抗血清質(zhì)量的評(píng)價(jià)在免疫期間,不僅各個(gè)不同的動(dòng)物,而且同一動(dòng)物在不同的時(shí)間內(nèi)抗血清效價(jià)、特異親合力等都可能發(fā)生變化,因而必須經(jīng)常地采集血測(cè)試。只有在對(duì)抗血清的效價(jià)、特異生、性、親合力等方面作徹底的評(píng)價(jià)后,才可使用所取得的抗血清。1、效價(jià)抗血清的效價(jià),就是指血清中所含抗體的濃度或含量。效價(jià)測(cè)定的方法常用的是放射免疫法,此法對(duì)所有的抗體均適用。某些由大分子(如蛋白類(lèi))抗原所產(chǎn)生的抗體,可用雙擴(kuò)散等方法測(cè)定。前者測(cè)定的效價(jià)極為精確。而后者則粗糙得多。給培養(yǎng)液供應(yīng)出色的緩沖系統(tǒng)。海淀區(qū)新生牛血清哪家好動(dòng)物不同,分離出的血清也會(huì)有所不同。物種來(lái)源相同的血清,根據(jù)采集血時(shí)間、血源品質(zhì)也會(huì)分出不同的類(lèi)別。有些...
當(dāng)科技變得越來(lái)越先進(jìn)的時(shí)候,就給人們做實(shí)驗(yàn)研究帶來(lái)很大的幫助?,F(xiàn)在做細(xì)胞研究的人是由很多的,就有一部分人是做動(dòng)物細(xì)胞研究,不過(guò)因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞相對(duì)較復(fù)雜,研究起來(lái)就很困難,對(duì)功能也不是很了解,動(dòng)物在代謝的進(jìn)程中所需的養(yǎng)分包含水、無(wú)機(jī)鹽、維生素、糖類(lèi)、脂肪、氨基酸和纖維素等。這些成分動(dòng)物血清都能夠供給給體外培育的動(dòng)物細(xì)胞,但這些養(yǎng)分物質(zhì)(除水以外)的含量在動(dòng)物血清中所占的份額很少,并且首要的養(yǎng)分物質(zhì)在動(dòng)物細(xì)胞培育基的制造中現(xiàn)已增加了。所以,從這些視點(diǎn)看動(dòng)物細(xì)胞培育參加的動(dòng)物血清雖然能起到為培育的動(dòng)物細(xì)胞供給養(yǎng)分物質(zhì)的效果,但這并不是首要的效果。動(dòng)物細(xì)胞的代謝離不開(kāi)調(diào)理。在動(dòng)物體內(nèi)有兩種調(diào)理方法來(lái)保持...
血清的分類(lèi)根據(jù)取血年齡的不同,血清有以下分類(lèi):取血牛齡主要受當(dāng)?shù)匦竽翗I(yè)發(fā)展情況及法規(guī)限制影響,因?yàn)榕Q酁樾竽翗I(yè)副產(chǎn)業(yè),并未有專(zhuān)為取血而養(yǎng)的牛。01胎牛血清(FetalBovineSerum,簡(jiǎn)稱(chēng)FBS)取自尚未出生,母牛剖腹心臟穿刺取血得到的血清。02國(guó)產(chǎn)胎牛血清(并無(wú)準(zhǔn)確定義,但通常以此命名)出生4-6小時(shí),未進(jìn)行哺乳進(jìn)食的新生牛,也有稱(chēng)作國(guó)產(chǎn)新生牛血清。03新生牛血清(NewbornCalfSeurm,簡(jiǎn)稱(chēng)NBCS)也有稱(chēng)作小牛血清,指的是出生14天-90天的進(jìn)行取血的牛血清(也有說(shuō)是指出生10天-90天)。04成年牛血清(AdultBovineSerum,簡(jiǎn)稱(chēng)ABS)指取血時(shí)牛齡超過(guò)6...
血清在細(xì)胞培養(yǎng)中為細(xì)胞提供氨基酸,蛋白質(zhì),維生素(特別是脂溶性維生素如A,D,E,K),碳水化合物,脂肪,,生長(zhǎng)因子,礦物質(zhì)及微量元素。此外,血清還可以緩沖培養(yǎng)基,抑制蛋白水解酶,增加培養(yǎng)基的粘度,降低在移液或攪拌時(shí)造成的剪切力。血清的保質(zhì)期是5年,儲(chǔ)存溫度-10~-30℃。血清長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。因此,長(zhǎng)期保存血清必須在-10℃以下儲(chǔ)存,并避免反復(fù)凍融。注意:不要以過(guò)濾的方式去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)檫@可能阻塞濾膜。北京胎牛血清廠家決定血清的顏色的因素胎牛血清的顏色會(huì)根據(jù)血紅蛋白(鮮紅色)、膽紅...
佐劑由于不同個(gè)體對(duì)同一抗原的反應(yīng)性不同,而且不同抗原產(chǎn)生免疫反應(yīng)的能力也有強(qiáng)有弱,因此常常在注射抗原的同時(shí),加入能增強(qiáng)抗原的抗原性物質(zhì),以刺激機(jī)體產(chǎn)生較強(qiáng)的免疫反應(yīng),這種物質(zhì)稱(chēng)為免疫佐劑。佐劑除了延長(zhǎng)抗原在體內(nèi)的存留時(shí)間,增加抗原刺激作用外,更主要的是,它能刺激網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng),使參與免疫反應(yīng)的免疫活性細(xì)胞增多,促進(jìn)T細(xì)胞與B細(xì)胞的相互作用,從而增強(qiáng)機(jī)體對(duì)抗原的細(xì)胞免疫和抗體的產(chǎn)生。常用的佐劑是福氏佐劑(Freundadjuvant),其成分通常是羊毛脂1份、石臘油5份羊毛脂與石臘油的比例,視需要可調(diào)整為1:2~9(V/V),這是不完全福氏佐劑,在每毫升不完全佐劑加入1~20mg卡介苗就成為完全佐...
BI血清是市面上一款口碑相傳、被反復(fù)選擇的進(jìn)口血清品牌,它被各大科研院所、高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室及藥廠光使用,并多年來(lái)持續(xù)穩(wěn)定供應(yīng)細(xì)胞典藏等重大項(xiàng)目。下面對(duì)BI血清做一個(gè)簡(jiǎn)單介紹。01產(chǎn)品簡(jiǎn)介BI胎牛血清用于光的細(xì)胞類(lèi)型,主要是一些普通的細(xì)胞系,血清中內(nèi)和血紅蛋白水平較低。內(nèi)水平:≤10EU/ml血紅蛋白水平:≤30毫克/分升保存:-20℃,三年。BiologicalIndustries(BI)品牌名,成立于1981年,是國(guó)際有名的以色列生物科技公司,其產(chǎn)品與服務(wù)在以色列的生命科學(xué)研究與生物技術(shù)市場(chǎng)中占有主導(dǎo)地位。BI主要包括:胎牛血清、特殊加工工藝血清、干細(xì)胞特用血清、干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)輔...
血清在細(xì)胞培養(yǎng)中為細(xì)胞提供氨基酸,蛋白質(zhì),維生素(特別是脂溶性維生素如A,D,E,K),碳水化合物,脂肪,,生長(zhǎng)因子,礦物質(zhì)及微量元素。此外,血清還可以緩沖培養(yǎng)基,抑制蛋白水解酶,增加培養(yǎng)基的粘度,降低在移液或攪拌時(shí)造成的剪切力。血清的保質(zhì)期是5年,儲(chǔ)存溫度-10~-30℃。血清長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。因此,長(zhǎng)期保存血清必須在-10℃以下儲(chǔ)存,并避免反復(fù)凍融。供應(yīng)蛋白酶克制劑,維護(hù)細(xì)胞免受死細(xì)胞開(kāi)釋的蛋白酶的損害。廣州豬血清廠家可以起到營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用,動(dòng)物在代謝的進(jìn)程中所需的養(yǎng)分包含水、無(wú)機(jī)鹽、維生...
動(dòng)物不同,分離出的血清也會(huì)有所不同。物種來(lái)源相同的血清,根據(jù)采集血時(shí)間、血源品質(zhì)也會(huì)分出不同的類(lèi)別。有些時(shí)候,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,還要對(duì)血清進(jìn)行一些特殊的加工,因此,市面上的血清種類(lèi)就變得五花八門(mén)了。牛來(lái)源的血清,可以細(xì)分為很多種:根據(jù)采集血時(shí)間分合格的血清產(chǎn)品,需要嚴(yán)格控制采集血時(shí)間點(diǎn),才能保證比較基本的血清質(zhì)量。以胎牛血清為例:一旦牛胎齡過(guò)長(zhǎng),會(huì)導(dǎo)致補(bǔ)體系統(tǒng)逐漸發(fā)育完全,進(jìn)而使制備的血清中含有補(bǔ)體,影響血清品質(zhì)。另外,胎牛中各類(lèi)生長(zhǎng)因子也會(huì)隨著生長(zhǎng)發(fā)育而逐漸喪失,進(jìn)一步使血清品質(zhì)下降。實(shí)驗(yàn)不是千篇一律的,根據(jù)不同的需求,有時(shí)候需要對(duì)血清進(jìn)行一些“定制化處理”。我們通過(guò)多次傳代,分辨同細(xì)胞...
血清在細(xì)胞培養(yǎng)中為細(xì)胞提供氨基酸,蛋白質(zhì),維生素(特別是脂溶性維生素如A,D,E,K),碳水化合物,脂肪,,生長(zhǎng)因子,礦物質(zhì)及微量元素。此外,血清還可以緩沖培養(yǎng)基,抑制蛋白水解酶,增加培養(yǎng)基的粘度,降低在移液或攪拌時(shí)造成的剪切力。血清的保質(zhì)期是5年,儲(chǔ)存溫度-10~-30℃。血清長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。因此,長(zhǎng)期保存血清必須在-10℃以下儲(chǔ)存,并避免反復(fù)凍融。血清根據(jù)血紅蛋白含量的不同,表現(xiàn)的顏色也不一樣。南通豬血清馬血清10%馬血清可代替FBS用于支持SRBC的體外抗體應(yīng)答, 常與牛血清結(jié)合或單獨(dú)...
組份與比例不同胎牛血清和新生牛血清兩者所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同。03用途與用法不同某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長(zhǎng),而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過(guò)一個(gè)月。解凍血清時(shí),應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,并經(jīng)常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,一定不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會(huì)增加,血清在解凍和熱滅活后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。在微生物的培育中要為培育的微生物供給...
動(dòng)物不同,分離出的血清也會(huì)有所不同。物種來(lái)源相同的血清,根據(jù)采集血時(shí)間、血源品質(zhì)也會(huì)分出不同的類(lèi)別。有些時(shí)候,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,還要對(duì)血清進(jìn)行一些特殊的加工,因此,市面上的血清種類(lèi)就變得五花八門(mén)了。牛來(lái)源的血清,可以細(xì)分為很多種:根據(jù)采集血時(shí)間分合格的血清產(chǎn)品,需要嚴(yán)格控制采集血時(shí)間點(diǎn),才能保證比較基本的血清質(zhì)量。以胎牛血清為例:一旦牛胎齡過(guò)長(zhǎng),會(huì)導(dǎo)致補(bǔ)體系統(tǒng)逐漸發(fā)育完全,進(jìn)而使制備的血清中含有補(bǔ)體,影響血清品質(zhì)。另外,胎牛中各類(lèi)生長(zhǎng)因子也會(huì)隨著生長(zhǎng)發(fā)育而逐漸喪失,進(jìn)一步使血清品質(zhì)下降。實(shí)驗(yàn)不是千篇一律的,根據(jù)不同的需求,有時(shí)候需要對(duì)血清進(jìn)行一些“定制化處理”。血清還可以緩沖培養(yǎng)基,抑制蛋...
蛋白激酶是酶類(lèi)這個(gè)家族中比較龐大的一員,被用來(lái)完成蛋白磷酸化作用的催化,這是控制細(xì)胞生命活動(dòng)中比較通常的機(jī)制。其中相當(dāng)有有效性的蛋白激酶之一可能就是CK2。蛋白激酶CK2(protein kinase CK2, PKCK2),過(guò)去曾經(jīng)被稱(chēng)為酪蛋白激酶-2或Ⅱ(cascin kinase2 or Ⅱ)。它是由兩個(gè)催化亞基(aa’)和兩個(gè)調(diào)節(jié)亞基(ββ)構(gòu)成的不均一四聚體。蛋白激酶CK2是由兩個(gè)分別為42—44KDa和38KDa的aa’ββ型異四聚體結(jié)構(gòu)。該結(jié)構(gòu)很穩(wěn)定,在體外只有在變性的條件下才能被解離。除了細(xì)胞基質(zhì),一些病毒蛋白也被CK2所磷酸化。蛋白激酶CK2在轉(zhuǎn)錄、信號(hào)、增殖,并且在導(dǎo)致發(fā)生...
IR(輻照)血清輻照型血清是將正常血清經(jīng)過(guò)三次無(wú)菌過(guò)濾后再用鈷-60輻射滅菌制得的血清。輻照血清是細(xì)胞培養(yǎng)中比較重要的天然培養(yǎng)基,它具有促進(jìn)細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞分化等的生物學(xué)功能其質(zhì)量的好壞直接影響著生物制品的安全性。功能:提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。起酸堿度緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。應(yīng)用適用于正常封閉與增殖旺盛的常規(guī)細(xì)胞系的培養(yǎng)等。給培養(yǎng)液供應(yīng)出色的緩沖系統(tǒng)...
馬血清一般分為兩種:第一種馬血清含有的大分子蛋白比較多,適用于蛋白封閉;第二種馬血清為細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)別。它經(jīng)過(guò)多次過(guò)濾,祛除了許多大分子蛋白,但保留了血清中促細(xì)胞生長(zhǎng)的活性因子,因而能用于細(xì)胞培養(yǎng),例如神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)基中則需要添加馬血清。質(zhì)量的馬血清來(lái)自健康馬血液,為封閉系統(tǒng)內(nèi)無(wú)菌采集血過(guò)濾而成,為淡黃色澄清液體,很低內(nèi)毒類(lèi)素,無(wú)溶血,無(wú)異物,無(wú)細(xì)菌、、支原體、噬菌體等。豬血清,常用于豬肺炎支原體疫苗的生產(chǎn)。在對(duì)細(xì)胞和活疫苗進(jìn)行支原體檢驗(yàn)中,《獸藥典》也明確推薦了豬血清作為支原體檢驗(yàn)用液體培養(yǎng)基的組成成分。并且,《獸藥典》指出在【豬支原體肺炎微量間接血凝試驗(yàn)】和【豬支氣管敗血波氏桿菌凝集試驗(yàn)...
去脂胎牛血清(貨號(hào):C3840-0050/0100/0500/0050X10)去脂胎牛血清通過(guò)固體基質(zhì)脫脂作用去除內(nèi)源性脂類(lèi)、甘油三酯和膽固醇,含量只為標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清的1/3。去脂胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中用量較多,其含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成分,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱源質(zhì)結(jié)合,起到作用。是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基上所需因子來(lái)源。起酸堿緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳...
配制方法:按比例將羊毛脂與石蠟油置容器內(nèi),用超聲波使之混勻,高壓滅菌,置4°C下保存?zhèn)溆?。免疫前取等容積完全或不完全佐劑與免疫原溶液混合,用振蕩器混勻成乳狀,也可以在免疫前取需要量佐劑置乳缽中研磨,均勻后再邊磨邊滴加入等容積抗原液其中加卡介苗3~4mg/ml或不加加完后再繼續(xù)研磨成乳劑,潤(rùn)十水水上10min內(nèi)完全不擴(kuò)散為止。為避免損失抗原,亦可用一注射器裝抗原液,另一注射器裝佐劑,二者以聚乙烯塑料管連接,然后二者來(lái)回反復(fù)抽吸,約數(shù)十分鐘后即能完全乳化。檢查合格后即以其中一注射器作注射用。免疫方法抗原劑量,頭次劑量為300~500ug,加強(qiáng)免疫的劑量約為頭次劑量為1/4左右。每2~3周加強(qiáng)免疫一...
HI(熱滅活)處理血清血清熱滅活是通過(guò)提高血清溫度到56℃,并保持該溫度30Min完成,可以去除血清內(nèi)補(bǔ)體,確保細(xì)胞與抗體結(jié)合不會(huì)發(fā)生裂解。加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。煥活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,煥活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究中培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲(chóng)細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活于血清。胚胎干細(xì)胞(ES)特用血清是從多個(gè)批次的胎牛血清經(jīng)過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)及其他測(cè)試篩選出特定批號(hào),適用于人及小鼠胚胎干細(xì)胞、成體干細(xì)胞及原代細(xì)胞長(zhǎng)期培養(yǎng)。間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)特用血清從多個(gè)批次的胎牛血清篩選出特定批號(hào),經(jīng)過(guò)骨髓,脂肪組織及臍帶來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞活性嚴(yán)格測(cè)試,通過(guò)...
動(dòng)物不同,分離出的血清也會(huì)有所不同。物種來(lái)源相同的血清,根據(jù)采集血時(shí)間、血源品質(zhì)也會(huì)分出不同的類(lèi)別。有些時(shí)候,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,還要對(duì)血清進(jìn)行一些特殊的加工,因此,市面上的血清種類(lèi)就變得五花八門(mén)了。牛來(lái)源的血清,可以細(xì)分為很多種:根據(jù)采集血時(shí)間分合格的血清產(chǎn)品,需要嚴(yán)格控制采集血時(shí)間點(diǎn),才能保證比較基本的血清質(zhì)量。以胎牛血清為例:一旦牛胎齡過(guò)長(zhǎng),會(huì)導(dǎo)致補(bǔ)體系統(tǒng)逐漸發(fā)育完全,進(jìn)而使制備的血清中含有補(bǔ)體,影響血清品質(zhì)。另外,胎牛中各類(lèi)生長(zhǎng)因子也會(huì)隨著生長(zhǎng)發(fā)育而逐漸喪失,進(jìn)一步使血清品質(zhì)下降。實(shí)驗(yàn)不是千篇一律的,根據(jù)不同的需求,有時(shí)候需要對(duì)血清進(jìn)行一些“定制化處理”。細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),要保證細(xì)胞可以順...
血清是否需要熱滅活?關(guān)于血清熱滅活的問(wèn)題,我們也有詳細(xì)的介紹:血清滅活之爭(zhēng)?一篇答疑解惑!血清使用小技巧(二)總結(jié)起來(lái)就是,熱滅活的目的是消滅補(bǔ)體,由于胎牛血清會(huì)嚴(yán)格控制取血時(shí)間為5-8月齡的胎牛,此時(shí)還未形成完整的補(bǔ)體系統(tǒng),因此,合格的胎牛血清,是不需要滅活的。但是新生牛血清、小牛血清、豬血清和馬血清這些血清則需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求而定。根據(jù)血清廠家多年來(lái)總結(jié)的經(jīng)驗(yàn),常規(guī)解凍后,40℃水浴加熱20分鐘即可,能夠很大程度地保留營(yíng)養(yǎng)成分。富含一些可供貼壁細(xì)胞型細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的基質(zhì)成分。廣東豬血清批發(fā)商血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的...
配制方法:按比例將羊毛脂與石蠟油置容器內(nèi),用超聲波使之混勻,高壓滅菌,置4°C下保存?zhèn)溆?。免疫前取等容積完全或不完全佐劑與免疫原溶液混合,用振蕩器混勻成乳狀,也可以在免疫前取需要量佐劑置乳缽中研磨,均勻后再邊磨邊滴加入等容積抗原液其中加卡介苗3~4mg/ml或不加加完后再繼續(xù)研磨成乳劑,潤(rùn)十水水上10min內(nèi)完全不擴(kuò)散為止。為避免損失抗原,亦可用一注射器裝抗原液,另一注射器裝佐劑,二者以聚乙烯塑料管連接,然后二者來(lái)回反復(fù)抽吸,約數(shù)十分鐘后即能完全乳化。檢查合格后即以其中一注射器作注射用。免疫方法抗原劑量,頭次劑量為300~500ug,加強(qiáng)免疫的劑量約為頭次劑量為1/4左右。每2~3周加強(qiáng)免疫一...
放射免疫法以不同稀釋度的抗血清與質(zhì)量標(biāo)記抗原混合,孵育24h后,測(cè)定其結(jié)合率。通常以結(jié)合率為50%的血清稀度和為效價(jià)。如某抗血清的結(jié)合率為50%時(shí)的稀釋度為1:15000,則該血清的效價(jià)就是1:15000??寡宓男r(jià),除由抗血清本身的性質(zhì)決定外,還受標(biāo)記抗原的質(zhì)量、孵育時(shí)間,所用稀釋液的成分及其pH等因素的影響,在工作中必須引起注意。(2)雙向擴(kuò)散法利用大分子抗原和抗體在瓊脂平板上擴(kuò)散,兩者在相交處產(chǎn)生沉淀線,以觀察和判斷抗血清中是否有抗體及其濃度。球脂板的制備:100mlpH7.1的磷酸鹽緩沖液加到15g的瓊脂內(nèi),于水浴中加溫?cái)嚢?,使瓊脂完全溶解,趁熱用紗布過(guò)濾,待溶液冷卻到65°C左右時(shí)...
現(xiàn)在做細(xì)胞研究的人有很多,就有一部分人做動(dòng)物細(xì)胞研究,不過(guò)因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞相對(duì)較復(fù)雜,研究起來(lái)就很困難,對(duì)功能也不是很了解。那我們就先從血清下手,這樣就簡(jiǎn)單一些。現(xiàn)在云海生物就來(lái)說(shuō)說(shuō)動(dòng)物血清都有哪些重要的功能。動(dòng)物細(xì)胞的代謝離不開(kāi)調(diào)理。在動(dòng)物體內(nèi)有兩種調(diào)理方法來(lái)保持動(dòng)物代謝的穩(wěn)定,而細(xì)胞本身的代謝調(diào)理中調(diào)理的效果很關(guān)鍵。血清中供給了適量且份額適中的各式各樣的激從來(lái)確保動(dòng)物細(xì)胞離體后的正常代謝。能夠?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞供給必需物質(zhì)在微生物的培育中要為培育的微生物供給成長(zhǎng)因子。相同動(dòng)物細(xì)胞代謝進(jìn)程中有許多物質(zhì)是動(dòng)物細(xì)胞所必需而本身無(wú)法組成的的,例如堿基、維生素、氨基酸等微量物質(zhì),它們的效果十分重要,細(xì)胞需求它們...
能夠?yàn)殡x體的動(dòng)物細(xì)胞供給能量及祛毒功用血清中存在許多的糖類(lèi)、脂類(lèi)物質(zhì),這些物質(zhì)能夠?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞供給許多的能量。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到祛毒效果。鋪展在塑料培育基質(zhì)上所需因子來(lái)歷動(dòng)物細(xì)胞培育的一個(gè)很重要的用途就是用取自燒傷患者皮膚的健康細(xì)胞進(jìn)行培育,能夠獲得許多本身的皮膚細(xì)胞,為大面積燒傷的患者移植。人工皮膚的制備需求培育的細(xì)胞貼附在薄膜上構(gòu)成皮膚組織,血清就為這個(gè)進(jìn)程供給所需因子。在動(dòng)物血清中存在豐厚的無(wú)機(jī)鹽,還具有許多緩沖物質(zhì),在培育基的酸堿度發(fā)生變化時(shí)起到緩沖效果。使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩下胰蛋白酶失活,維護(hù)細(xì)胞不受傷害。總歸,動(dòng)物血清是細(xì)胞培育中用量大的天然培育基,含有...
何謂熱滅活一般是以56℃,30分鐘來(lái)處理已解凍的血清,因?yàn)榇思訜岵襟E,可以使補(bǔ)體去活化,而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,平滑肌的收縮,肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,增強(qiáng)吞噬作用,淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和煥活。有必要做熱滅活嗎?實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或完全沒(méi)有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)明顯的增多,這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察,像是"小黑點(diǎn)",常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究...
當(dāng)科技變得越來(lái)越先進(jìn)的時(shí)候,就給人們做實(shí)驗(yàn)研究帶來(lái)很大的幫助?,F(xiàn)在做細(xì)胞研究的人是由很多的,就有一部分人是做動(dòng)物細(xì)胞研究,不過(guò)因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞相對(duì)較復(fù)雜,研究起來(lái)就很困難,對(duì)功能也不是很了解,動(dòng)物在代謝的進(jìn)程中所需的養(yǎng)分包含水、無(wú)機(jī)鹽、維生素、糖類(lèi)、脂肪、氨基酸和纖維素等。這些成分動(dòng)物血清都能夠供給給體外培育的動(dòng)物細(xì)胞,但這些養(yǎng)分物質(zhì)(除水以外)的含量在動(dòng)物血清中所占的份額很少,并且首要的養(yǎng)分物質(zhì)在動(dòng)物細(xì)胞培育基的制造中現(xiàn)已增加了。所以,從這些視點(diǎn)看動(dòng)物細(xì)胞培育參加的動(dòng)物血清雖然能起到為培育的動(dòng)物細(xì)胞供給養(yǎng)分物質(zhì)的效果,但這并不是首要的效果。動(dòng)物細(xì)胞的代謝離不開(kāi)調(diào)理。在動(dòng)物體內(nèi)有兩種調(diào)理方法來(lái)保持...
豬血清(貨號(hào):C2500-0100/0500/1000)豬血清在染色體研究中表現(xiàn)非常出色,可用于淋巴細(xì)胞培養(yǎng),疫苗生產(chǎn)(生產(chǎn)支原體)中和脂質(zhì)體包裹的腺相關(guān)病毒(AAV),用于誘導(dǎo)大鼠肝纖維化,作為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)中的標(biāo)準(zhǔn)陰性參考。//兔血清(貨號(hào):C2520-0100/0500)正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對(duì)照。在免疫組織化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)方面,各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑。//羊血清(貨號(hào):C2530-0010/0100/0500)用于生物醫(yī)學(xué)研究的大多數(shù)細(xì)胞系和原代培養(yǎng)物上,F(xiàn)BS的合適替代物,病毒分離和鑒定,病毒學(xué)研究。用作魚(yú)類(lèi)細(xì)胞培養(yǎng)的有效N...
豬血清(貨號(hào):C2500-0100/0500/1000)豬血清在染色體研究中表現(xiàn)非常出色,可用于淋巴細(xì)胞培養(yǎng),疫苗生產(chǎn)(生產(chǎn)支原體)中和脂質(zhì)體包裹的腺相關(guān)病毒(AAV),用于誘導(dǎo)大鼠肝纖維化,作為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)中的標(biāo)準(zhǔn)陰性參考。//兔血清(貨號(hào):C2520-0100/0500)正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對(duì)照。在免疫組織化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)方面,各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑。//羊血清(貨號(hào):C2530-0010/0100/0500)用于生物醫(yī)學(xué)研究的大多數(shù)細(xì)胞系和原代培養(yǎng)物上,F(xiàn)BS的合適替代物,病毒分離和鑒定,病毒學(xué)研究。用作魚(yú)類(lèi)細(xì)胞培養(yǎng)的有效N...
血清保存方法1.如何保存血清?血清應(yīng)該在-20℃保存。如果一次無(wú)法用完一瓶,應(yīng)該無(wú)菌分裝后冷凍保存。注意避免反復(fù)凍融。2.為什么儲(chǔ)存在冰箱中的血清會(huì)出現(xiàn)沉淀?有些胎牛血清產(chǎn)品沒(méi)有預(yù)老化,儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。這應(yīng)該不會(huì)影響血清的質(zhì)量。推薦在-20℃儲(chǔ)存胎牛血清,避免反復(fù)凍融。凍融方法正確解凍方法:將血清首先置于冰箱2-8℃中12-24小時(shí),使之緩慢部分溶解,然后再放在室溫下使之全溶。注意:溶解過(guò)程中要每隔一段時(shí)間緩慢地?fù)u動(dòng)血清使之混勻。切記:避免37℃水浴。它們的效果十分重要,細(xì)胞需求它們組成核酸和蛋白...
能夠?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞供給必需物質(zhì),在微生物的培育中要為培育的微生物供給成長(zhǎng)因子。相同動(dòng)物細(xì)胞代謝進(jìn)程中有許多物質(zhì)是動(dòng)物細(xì)胞所必需而本身無(wú)法組成的的,例如堿基、維生素、氨基酸等微量物質(zhì),它們的效果十分重要,細(xì)胞需求它們組成核酸和蛋白質(zhì),缺少要導(dǎo)致細(xì)胞成長(zhǎng)不良乃至shi世;供給結(jié)合蛋白,能辨認(rèn)維生素、脂類(lèi)、金屬和其他等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)生機(jī);供給對(duì)保持細(xì)胞指數(shù)成長(zhǎng)的,基礎(chǔ)培育基中沒(méi)有或量很少的養(yǎng)分物,以及首要的低分子養(yǎng)分物。這些物質(zhì)都存在于血清中,如果在制造培育基的時(shí)分一項(xiàng)項(xiàng)增加是十分費(fèi)事的。所以參加動(dòng)物血清相似微生物培育中的天然培育基的做法,簡(jiǎn)略便利、效果好。物種來(lái)源相同的血清,根據(jù)采集血...
常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)需要添加血清來(lái)維持細(xì)胞的增殖能力,盡管血清可以滿(mǎn)足一般細(xì)胞培養(yǎng)需求,但在進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分優(yōu)化和標(biāo)記特定成分進(jìn)行研究的實(shí)驗(yàn)中,仍需要去除某些特定的成分,常用的去除方法有透析。透析是將血清循環(huán)通過(guò)中空纖維,并在血清中補(bǔ)充生理鹽水以維持滲透壓,移除分子量小于10,000Da的小分子,如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結(jié)合的蛋白等。因此透析胎牛血清主要用于關(guān)注小分子濃度的特殊研究,包括:研究蛋白質(zhì)組學(xué)、同位素標(biāo)記、細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)和報(bào)告基因分析、報(bào)告基因細(xì)胞系的篩選等。血清分離質(zhì)量的好壞,直接影響到監(jiān)測(cè)結(jié)果,所以掌握畜禽的采集血分離血清的方法尤為重要。廣東豬血清在進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分優(yōu)化和標(biāo)記特定成分進(jìn)行研究的...