胎牛血清是妊娠后期剖腹取出的胎牛血清。胎牛血清營養(yǎng)成分完全而豐富,代謝產(chǎn)物極少,微生物傳染的可能性更小,品質(zhì)更高,是組織細(xì)胞培養(yǎng)和病毒增殖時的重要營養(yǎng)來源。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,經(jīng)常加入5%-20%的胎牛血清(澳洲),更常使用的胎牛血清(澳洲)濃度是10%。高濃度的血清可能改變細(xì)胞的基因表達(dá)譜,影響后續(xù)實驗的結(jié)果,在實驗中使用10%的澳洲胎牛血清培養(yǎng)293T細(xì)胞,效果非常好。但是有些細(xì)胞也會使用5%的胎牛血清(澳洲)或者20%的胎牛血清(澳洲),要根據(jù)具體細(xì)胞選擇合適的胎牛血清(澳洲)濃度。真正的胎牛血清凝血功容易破裂。RPMI 1640 Medium (含雙抗)生產(chǎn)商
胎牛血清都有哪些重要的指標(biāo):一、內(nèi)有害元素,內(nèi)有害元素是革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁外壁層上的特有成分。當(dāng)細(xì)菌死亡自溶或粘附在其它細(xì)胞時,才表現(xiàn)其毒性。內(nèi)有害元素直接參與細(xì)胞凋亡,血清中內(nèi)有害元素含量越低,對細(xì)胞毒性越小,越利于細(xì)胞的生長和傳代;內(nèi)有害元素含量過高,會直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。國際上規(guī)定,胎牛血清的級別,應(yīng)以內(nèi)有害元素水平的高低來確定,其中,特級胎牛血清的內(nèi)有害元素應(yīng)。二、血紅蛋白含量,胎牛血清的顏色會根據(jù)血紅蛋白含量的不同表現(xiàn)出黃色、淡黃色、橘紅色、微紅色等。細(xì)胞培養(yǎng)用血清的標(biāo)準(zhǔn)是血紅蛋白含量不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高;反之,數(shù)值越低。實際上,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響。這個指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采集血液過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的溶血。RPMI 1640培養(yǎng)基(無硝酸鈣)廠家供應(yīng)胎牛血清能識別并結(jié)合維生素、脂類、金屬和其他元素等,能調(diào)節(jié)它們所結(jié)合分子的活力。
胎牛血清的作用有哪些?保護細(xì)胞,胎牛血清可以為生日包的生長提供一些重要的元素,同時可以為身體提供蛋白質(zhì),能夠識別維生素和一些其他的物質(zhì),因此能夠比較好的來處理一些有害物質(zhì)。這個產(chǎn)品也可以提供蛋白酶的抑制劑,可以使細(xì)胞傳代時,將剩余的胰蛋白酶失去活性,因此能夠起到保護細(xì)胞不受到傷害的作用。胎牛血清是一個比較先進(jìn)的產(chǎn)品,也是一個比較先進(jìn)的研發(fā)成果,目前的生產(chǎn)成本是比較高的,所以在市面上的價格并不會太便宜,根據(jù)了解目前的銷售價格可能需要2000多元,所以大家看到幾百元的產(chǎn)品要慎重的購買,當(dāng)然可能也會與規(guī)格的大小有密切的關(guān)系。
胎牛血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、元素、無機物等,這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。功能:牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的元素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他元素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到消毒作用。4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細(xì)胞不受傷害。胎牛血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物。
如何解凍血清?血清應(yīng)該在2-8°C過夜解凍以避免降解,或者在室溫條件下,定期輕輕搖動使組分重懸。解凍的血清在加入細(xì)胞培養(yǎng)基前應(yīng)該混合均勻。由于反復(fù)凍存會嚴(yán)重影響血清品質(zhì),建議將解凍的血清分裝成單次使用量,并凍存于-20°C。如果儲存于2-8°C,應(yīng)該在2-4周使用。溫度超過37°C時會降解營養(yǎng)成分,破壞血清功能。如果血清收到時存在部分解凍,還能繼續(xù)使用嗎?血清是干冰包裝運輸,到達(dá)時應(yīng)該是冷凍狀態(tài)。但是,如果由于運輸時間超期導(dǎo)致部分解凍,依然可以繼續(xù)使用。完全解凍后分裝成單次用量進(jìn)行凍存。血清產(chǎn)品的保質(zhì)期是多久?大部分血清產(chǎn)品,在未開封凍存的情況下生產(chǎn)之日起5年,具體可參考瓶身或CoA上的信息。胎牛血清還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細(xì)胞有害的成分更少。舟山培養(yǎng)基
胎牛血清提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的元素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。RPMI 1640 Medium (含雙抗)生產(chǎn)商
胎牛血清的保存方法:1、需要長期保存的胎牛血清須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會被破壞,而影響血清質(zhì)量。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中。由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。2、一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清。3、胎牛血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。RPMI 1640 Medium (含雙抗)生產(chǎn)商
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