蛋白酶抑制劑Cocktail有哪些優(yōu)勢(shì)?回答:針對(duì)多種氨基酸的靶點(diǎn),對(duì)目的蛋白進(jìn)行多方位的保護(hù),使其免受內(nèi)源性蛋白酶的降解,蛋白的得出率較高,提高實(shí)驗(yàn)效率??梢耘浜霞?xì)胞裂解液一起使用嗎?回答:可以,這樣可以充分的裂解細(xì)胞或組織中的蛋白,有效降低蛋白質(zhì)的降解。 為什么需要用DMSO溶解?可否換成其他溶劑?回答:蛋白酶抑制劑Cocktail較易溶解于DMSO,且DMSO通常不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,而且性質(zhì)穩(wěn)定,利于保存和運(yùn)輸。因此暫不考慮其他溶劑。實(shí)驗(yàn)時(shí)誤將其放置常溫下,會(huì)不會(huì)造成試劑變質(zhì)?回答:短時(shí)間放置于常溫下是可以的,不會(huì)造成試劑變質(zhì),因?yàn)榈鞍酌敢种苿┩ǔ1容^穩(wěn)定。如果實(shí)驗(yàn)需要在常溫下進(jìn)行,建議將其置于冰塊操作,用畢后迅速放置-20℃保存。同時(shí)應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融。Ferrostatin-1 是一種有效的、選擇性的ferroptosis抑制劑。Lipopolysaccharides ( 脂多糖)生產(chǎn)廠家
鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶抑制劑(calcineurininhibitor,CNI)他克莫司和環(huán)孢素是普遍使用的免疫抑制藥物,具有個(gè)體內(nèi)和個(gè)體間的藥動(dòng)學(xué)和藥效學(xué)變異性大的特性。CNI的親脂性高,經(jīng)歷普遍的首過代謝,是腸道和肝臟中細(xì)胞色素P450(cytochromeP450,CYP)3A4、CYP3A5以及P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)轉(zhuǎn)運(yùn)體的底物。該酶和轉(zhuǎn)運(yùn)體的功能是由基因多態(tài)性、藥物和內(nèi)源性物質(zhì)(如炎癥因子)的誘導(dǎo)或抑制導(dǎo)致的復(fù)雜相互作用決定。該文系統(tǒng)總結(jié)CNI體內(nèi)處置變異性的常見臨床決定因素,包括腹瀉和其他腸道疾病、貧血、低蛋白血癥、高脂血癥、肝和腎臟疾病、聯(lián)合用藥等,并討論潛在的影響機(jī)制。Acetylcysteine (乙酰半胱氨酸)生產(chǎn)商家購(gòu)買抑制劑時(shí)要注意價(jià)格是否合理,避免被坑。
CCK-8實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):若暫時(shí)不測(cè)定OD值,可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。24小時(shí)內(nèi)測(cè)定,吸光度不會(huì)發(fā)生變化。如果待測(cè)物質(zhì)有氧化性或還原性的話,可在加CCK8之前更換新鮮培養(yǎng)基(除去培養(yǎng)基,并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的培養(yǎng)基),去掉藥物影響。當(dāng)然藥物影響比較小的情況下,可以不更換培養(yǎng)基,直接扣除培養(yǎng)基中加入藥物后的空白吸收即可。當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)96孔板時(shí),貼壁細(xì)胞的至小接種量至少為1000 個(gè)/孔 (100 μl 培養(yǎng)基)。檢測(cè)白細(xì)胞時(shí)的靈敏度相對(duì)較低,因此推薦接種量不低于2500 個(gè)/孔 (100 μl 培養(yǎng)基)。酚紅和血清對(duì)CCK8法的檢測(cè)不會(huì)造成干擾,可以通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去。CCK8可以檢測(cè)大腸桿菌,但不能檢測(cè)酵母細(xì)胞。在細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每次測(cè)定的過程中需要避免細(xì)菌污染,以免影響結(jié)果。CCK-8在0-5℃下能夠保存至少6個(gè)月,在-20℃下避光可以保存1年。
Chloroquine phosphate是什么?杭州昊鑫生物科技股份有限公司小編介紹,Chloroquine phosphate是一種用于瘧疾和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的抗瘧疾藥劑。Chloroquine phosphate 是 autophagy 和 toll-like receptors (TLRs) 的抑制劑。Chloroquine phosphate 有效抑制 SARS-CoV-2 (COVID-19) 傳染 (EC50=1.13 μM)。chloroquine這種化合物可在微摩爾濃度有效阻斷2019-nCoV傳染,EC50值為1.13 μM;選擇指數(shù)(selectivity index,用于判斷藥物效果的安全范圍,指數(shù)越大安全范圍越大)較高。抑制劑通常是指能夠抑制或減緩化學(xué)反應(yīng)速度的物質(zhì),其用途比較廣。
細(xì)胞或組織提取物等樣品中含有許多內(nèi)源性的蛋白酶、磷酸酶等,容易導(dǎo)致提取物中的蛋白降解或去修飾,從而影響后續(xù)的蛋白檢測(cè)。因此在提取物等樣品中添加適當(dāng)?shù)牡鞍酌?、磷酸酶等抑制劑能有效的防止蛋白降解和去修飾。特點(diǎn):1、有效抑制哺乳動(dòng)物細(xì)胞或組織提取物中的各種蛋白酶活性。2、包括AEBSF、 Aprotinin (絲氨酸蛋白酶抑制劑), Bestatin(氨基肽酶抑制劑), E-64(半胱氨酸蛋白酶抑制劑), Leupeptin(絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶抑制劑),Pepstatin A(天冬氨酰蛋白酶抑制劑)。3、不含EDTA,EDTA主要是用來抑制金屬蛋白酶活性的。但是在生物實(shí)驗(yàn)中,后續(xù)有些實(shí)驗(yàn)加入EDTA后,可能會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。例如如果要用金屬離子螯合柱純化,有EDTA就會(huì)造成純化失敗,這個(gè)時(shí)候就只能用不含EDTA的抑制劑。酚紅和血清對(duì)CCK-8試劑盒的測(cè)定無明顯影響。慈溪Tween 80(吐溫80)
CCK-8試劑盒是一種基于WST-8的普遍應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測(cè)試劑盒。Lipopolysaccharides ( 脂多糖)生產(chǎn)廠家
CCK-8試劑盒使用注意事項(xiàng)是什么呢?杭州昊鑫生物科技股份有限公司小編介紹,CCK-8試劑盒使用注意事項(xiàng):1、CCK-8的培養(yǎng)時(shí)間一般為1-4小時(shí),在培養(yǎng)30分鐘左右即可取出肉眼觀察顯色程度,根據(jù)細(xì)胞種類而定,需要摸索條件,CCK-8的至佳反應(yīng)時(shí)間以具體顯色的至佳時(shí)間為準(zhǔn)。2、使用96孔板進(jìn)行檢測(cè)時(shí),如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng),一定要注意蒸發(fā)問題。一方面,由于96孔板周圍一圈容易蒸發(fā),可以采取棄用周圍一圈的辦法,改加相同量的PBS、水或培養(yǎng)液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方,以緩解蒸發(fā)。Lipopolysaccharides ( 脂多糖)生產(chǎn)廠家
杭州昊鑫生物科技股份有限公司屬于醫(yī)藥健康的高新企業(yè),技術(shù)力量雄厚。公司致力于為客戶提供安全、質(zhì)量有保證的良好產(chǎn)品及服務(wù),是一家私營(yíng)股份有限公司企業(yè)。公司擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),具有CCK8/鏈霉親和素磁珠,胎牛血清/培養(yǎng)基,BSA(牛血清白蛋白)V,復(fù)雜植物RNA提取試劑盒等多項(xiàng)業(yè)務(wù)。昊鑫生物以創(chuàng)造***產(chǎn)品及服務(wù)的理念,打造高指標(biāo)的服務(wù),引導(dǎo)行業(yè)的發(fā)展。