細胞培養(yǎng)中胎牛血清的重要作用：許多臨床和做科研的小伙伴們都要涉及到細胞培養(yǎng)，在細胞培養(yǎng)實驗中，血清無疑成為影響實驗成功與否的重要因素，而在眾多血清之中，牛血清是更為常用的。牛血清是細胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基，其中含有豐富的細胞生長所必須的營養(yǎng)成分，常用于動物細胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。牛血清是一種成分復(fù)雜的混合物，而且血清的組成及含量通常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而存在差異。牛血清主要成分有蛋白質(zhì)，多肽類，元素類，其他成分如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛；新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。舟山胎牛血清
胎牛血清、新生牛血清、小牛血清區(qū)別三者之間的區(qū)別：1、采集血液時間不同，胎牛血清（FetalBovineSerum）是在母牛懷孕5-8個月時，通過胎牛心臟穿刺采集血液獲取的血清。新生牛血清（NewbornCalfSerum）是來自剛出生~出生后2周內(nèi)的新生牛靜脈取血。小牛血清（CalfSerum）采自出生后2周至1年內(nèi)的小牛靜脈取血。2、組份與比例不同，兩者所含的促細胞生長因子、促貼附因子、元素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同。胎牛血清尤其含有胚胎發(fā)育所必需的生長因子。一些生長因子到胎牛10個月時就消失了。用途與用法不同，某些細胞必需胎牛血清才能生長，而有些細胞只需小牛血清即可。使用濃度一般在5%-10%，有特殊要求的濃度在**MEM (High Glucose)供貨商真正的胎牛血清，一般表現(xiàn)出微紅色或橘紅色。
胎牛血清使用中的常見問題：血清中包含絮狀沉淀，它們是什么，怎么處理?沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性，不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀，離心血清(400g，1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀，因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以，使用產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37℃，沉淀會自然消失。實驗室如何選擇適合的血清?國內(nèi)一致認為HYCLONE的血清是更好的，但是根據(jù)我在北美的經(jīng)歷，國外一般認為GIBCO比HYCLONE好，所以并不是價格決定質(zhì)量，但是總的來說這兩種價格普遍偏貴，一般不是太嬌氣的細胞，國產(chǎn)的就夠用了。此外，由于國內(nèi)HYCLONE，GIBCO并沒有生產(chǎn)線，我們只能從代理商那里買，而代理商又魚龍混雜，所以買到假貨的可能性也很大。
為什么使用胎兒血清而不是新生兒血清或成人血清？胎兒血清含有較多的生長因子，丙種球蛋白（即抗體）含量較低，非胎兒血清也有。這些很重要，因為生長因子促進細胞存活和增殖，而抗體可以與培養(yǎng)的細胞結(jié)合。此外，與成人或新生兒相比，胎兒血清中的補體蛋白（補體）含量較低。這些補體具有溶解培養(yǎng)細胞和干擾免疫測定的不良作用。血清和血漿均來自全血，通過離心去除包括紅細胞在內(nèi)的成分。血漿和血清之間的區(qū)別在于，凝血蛋白存在于血漿中，但已從血清中去除。血漿一般是通過在離心前向血液中加入抗凝劑來制備的，但不會去除凝血蛋白。通過在離心前使血液凝固或通過普遍/漸進離心來制備血清。因此，與凝血相關(guān)的纖維蛋白原和蛋白質(zhì)不存在于血清中。胎牛血清應(yīng)該存放在-20℃環(huán)境的地方。
胎牛血清應(yīng)該怎么選？穩(wěn)定性，F(xiàn)BS作為其他行業(yè)的副產(chǎn)品，其生產(chǎn)在本質(zhì)上會受到天氣、食物供應(yīng)、經(jīng)濟條件和牛群規(guī)模及病情等各種因素的影響，導(dǎo)致血清的供應(yīng)可能出現(xiàn)貨源、價格及批次間的不穩(wěn)定性，從而造成實驗的不順甚至實驗失敗。在過去，國內(nèi)外已有多個實驗室出現(xiàn)過因血清批間差異大而導(dǎo)致實驗結(jié)果無法重復(fù)的情況，浪費了巨大的時間和金錢成本。因此，找到穩(wěn)定提供同批次FBS的供應(yīng)商，對于確保自己細胞實驗結(jié)果的真實性和可重復(fù)性具有重要意義，而且花在重復(fù)實驗或檢驗新批次上的時間將很大減少。胎牛血清是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。金華Masson三色染色試劑盒
胎牛血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。舟山胎牛血清
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成分雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、元素、無機物等，這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。牛血清是細胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成分，常用于動物細胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。1.提供對維持細胞指數(shù)生長的元素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白，能識別維生素、脂類、金屬和其他元素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到消毒作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。舟山胎牛血清
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