為什么使用胎兒血清而不是新生兒血清或成人血清?胎兒血清含有較多的生長因子,丙種球蛋白(即抗體)含量較低,非胎兒血清也有。這些很重要,因為生長因子促進細胞存活和增殖,而抗體可以與培養(yǎng)的細胞結(jié)合。此外,與成人或新生兒相比,胎兒血清中的補體蛋白(補體)含量較低。這些補體具有溶解培養(yǎng)細胞和干擾免疫測定的不良作用。血清和血漿均來自全血,通過離心去除包括紅細胞在內(nèi)的成分。血漿和血清之間的區(qū)別在于,凝血蛋白存在于血漿中,但已從血清中去除。血漿一般是通過在離心前向血液中加入抗凝劑來制備的,但不會去除凝血蛋白。通過在離心前使血液凝固或通過普遍/漸進離心來制備血清。因此,與凝血相關(guān)的纖維蛋白原和蛋白質(zhì)不存在于血清中。進口的胎牛血清:過濾分裝前很少會反復(fù)凍融,生產(chǎn)后的成品也是清澈的。常熟RPMI 1640 Medium
胎牛血清是一種天然產(chǎn)物,原產(chǎn)地牛源的生長環(huán)境和健康狀況對于血清的產(chǎn)量和品質(zhì)都有著重要影響。當產(chǎn)地的氣候、環(huán)境等因素發(fā)生變化時,牛只數(shù)量的減少會直接影響血清產(chǎn)量,例如近年來澳洲爆發(fā)的森林火災(zāi)、千年難遇洪水、藍舌病病情等,對當?shù)匦竽廉a(chǎn)業(yè)造成了深遠影響。隨全球科研領(lǐng)域不斷發(fā)展,血清需求量日益增加,合規(guī)血源變得愈發(fā)珍稀,高等血清更是一貨難求。受此國際市場環(huán)境的巨大沖擊,近期澳大利亞、新西蘭和南美烏拉圭進口胎牛血清的原料價格持續(xù)高漲。江蘇Masson三色染色試劑盒胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。
胎牛血清應(yīng)該怎么選?質(zhì)量驗證,我們使用FBS目的是為了讓細胞更真實、健康地生長。在確保了FBS的來源真實性、安全可靠性后,下一步就要對FBS的質(zhì)量,即培養(yǎng)細胞的效果進行鑒定了,而這也是決定細胞能否養(yǎng)好的關(guān)鍵。在細胞培養(yǎng)過程,質(zhì)量粗糙的FBS可能會導致細胞出現(xiàn)生長速度緩慢、不貼壁、容易老化等現(xiàn)象,從而導致實驗受阻。經(jīng)過質(zhì)量驗證的FBS,則可以十分確定這款FBS對哪些細胞具有良好的培養(yǎng)效果,進而判斷其能否把自己的細胞養(yǎng)好。對于質(zhì)量優(yōu)良的FBS,通常采用血清敏感性細胞(如干細胞)來進行培養(yǎng)驗證,若培養(yǎng)效果良好,則其他常規(guī)細胞系的培養(yǎng)就更不在話下。
牛血清是細胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。提供對維持細胞指數(shù)生長的元素、基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物;提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他元素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力;有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到消毒作用;是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源;起酸堿度緩沖液作用;提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。胎牛血清是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。
胎牛血清(FBS)用作真核細胞體外細胞培養(yǎng)的生長補充劑。動物血清(牛血清和非牛血清)都用于細胞培養(yǎng),其中使用更普遍的是胎牛血清(FBS)。FBS含有生長因子和極低水平的抗體,因此在許多不同的細胞培養(yǎng)應(yīng)用中具有多功能性。在FBS中發(fā)現(xiàn)了1000多種成分,包括蛋白質(zhì),電解質(zhì),脂質(zhì),碳水化合物,元素,酶和其他未定義的成分,這些成分在許多培養(yǎng)條件下對于支持細胞生長都是必需的。制造環(huán)境中的學術(shù)和工業(yè)研究人員以及科學家都在其細胞培養(yǎng)基中使用胎牛血清(FBS)進行調(diào)查,包括生物技術(shù)研究/生產(chǎn),疫苗制造,克隆和動物診斷。胎牛血清全程冷鏈運輸,無凍融現(xiàn)象。江蘇Masson三色染色試劑盒
胎牛血清是細胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成分。常熟RPMI 1640 Medium
胎牛血清的保存方法:熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍的血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分滅活。除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物明顯增多,而且還會影響血清的質(zhì)量。補體參與反應(yīng)有:細胞毒作用,平滑肌細胞收縮,肥大細胞和血小板釋放組胺,增強吞噬作用,促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學趨化和活化。血清中的沉淀物絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量。可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理。顯微鏡下"小黑點":經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會明顯增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染。一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號的血清。常熟RPMI 1640 Medium
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