湖州DMEM(高糖)培養(yǎng)基(含雙抗)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-11-09

胎牛血清(FBS)用作真核細(xì)胞體外細(xì)胞培養(yǎng)的生長(zhǎng)補(bǔ)充劑。動(dòng)物血清(牛血清和非牛血清)都用于細(xì)胞培養(yǎng),其中使用更普遍的是胎牛血清(FBS)。FBS含有生長(zhǎng)因子和極低水平的抗體,因此在許多不同的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用中具有多功能性。在FBS中發(fā)現(xiàn)了1000多種成分,包括蛋白質(zhì),電解質(zhì),脂質(zhì),碳水化合物,元素,酶和其他未定義的成分,這些成分在許多培養(yǎng)條件下對(duì)于支持細(xì)胞生長(zhǎng)都是必需的。制造環(huán)境中的學(xué)術(shù)和工業(yè)研究人員以及科學(xué)家都在其細(xì)胞培養(yǎng)基中使用胎牛血清(FBS)進(jìn)行調(diào)查,包括生物技術(shù)研究/生產(chǎn),疫苗制造,克隆和動(dòng)物診斷。對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)而言,胎牛血清(FetalBovineSerum,F(xiàn)BS)的重要性不言而喻。湖州DMEM(高糖)培養(yǎng)基(含雙抗)

為什么使用胎兒血清而不是新生兒血清或成人血清?胎兒血清含有較多的生長(zhǎng)因子,丙種球蛋白(即抗體)含量較低,非胎兒血清也有。這些很重要,因?yàn)樯L(zhǎng)因子促進(jìn)細(xì)胞存活和增殖,而抗體可以與培養(yǎng)的細(xì)胞結(jié)合。此外,與成人或新生兒相比,胎兒血清中的補(bǔ)體蛋白(補(bǔ)體)含量較低。這些補(bǔ)體具有溶解培養(yǎng)細(xì)胞和干擾免疫測(cè)定的不良作用。血清和血漿均來(lái)自全血,通過(guò)離心去除包括紅細(xì)胞在內(nèi)的成分。血漿和血清之間的區(qū)別在于,凝血蛋白存在于血漿中,但已從血清中去除。血漿一般是通過(guò)在離心前向血液中加入抗凝劑來(lái)制備的,但不會(huì)去除凝血蛋白。通過(guò)在離心前使血液凝固或通過(guò)普遍/漸進(jìn)離心來(lái)制備血清。因此,與凝血相關(guān)的纖維蛋白原和蛋白質(zhì)不存在于血清中。臨海Bouin's固定液胎牛血清是一種性狀、外觀(guān)淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。

胎牛血清給細(xì)胞提供的益處主要體現(xiàn)在6個(gè)方面:1、提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的天然元素或天然的生長(zhǎng)因子。2、提供天然的結(jié)合蛋白,能識(shí)別氨基酸、脂質(zhì)、金屬離子和元素等,能結(jié)合并調(diào)節(jié)它們的活性。已知清蛋白(albumin)即具有上述功能,并對(duì)細(xì)胞代謝、生物合成、增殖和存活具有潛在的影響。又如胎牛血清中富含胎球蛋白(Fetuin),具有多個(gè)鈣離子結(jié)合位點(diǎn),因而能調(diào)節(jié)和維持血清中的鈣離子濃度。3、天然含有粘附蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)成分,促進(jìn)細(xì)胞的附著、鋪展。4、提供消毒功能。這主要通過(guò)血清中的某些蛋白與有毒的金屬離子結(jié)合來(lái)完成的。如金屬硫蛋白,對(duì)多種重金屬有高度親和性,并可清理細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境中的氧自由基(·O),具有很強(qiáng)的抗氧化活性,可防止細(xì)胞衰老。5、提供酸堿度緩沖的作用,以及維持滲透壓。6、提供蛋白酶抑制劑,使細(xì)胞免受蛋白酶的損傷。因此在細(xì)胞消化時(shí),常用含血清的培養(yǎng)液終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。

血清是細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中常用的生物試劑,市面上有很多種類(lèi)的血清,現(xiàn)在就來(lái)給大家介紹其中的一款——透析胎牛血清。透析胎牛血清是采用透析的方法,過(guò)濾去除10KDa以下的小分子(如氨基酸、核苷:次黃嘌呤和胸腺核苷等、膽固醇等),而保留血清中的大分子成分,因而可用于一些特定的細(xì)胞實(shí)驗(yàn),比如:需要避免細(xì)胞培養(yǎng)基中一些小分子干擾的實(shí)驗(yàn)。使用放射性標(biāo)記小分子,對(duì)生物合成過(guò)程進(jìn)行監(jiān)測(cè),以研究蛋白質(zhì)等大分子的生化性質(zhì)、合成、加工、細(xì)胞內(nèi)傳送、分泌和降解過(guò)程。這時(shí),常將細(xì)胞放在含有充足養(yǎng)分和放射性標(biāo)記氨基酸(如35S標(biāo)記的蛋氨酸或半胱氨酸)的培養(yǎng)液中進(jìn)行標(biāo)記。為避免外源未標(biāo)記的氨基酸的干擾,這時(shí)所用的血清就是透析胎牛血清,不含蛋氨酸和半胱氨酸,基礎(chǔ)培養(yǎng)基也要求不含蛋氨酸和半胱氨酸。胎牛血清的免疫球蛋白含量要遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于新生牛血清,胎牛的血清相對(duì)來(lái)說(shuō)比較純。

血清是基礎(chǔ)培養(yǎng)基中極為重要的細(xì)胞生長(zhǎng)和粘附因子、元素、脂質(zhì)和礦物質(zhì)來(lái)源。此外,血清還可調(diào)節(jié)細(xì)胞膜通透性,并可作為向細(xì)胞內(nèi)運(yùn)送脂質(zhì)、酶、微量營(yíng)養(yǎng)素和微量元素的載體。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,具有極為重要的功能。牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清(FetalBovineSerum)是通過(guò)無(wú)菌手術(shù)剖腹后取胎,穿刺心臟采集血液制成。胎牛血清中所含的對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞有害的成分(抗體等)非常少,故質(zhì)量更高。有些胎牛血清沒(méi)有預(yù)老化,儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。龍泉標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清Fetal Bovine Serum(Standard)

胎牛血清免受蛋白酶、毒性物質(zhì)、PH值波動(dòng)、機(jī)械剪切力、氧化及自由基的損傷。湖州DMEM(高糖)培養(yǎng)基(含雙抗)

如今已經(jīng)成為各大實(shí)驗(yàn)室“??汀钡奶ヅQ?,是一種采集自新鮮的牛血液的優(yōu)良血清。胎牛血清主要的作用就是提供基本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及提供接觸和伸展因子,有效避免細(xì)胞貼壁受到機(jī)械的損傷。如此看來(lái)胎牛血清確實(shí)發(fā)揮出非常大的作用,那么為了讓其充分發(fā)揮更大的價(jià)值該注意哪些事項(xiàng)呢?注意避免沉淀加入培養(yǎng)液,添加胎牛血清的時(shí)候要注意避免把沉淀加入培養(yǎng)液,因?yàn)槿绻囵B(yǎng)液有沉淀的存在,會(huì)使得其中培養(yǎng)的細(xì)胞產(chǎn)生大量的黑點(diǎn),除此之外,細(xì)胞的表面還很可能會(huì)覆蓋一層油狀物質(zhì),總之出現(xiàn)這樣的情況會(huì)極其不利于細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。那么為了更大程度減少血清的損失,可以把所有有沉淀的血清進(jìn)行收集并做離心處理,之后便可將上清液加入培養(yǎng)液中使用。湖州DMEM(高糖)培養(yǎng)基(含雙抗)

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