靖江Biochannel培養(yǎng)基

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-02-17

對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)而言,胎牛血清(FetalBovineSerum,F(xiàn)BS)的重要性不言而喻。盡管近年來(lái)無(wú)血清培養(yǎng)基和非動(dòng)物來(lái)源的培養(yǎng)基越來(lái)越受到關(guān)注,但目前大部分細(xì)胞還無(wú)法適用這些培養(yǎng)基,并且存在費(fèi)用較高和細(xì)胞生長(zhǎng)較緩慢的缺點(diǎn),因此,含有FBS的完全培養(yǎng)基仍然是目前主流的細(xì)胞培養(yǎng)體系。把細(xì)胞養(yǎng)好的三個(gè)關(guān)鍵要素是:良好的細(xì)胞來(lái)源,正確的實(shí)驗(yàn)操作,以及合適的培養(yǎng)體系。其中“合適的培養(yǎng)體系”就是要?jiǎng)?chuàng)造適合細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境,給細(xì)胞建立一個(gè)滿意的“家”,而FBS就好比于這個(gè)家的裝修,可以提高細(xì)胞的居住環(huán)境和舒適性,讓細(xì)胞更好更快地生長(zhǎng)!胎牛血清常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。靖江Biochannel培養(yǎng)基

胎牛血清使用中的常見問(wèn)題:血清中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無(wú)菌瓶里(一般不建議采用過(guò)濾的方法除去沉淀,因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無(wú)法過(guò)濾)。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。所以,使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃,沉淀會(huì)自然消失。實(shí)驗(yàn)室如何選擇適合的血清?國(guó)內(nèi)一致認(rèn)為HYCLONE的血清是更好的,但是根據(jù)我在北美的經(jīng)歷,國(guó)外一般認(rèn)為GIBCO比HYCLONE好,所以并不是價(jià)格決定質(zhì)量,但是總的來(lái)說(shuō)這兩種價(jià)格普遍偏貴,一般不是太嬌氣的細(xì)胞,國(guó)產(chǎn)的就夠用了。此外,由于國(guó)內(nèi)HYCLONE,GIBCO并沒(méi)有生產(chǎn)線,我們只能從代理商那里買,而代理商又魚龍混雜,所以買到假貨的可能性也很大。淮安RPMI 1640 Medium (含雙抗)對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)而言,胎牛血清(FetalBovineSerum,F(xiàn)BS)的重要性不言而喻。

如何解凍血清?血清應(yīng)該在2-8°C過(guò)夜解凍以避免降解,或者在室溫條件下,定期輕輕搖動(dòng)使組分重懸。解凍的血清在加入細(xì)胞培養(yǎng)基前應(yīng)該混合均勻。由于反復(fù)凍存會(huì)嚴(yán)重影響血清品質(zhì),建議將解凍的血清分裝成單次使用量,并凍存于-20°C。如果儲(chǔ)存于2-8°C,應(yīng)該在2-4周使用。溫度超過(guò)37°C時(shí)會(huì)降解營(yíng)養(yǎng)成分,破壞血清功能。如果血清收到時(shí)存在部分解凍,還能繼續(xù)使用嗎?血清是干冰包裝運(yùn)輸,到達(dá)時(shí)應(yīng)該是冷凍狀態(tài)。但是,如果由于運(yùn)輸時(shí)間超期導(dǎo)致部分解凍,依然可以繼續(xù)使用。完全解凍后分裝成單次用量進(jìn)行凍存。血清產(chǎn)品的保質(zhì)期是多久?大部分血清產(chǎn)品,在未開封凍存的情況下生產(chǎn)之日起5年,具體可參考瓶身或CoA上的信息。

胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)更高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分更少。胎牛血清各項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)符合2005版《中華人民共和國(guó)藥典》第三部附錄的要求。1、性狀、外觀淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。2、蛋白質(zhì)含量3.5%~5.0%(w/v)3、血紅蛋白含量≤0.02%(w/v)4、無(wú)菌檢驗(yàn):陰性。5、支原體檢驗(yàn):陰性。6、細(xì)菌內(nèi)有害元素≤5(EU/ml)7、牛腹瀉病毒,陰性,8、大腸桿菌噬菌體,陰性,9、支持細(xì)胞增殖(Sp2/0-Ag14)生長(zhǎng)曲線(接種濃度)更大增殖濃度≥2.5×106個(gè)/ml,細(xì)胞倍增時(shí)間≤15h,克隆率≥85%。胎牛血清蛋白和脂類含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡。

胎牛血清(FetalBovineSerum,F(xiàn)BS)是一種取自牛胚胎的血清,常用于配置動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)基。胎牛血清中含有生長(zhǎng)因子等蛋白質(zhì),且抗體含量少。細(xì)胞生物學(xué)的研究人員通常會(huì)在培養(yǎng)基中加入一定比例的胎牛血清,以幫助維持體外培養(yǎng)(invitro)的細(xì)胞的存活。但胎牛血清的組成復(fù)雜多變,研究人員一般將其視作成分不明的混合物,認(rèn)為其可能增加實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不確定性。如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清,并避免反復(fù)凍融。我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若一次無(wú)法用完一瓶,建議無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。胎牛血清可以起到緩解酸堿度的作用,目前這方面的作用已經(jīng)得到了證實(shí)。靖江Biochannel培養(yǎng)基

由于胎牛血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間。靖江Biochannel培養(yǎng)基

什么是優(yōu)良的胎牛血清?微生物,包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性的病毒等。隨著國(guó)內(nèi)血清廠家生產(chǎn)條件的改善提高,細(xì)菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制,支原體經(jīng)過(guò)0.1μm過(guò)濾,大多也能清理。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴(yán)重的,主要是生產(chǎn)環(huán)境過(guò)程中帶入,又無(wú)法過(guò)濾,很難徹底清理,但對(duì)血清質(zhì)量影響不大。病原性的病毒,特別是BVDV,在國(guó)產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一,而進(jìn)口胎牛血清相對(duì)國(guó)產(chǎn)血清而言,檢出率不高。靖江Biochannel培養(yǎng)基

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