我們都知道干細(xì)胞是十分脆弱的，培養(yǎng)干細(xì)胞大多使用胎牛血清來完成實(shí)驗(yàn)。胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛；新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。顯然，胎牛血清是品質(zhì)更高的，因?yàn)樘ヅ＿€未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分更少。優(yōu)良的胎牛血清不僅為細(xì)胞提供細(xì)胞生產(chǎn)提供不可替代的營養(yǎng)成分，也會(huì)讓細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)更輕松。提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的天然元素或天然的生長(zhǎng)因子。提供天然的結(jié)合蛋白，能識(shí)別氨基酸、脂質(zhì)、金屬離子和元素等，能結(jié)合并調(diào)節(jié)它們的活性。已知清蛋白(albumin）即具有上述功能，并對(duì)細(xì)胞代謝、生物合成、增殖和存活具有潛在的影響。又如胎牛血清中富含胎球蛋白（Fetuin），具有多個(gè)鈣離子結(jié)合位點(diǎn)，因而能調(diào)節(jié)和維持血清中的鈣離子濃度。胎牛血里的生長(zhǎng)因子適合牛體內(nèi)各種細(xì)胞生長(zhǎng)，通常在8個(gè)月胎齡后慢慢消失。南通天狼星紅染色試劑盒
胎牛血清是妊娠后期剖腹取出的胎牛血清。胎牛血清營養(yǎng)成分完全而豐富，代謝產(chǎn)物極少，微生物傳染的可能性更小，品質(zhì)更高，是組織細(xì)胞培養(yǎng)和病毒增殖時(shí)的重要營養(yǎng)來源。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，經(jīng)常加入5%-20%的胎牛血清(澳洲)，更常使用的胎牛血清(澳洲)濃度是10%。高濃度的血清可能改變細(xì)胞的基因表達(dá)譜，影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，在實(shí)驗(yàn)中使用10%的澳洲胎牛血清培養(yǎng)293T細(xì)胞，效果非常好。但是有些細(xì)胞也會(huì)使用5%的胎牛血清(澳洲)或者20%的胎牛血清(澳洲)，要根據(jù)具體細(xì)胞選擇合適的胎牛血清(澳洲)濃度。宿遷培養(yǎng)基胎牛血清是營養(yǎng)和能量來源；生長(zhǎng)和粘附因子；肽和類固醇元素；載體蛋白。
為什么使用胎兒血清而不是新生兒血清或成人血清？胎兒血清含有較多的生長(zhǎng)因子，丙種球蛋白（即抗體）含量較低，非胎兒血清也有。這些很重要，因?yàn)樯L(zhǎng)因子促進(jìn)細(xì)胞存活和增殖，而抗體可以與培養(yǎng)的細(xì)胞結(jié)合。此外，與成人或新生兒相比，胎兒血清中的補(bǔ)體蛋白（補(bǔ)體）含量較低。這些補(bǔ)體具有溶解培養(yǎng)細(xì)胞和干擾免疫測(cè)定的不良作用。血清和血漿均來自全血，通過離心去除包括紅細(xì)胞在內(nèi)的成分。血漿和血清之間的區(qū)別在于，凝血蛋白存在于血漿中，但已從血清中去除。血漿一般是通過在離心前向血液中加入抗凝劑來制備的，但不會(huì)去除凝血蛋白。通過在離心前使血液凝固或通過普遍/漸進(jìn)離心來制備血清。因此，與凝血相關(guān)的纖維蛋白原和蛋白質(zhì)不存在于血清中。
為什么血清具有批次間可變性？血清是從生物來源提取的，其成分會(huì)存在批次之間的差異。為了盡可能減少應(yīng)用變化，我們對(duì)每個(gè)批次均執(zhí)行嚴(yán)格的質(zhì)量檢測(cè)，使用高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，盡可能確保批間一致性。胎牛血清的顏色和我之前使用的批次不同，會(huì)影響血清使用效果嗎？血清的顏色取決于血紅蛋白濃度，而該參數(shù)的差異不會(huì)影響血清的性能。為什么血清的來源很重要？血清的來源(或原產(chǎn)地)是指收集未加工血液的國家。不要與血清分離、過濾或其他加工處理所在國家混淆，二者可能是不同的。血清供應(yīng)商的CoA文件應(yīng)該明確寫明血清原產(chǎn)地和加工信息。由于胎牛血清與新生牛血清存在細(xì)微差異，因此它們的用途與用法也不盡相同。
使用胎牛血清的注意事項(xiàng)：注意解凍的方法，再高質(zhì)量的胎牛血清也要在使用的時(shí)候堅(jiān)持謹(jǐn)慎的原則，因此在解凍血清的時(shí)候，要細(xì)心地考慮到其解凍時(shí)體積一般會(huì)增大的特點(diǎn)，事先為血清預(yù)留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來，便不會(huì)發(fā)生污染或者容器凍裂的情況。另外更好采用分步解凍的方式解凍血清，即先利用冰箱或冷庫將其溶解滿幾天，之后在室溫下全溶后再進(jìn)行分裝。胎牛血清的滅活，一般是用水浴加熱的方式來加熱已經(jīng)完全解凍的血清，那么需要注意的是，加熱的過程中一定要規(guī)則地將血清搖晃均勻。而之所以這么做，是為了能夠讓血清中的補(bǔ)體成分去活化。不過胎牛血清的滅活并不是強(qiáng)制的要求，客戶可以自行選擇是否進(jìn)行滅火處理。真正的胎牛血清凝血功容易破裂。昆山DMEM 培養(yǎng)基(高糖,無酚紅）
雖然胎牛血清與新生牛血清的成分并不存在很大的差別，可是諸如促細(xì)胞生長(zhǎng)因子和促貼附因子等組份并不相同。南通天狼星紅染色試劑盒
胎牛血清使用中的常見問題：血清中包含絮狀沉淀，它們是什么，怎么處理?沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性，不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀，離心血清(400g，1-2分鐘)或者簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀，因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。所以，使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃，沉淀會(huì)自然消失。實(shí)驗(yàn)室如何選擇適合的血清?國內(nèi)一致認(rèn)為HYCLONE的血清是更好的，但是根據(jù)我在北美的經(jīng)歷，國外一般認(rèn)為GIBCO比HYCLONE好，所以并不是價(jià)格決定質(zhì)量，但是總的來說這兩種價(jià)格普遍偏貴，一般不是太嬌氣的細(xì)胞，國產(chǎn)的就夠用了。此外，由于國內(nèi)HYCLONE，GIBCO并沒有生產(chǎn)線，我們只能從代理商那里買，而代理商又魚龍混雜，所以買到假貨的可能性也很大。南通天狼星紅染色試劑盒
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