如今已經(jīng)成為各大實(shí)驗(yàn)室“常客”的胎牛血清,是一種采集自新鮮的牛血液的優(yōu)良血清。胎牛血清主要的作用就是提供基本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及提供接觸和伸展因子,有效避免細(xì)胞貼壁受到機(jī)械的損傷。如此看來(lái)胎牛血清確實(shí)發(fā)揮出非常大的作用,那么為了讓其充分發(fā)揮更大的價(jià)值該注意哪些事項(xiàng)呢?注意避免沉淀加入培養(yǎng)液,添加胎牛血清的時(shí)候要注意避免把沉淀加入培養(yǎng)液,因?yàn)槿绻囵B(yǎng)液有沉淀的存在,會(huì)使得其中培養(yǎng)的細(xì)胞產(chǎn)生大量的黑點(diǎn),除此之外,細(xì)胞的表面還很可能會(huì)覆蓋一層油狀物質(zhì),總之出現(xiàn)這樣的情況會(huì)極其不利于細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。那么為了更大程度減少血清的損失,可以把所有有沉淀的血清進(jìn)行收集并做離心處理,之后便可將上清液加入培養(yǎng)液中使用。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛。高郵RPMI 1640 Medium
為什么使用胎兒血清而不是新生兒血清或成人血清?胎兒血清含有較多的生長(zhǎng)因子,丙種球蛋白(即抗體)含量較低,非胎兒血清也有。這些很重要,因?yàn)樯L(zhǎng)因子促進(jìn)細(xì)胞存活和增殖,而抗體可以與培養(yǎng)的細(xì)胞結(jié)合。此外,與成人或新生兒相比,胎兒血清中的補(bǔ)體蛋白(補(bǔ)體)含量較低。這些補(bǔ)體具有溶解培養(yǎng)細(xì)胞和干擾免疫測(cè)定的不良作用。血清和血漿均來(lái)自全血,通過(guò)離心去除包括紅細(xì)胞在內(nèi)的成分。血漿和血清之間的區(qū)別在于,凝血蛋白存在于血漿中,但已從血清中去除。血漿一般是通過(guò)在離心前向血液中加入抗凝劑來(lái)制備的,但不會(huì)去除凝血蛋白。通過(guò)在離心前使血液凝固或通過(guò)普遍/漸進(jìn)離心來(lái)制備血清。因此,與凝血相關(guān)的纖維蛋白原和蛋白質(zhì)不存在于血清中。揚(yáng)中優(yōu)級(jí)胎牛血清 Fetal Bovine Serum(Characterized)胎牛血清提供維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激元素、基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物。
牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的元素、基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物;提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他元素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力;有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到消毒作用;是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源;起酸堿度緩沖液作用;提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
胎牛血清(FetalBovineSerum,F(xiàn)BS)是指在健康母牛正常分娩前采集胎牛血液加工而成的血清,由于血清采集時(shí)間早,其胎球蛋白較多,血清白蛋白含量高,而γ-球蛋白含量極低,并富含多種生長(zhǎng)因子,因此,是培養(yǎng)細(xì)胞更為優(yōu)良的牛血清。牛血清的成分復(fù)雜,主要包含蛋白質(zhì)、多肽、元素、氨基酸、葡萄糖等多種營(yíng)養(yǎng)成分。雖然其中大部分成分已為人知,但還有一部分也還不清楚,而且其組分及含量常依動(dòng)物性別、年齡、生理狀態(tài)、營(yíng)養(yǎng)條件不同而有差異。血清理含有促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的成分外,同時(shí)含有內(nèi)有害元素、血色素、補(bǔ)體、抗體等其他有害成分,影響細(xì)胞生長(zhǎng)甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡,因此,通常需要測(cè)試工作才知道對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的效果。低質(zhì)量的血清常被病毒、菌體和支原體等微生物傳染,導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)失敗,浪費(fèi)了科研人員的時(shí)間和精力。胎牛血清可以提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的天然元素或天然的生長(zhǎng)因子。
胎牛血清是妊娠后期剖腹取出的胎牛血清。胎牛血清營(yíng)養(yǎng)成分完全而豐富,代謝產(chǎn)物極少,微生物傳染的可能性更小,品質(zhì)更高,是組織細(xì)胞培養(yǎng)和病毒增殖時(shí)的重要營(yíng)養(yǎng)來(lái)源。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,經(jīng)常加入5%-20%的胎牛血清(澳洲),更常使用的胎牛血清(澳洲)濃度是10%。高濃度的血清可能改變細(xì)胞的基因表達(dá)譜,影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,在實(shí)驗(yàn)中使用10%的澳洲胎牛血清培養(yǎng)293T細(xì)胞,效果非常好。但是有些細(xì)胞也會(huì)使用5%的胎牛血清(澳洲)或者20%的胎牛血清(澳洲),要根據(jù)具體細(xì)胞選擇合適的胎牛血清(澳洲)濃度。胎牛血清全程冷鏈運(yùn)輸,無(wú)凍融現(xiàn)象。揚(yáng)州天狼星紅染色試劑盒
胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。高郵RPMI 1640 Medium
什么是優(yōu)良的胎牛血清?外觀,好的血清應(yīng)是透明清亮,土黃色或棕黃色,無(wú)沉淀或極少沉淀,比較粘稠。如發(fā)現(xiàn)血清渾濁,不透明,含許多沉淀物,說(shuō)明血清污染或血清中的蛋白質(zhì)變性;若棕紅色,說(shuō)明血清中的血紅蛋白含量太高,有溶血現(xiàn)象??偟鞍缀?,胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說(shuō)明采集血液的牛齡偏大,不是胎牛;數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。血紅蛋白,標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高;反之,數(shù)值越低。pH,國(guó)產(chǎn)血清,大多高于7.5,進(jìn)口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關(guān),這也能用來(lái)初步鑒別血清的來(lái)源。高郵RPMI 1640 Medium
杭州昊鑫生物科技股份有限公司專注技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)品研發(fā),發(fā)展規(guī)模團(tuán)隊(duì)不斷壯大。公司目前擁有專業(yè)的技術(shù)員工,為員工提供廣闊的發(fā)展平臺(tái)與成長(zhǎng)空間,為客戶提供高質(zhì)的產(chǎn)品服務(wù),深受員工與客戶好評(píng)。杭州昊鑫生物科技股份有限公司主營(yíng)業(yè)務(wù)涵蓋CCK8/鏈霉親和素磁珠,胎牛血清/培養(yǎng)基,BSA(牛血清白蛋白)V,復(fù)雜植物RNA提取試劑盒,堅(jiān)持“質(zhì)量保證、良好服務(wù)、顧客滿意”的質(zhì)量方針,贏得廣大客戶的支持和信賴。公司憑著雄厚的技術(shù)力量、飽滿的工作態(tài)度、扎實(shí)的工作作風(fēng)、良好的職業(yè)道德,樹(shù)立了良好的CCK8/鏈霉親和素磁珠,胎牛血清/培養(yǎng)基,BSA(牛血清白蛋白)V,復(fù)雜植物RNA提取試劑盒形象,贏得了社會(huì)各界的信任和認(rèn)可。