITC昂貴。APC激發(fā)光633nm,發(fā)射光660nm,在配有雙激光的流式細胞儀上,此熒光染料可與7-AAD或PI共同使用來避開自帶綠色熒光的樣本。流式細胞儀相關(guān)試劑盒。切片脫蠟應盡量干凈,否則影響染色效果。江西咨詢糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價
可以觀察腎小球基底膜、結(jié)腸杯狀細胞中性黏液物質(zhì)、阿米巴滋養(yǎng)體和霉菌的著色。江西口碑好的糖原染色試劑盒廠家直銷
特染的應用價值:現(xiàn)代病理學中免疫組織化學技術(shù)、電子顯微鏡技術(shù)以及其它細胞及分子生物學技術(shù)應用日益普遍,但由于這些技術(shù)要求一定的實驗條件以及所需的試劑價格較為昂貴,對于一部分病人以及某一些基層醫(yī)院是比較難以接受的。而組織化學技術(shù)則具有無需復雜的實驗條件以及較為昂貴的試劑操作又比較簡單的優(yōu)勢,在臨床病理學診斷中具有重要的應用價值。比如,當細胞中出現(xiàn)色素,是黑色素還是含鐵血黃素以及當組織中出現(xiàn)均一化學物質(zhì)是否為淀粉樣變性等,用組織化學技術(shù)區(qū)別起來很簡單,所以組織化學技術(shù),雖然已有幾十年到幾百年的歷史,仍是一個很有實用價值的技術(shù)江西口碑好的糖原染色試劑盒廠家直銷
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