血清是細(xì)胞培養(yǎng)過程中常用的生物試劑，市面上有很多種類的血清，現(xiàn)在就來給大家介紹其中的一款——透析胎牛血清。透析胎牛血清是采用透析的方法，過濾去除10KDa以下的小分子（如氨基酸、核苷：次黃嘌呤和胸腺核苷等、膽固醇等），而保留血清中的大分子成分，因而可用于一些特定的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，比如：需要避免細(xì)胞培養(yǎng)基中一些小分子干擾的實(shí)驗(yàn)。使用放射性標(biāo)記小分子，對生物合成過程進(jìn)行監(jiān)測，以研究蛋白質(zhì)等大分子的生化性質(zhì)、合成、加工、細(xì)胞內(nèi)傳送、分泌和降解過程。這時，常將細(xì)胞放在含有充足養(yǎng)分和放射性標(biāo)記氨基酸（如35S標(biāo)記的蛋氨酸或半胱氨酸）的培養(yǎng)液中進(jìn)行標(biāo)記。為避免外源未標(biāo)記的氨基酸的干擾，這時所用的血清就是透析胎牛血清，不含蛋氨酸和半胱氨酸，基礎(chǔ)培養(yǎng)基也要求不含蛋氨酸和半胱氨酸。胎牛血清嚴(yán)格QC標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行微生物、有害元素、血紅蛋白、IgG含量等多項(xiàng)檢測。嘉興DMEM 培養(yǎng)基(高糖,無酚紅）
什么是優(yōu)良的胎牛血清？免疫球蛋白，國產(chǎn)血清的只是定性檢測，結(jié)果也很不準(zhǔn)確，進(jìn)口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數(shù)值能完全體現(xiàn)出采集血液的時的牛齡情況，國產(chǎn)血清，基本都是新生牛的，血清中容易產(chǎn)生IgM，IgG的含量也偏高，進(jìn)口胎牛血清，不含IgM，IgG的含量也較低。維生素含量，此外，維生素的使用也是要考慮在內(nèi)的。國內(nèi)外的血清，都不對維生素進(jìn)行測試（無四環(huán)素胎牛血清理外）。其中，由于國外維生素使用較為嚴(yán)格，用量有限，同時每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以追溯源頭，所以國外胎牛血清不含維生素或者含量極低。但是國內(nèi)由于維生素使用普遍，血清中殘留量很高，導(dǎo)致國產(chǎn)血清質(zhì)量很差，不利于細(xì)胞培養(yǎng)。嘉興特級胎牛血清 Fetal Bovine Serum（Superfine）胎牛血清對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。
胎牛血清（FetalBovineSerum，F(xiàn)BS）是一種取自牛胚胎的血清，常用于配置動物細(xì)胞的培養(yǎng)基。胎牛血清中含有生長因子等蛋白質(zhì)，且抗體含量少。細(xì)胞生物學(xué)的研究人員通常會在培養(yǎng)基中加入一定比例的胎牛血清，以幫助維持體外培養(yǎng)（invitro）的細(xì)胞的存活。但胎牛血清的組成復(fù)雜多變，研究人員一般將其視作成分不明的混合物，認(rèn)為其可能增加實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不確定性。如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。長時間儲存在2-8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此，推薦在-20℃以下儲存血清，并避免反復(fù)凍融。我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時，請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。
為什么有些血清是熱滅活的？如何熱滅活？哺乳動物血清中天然存在的補(bǔ)體蛋白參與細(xì)胞溶解事件、收縮平滑肌、從肥大細(xì)胞和血小板中釋放組胺和激發(fā)淋巴細(xì)胞和髓細(xì)胞。熱滅活破壞了血清中補(bǔ)體的活性，因此免疫學(xué)應(yīng)用，培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時推薦使用。熱滅活方法是在56°C水浴中處理30分鐘，并每隔大約10分鐘旋轉(zhuǎn)一次瓶子。為了保持精確，可使用一個類似大小的瓶子作為對照，對照瓶內(nèi)放入同等體積的水，并放置一個溫度計(jì)，在溫度到達(dá)56°C時開始計(jì)時30分鐘。熱滅活過程必須小心控制，避免血清中支持細(xì)胞和組織繁殖的關(guān)鍵蛋白組分發(fā)生降解。胎牛血清的免疫球蛋白含量要遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于新生牛血清，胎牛的血清相對來說比較純。
胎牛血清應(yīng)該怎么選？質(zhì)量驗(yàn)證，我們使用FBS目的是為了讓細(xì)胞更真實(shí)、健康地生長。在確保了FBS的來源真實(shí)性、安全可靠性后，下一步就要對FBS的質(zhì)量，即培養(yǎng)細(xì)胞的效果進(jìn)行鑒定了，而這也是決定細(xì)胞能否養(yǎng)好的關(guān)鍵。在細(xì)胞培養(yǎng)過程，質(zhì)量粗糙的FBS可能會導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)生長速度緩慢、不貼壁、容易老化等現(xiàn)象，從而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)受阻。經(jīng)過質(zhì)量驗(yàn)證的FBS，則可以十分確定這款FBS對哪些細(xì)胞具有良好的培養(yǎng)效果，進(jìn)而判斷其能否把自己的細(xì)胞養(yǎng)好。對于質(zhì)量優(yōu)良的FBS，通常采用血清敏感性細(xì)胞（如干細(xì)胞）來進(jìn)行培養(yǎng)驗(yàn)證，若培養(yǎng)效果良好，則其他常規(guī)細(xì)胞系的培養(yǎng)就更不在話下。胎牛血清極低內(nèi)有害元素，達(dá)到特級標(biāo)準(zhǔn)，使細(xì)胞更健康，實(shí)驗(yàn)更順利。嘉興特級胎牛血清 Fetal Bovine Serum（Superfine）
胎牛血清天然含有粘附蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)成分，促進(jìn)細(xì)胞的附著、鋪展。嘉興DMEM 培養(yǎng)基(高糖,無酚紅）
胎牛血清使用中的常見問題：血清中包含絮狀沉淀，它們是什么，怎么處理?沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性，不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀，離心血清(400g，1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀，因?yàn)槌恋頃氯麨V膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以，使用產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37℃，沉淀會自然消失。實(shí)驗(yàn)室如何選擇適合的血清?國內(nèi)一致認(rèn)為HYCLONE的血清是更好的，但是根據(jù)我在北美的經(jīng)歷，國外一般認(rèn)為GIBCO比HYCLONE好，所以并不是價格決定質(zhì)量，但是總的來說這兩種價格普遍偏貴，一般不是太嬌氣的細(xì)胞，國產(chǎn)的就夠用了。此外，由于國內(nèi)HYCLONE，GIBCO并沒有生產(chǎn)線，我們只能從代理商那里買，而代理商又魚龍混雜，所以買到假貨的可能性也很大。嘉興DMEM 培養(yǎng)基(高糖,無酚紅）
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