Q: 實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常用PMSF來保護(hù)蛋白，蛋白酶抑制劑Cocktail和它比有什么優(yōu)勢？A: PMSF是經(jīng)典的絲氨酸蛋白酶抑制劑，以前被普遍應(yīng)用于細(xì)胞裂解純化蛋白過程。但由于PMSF在很多方面存在明顯的缺點(diǎn)，逐步被保護(hù)效果更好，更安全的蛋白酶抑制劑Cocktail所取代。PMSF的毒性較高，因此在蛋白酶抑制劑中選用AEBSF作為其替代品。AEBSF的半致死量是2834mg/kg，而PMSF是200mg/kg，AEBSF安全域值超過PMSF十四倍多，同時(shí)有著相當(dāng)?shù)囊种菩Ч瑢τ诤芏嘟z氨酸蛋白酶的抑制比PMSF更為迅速。PMSF的另一個缺點(diǎn)是易降解失效，它在水溶液中的半衰期是30min，在細(xì)胞裂解過程中很容易失效。而蛋白酶抑制劑Cocktail不但保護(hù)更加多方面，而且效果更加持久。蛋白酶抑制劑，可有效抑制纖溶酶、胰蛋白酶。余姚Resatorvid (瑞沙托維）
CCK-8試劑盒是CellCountingKit的簡稱，是一種應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。其基本原理是：該試劑中含有WST-8（水溶性四唑鹽，化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽），WST-8屬于MTT的升級產(chǎn)品，在電子耦合試劑1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-MethoxyPMS)存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物(Formazan)，反應(yīng)機(jī)制如下圖所示。生成的甲臜物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。因此可利用這一特性直接進(jìn)行細(xì)胞增殖和毒性分析。即生成甲臜顏色的深淺與細(xì)胞的增殖成正比，與細(xì)胞毒性成反比。使用酶標(biāo)儀在450mM波長處測定OD值，間接反映活細(xì)胞數(shù)量。MCC950 sodium供貨報(bào)價(jià)選購抑制劑時(shí)，應(yīng)該要注意什么事項(xiàng)呢?
CCK-8試劑盒使用注意事項(xiàng)是什么呢？杭州昊鑫生物科技股份有限公司小編介紹，CCK-8試劑盒使用注意事項(xiàng)：1、CCK-8的培養(yǎng)時(shí)間一般為1-4小時(shí)，在培養(yǎng)30分鐘左右即可取出肉眼觀察顯色程度，根據(jù)細(xì)胞種類而定，需要摸索條件，CCK-8的至佳反應(yīng)時(shí)間以具體顯色的至佳時(shí)間為準(zhǔn)。2、使用96孔板進(jìn)行檢測時(shí)，如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長，一定要注意蒸發(fā)問題。一方面，由于96孔板周圍一圈容易蒸發(fā)，可以采取棄用周圍一圈的辦法，改加相同量的PBS、水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方，以緩解蒸發(fā)。
CCCP 是氧化磷酸化 (OXPHOS) 解偶聯(lián)劑。CCCP 誘導(dǎo) PINK1 喚醒，促進(jìn) Parkin 在 Ser65 位點(diǎn)磷酸化。RSL3 ((1S,3R)-RSL3) 是一種谷胱甘肽過氧化物酶 4 (GPX4) 的抑制劑 (ferroptosis?激動劑)，可降低 GPX4 的表達(dá)，誘導(dǎo)頭頸部細(xì)胞的肥大性死亡。在 HN3 耐受細(xì)胞中，可增加 p62 和 Nrf2 的蛋白水平，使 Keap1 滅活。Mitoquinone mesylate是一種基于TPP的線粒體靶向抗氧化劑，可防止氧化損傷。Acetaminophen (Paracetamol) 是選擇性環(huán)氧合酶-2 (COX-2) 的抑制劑，IC50?值為 25.8 μM。Acetaminophen 是一種有效的肝 N-乙酰轉(zhuǎn)移酶 2 (NAT2) 抑制劑。Acetaminophen 是普遍使用的解熱和止痛劑。CCK-8的至佳反應(yīng)時(shí)間以具體顯色的至佳時(shí)間為準(zhǔn)。
抑肽酶應(yīng)用于各種生物學(xué)實(shí)驗(yàn)（如各種蛋白提取過程），在抑制蛋白酶分解蛋白過程中起到了重要作用。抑肽酶抑制胰蛋白酶、纖溶酶、血漿及組織中血管舒緩素。絲氨酸活性的蛋白酶如纖溶酶及血漿血管舒緩素都起關(guān)鍵作用。抑肽酶通過抑制酶上的絲氨酸活性部分，但是與不同的蛋白酶結(jié)合，抑制效果會略有不同。與胰蛋白酶的結(jié)合牢固，而與人體纖溶酶的結(jié)合牢固度很低，且與人血漿血管舒緩素結(jié)合的復(fù)合物相當(dāng)不牢固。抑肽酶的抗纖溶作用不但能保護(hù)直接的底物(纖維蛋白)不被纖溶酶降解，并保護(hù)著血漿中的纖維蛋白原及血清中的α2-球蛋白等。抑制劑（又稱為緩聚劑）是一種用來阻滯或降低化學(xué)反應(yīng)速度的物質(zhì)。句容Doxycycline (hyclate)強(qiáng)力霉素（鹽酸）
蛋白酶體抑制劑能夠與蛋白酶分子活性中心上的一些基團(tuán)結(jié)合，使得蛋白酶的活力下降。余姚Resatorvid (瑞沙托維）
杭州昊鑫生物科技股份有限公司小編介紹，F(xiàn)errostatin-1 是一種有效的、選擇性的?ferroptosis?抑制劑，抑制 Erastin 誘導(dǎo)的 HT-1080 細(xì)胞鐵死亡 (EC50=60 nM)。Ferrostatin-1 是一種人工合成的抗氧化劑，通過還原機(jī)制來防止膜脂的損傷，從而抑制細(xì)胞死亡。具有抑菌活性。SB 202190 是選擇性的?p38 MAPK?抑制劑，抑制 p38α 和 p38β2 的?IC50?分別為 50 nM 和 100 nM。SB 202190 與重組人活性 p38 激酶的 ATP 袋結(jié)合，Kd?值為 38 nM。SB 202190 具有抗某病活性并可以挽救記憶障礙。余姚Resatorvid (瑞沙托維）
杭州昊鑫生物科技股份有限公司發(fā)展規(guī)模團(tuán)隊(duì)不斷壯大，現(xiàn)有一支專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)，各種專業(yè)設(shè)備齊全。在昊鑫生物近多年發(fā)展歷史，公司旗下現(xiàn)有品牌MCE,Biochannel,AATbioquest,invivogen,Abnova,Atlas,Origene,云克?。▋?yōu)爾）,艾德萊(Aidlab),森貝伽,Jackson,Epigentek,icellbioscie,CST,ABC（愛必勝）等。公司以用心服務(wù)為重點(diǎn)價(jià)值，希望通過我們的專業(yè)水平和不懈努力，將生物制品、生物基因芯片的技術(shù)開發(fā)，技術(shù)咨詢。技術(shù)服務(wù)。成果轉(zhuǎn)讓:批發(fā)、零售:實(shí)驗(yàn)室器材，實(shí)驗(yàn)耗材，儀器儀表?；ぎa(chǎn)品(除化學(xué)危驗(yàn)品及易制毒化學(xué)品)。日用百貨。電子產(chǎn)品:其他無需報(bào)經(jīng)審批的一切合法項(xiàng)目。等業(yè)務(wù)進(jìn)行到底。誠實(shí)、守信是對企業(yè)的經(jīng)營要求，也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造***的CCK8/鏈霉親和素磁珠，胎牛血清/培養(yǎng)基，BSA(牛血清白蛋白)V，復(fù)雜植物RNA提取試劑盒。