江蘇蛋白質(zhì)琥珀酰化修飾組學鑒定

蛋白質(zhì)翻譯后修飾的重要性：翻譯后修飾可以發(fā)生在蛋白質(zhì)生命周期的任何階段。例如，許多蛋白質(zhì)在翻譯完成后不久就被修飾，以介導適當?shù)牡鞍踪|(zhì)折疊或穩(wěn)定，或?qū)⑿律鞍踪|(zhì)引導到不同的細胞區(qū)室（例如，細胞核、膜）。折疊和定位完成后發(fā)生其他修飾，以刺激或滅活催化活性或以其他方式影響蛋白質(zhì)的生物活性。蛋白質(zhì)也與靶向降解蛋白質(zhì)的標簽共價連接。除了單一的修飾外，蛋白質(zhì)通常還通過翻譯后切割和通過蛋白質(zhì)成熟的分步機制增加功能基團的組合進行修飾。分析蛋白質(zhì)及其翻譯后修飾對于心臟病、神經(jīng)退行性疾病和糖尿病的研究尤為重要。PTMs 的特征，雖然具有挑戰(zhàn)性，但提供了對病因?qū)W過程下的細胞功能的無價的洞察。在技術上，研究翻譯后修飾蛋白的主要挑戰(zhàn)是開發(fā)特異性的檢測和純化方法。幸運的是，這些技術障礙正在用各種新的和精煉的蛋白質(zhì)組學技術來克服。目前，發(fā)現(xiàn)的比較常見的修飾類型是糖基化、泛素化和磷酸化。江蘇蛋白質(zhì)琥珀?；揎椊M學鑒定

磷酸化修飾蛋白質(zhì)組學：磷酸化修飾蛋白質(zhì)組的研究主要集中于真核生物中普遍存在的絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸的磷酸化。由于體內(nèi)磷酸化蛋白的含量很低，因此在分析前必須對其進行分離和富集。目前，常用的磷酸化蛋白質(zhì)的分離和富集技術包括固定化金屬親和色譜、免疫沉淀、強陽離子交換色譜、強陰離子交換色譜、反相色譜等。這些技術被整合和優(yōu)化用于不同生物樣品的磷酸化蛋白質(zhì)組分析。翻譯后修飾分析自中而下分析策略：自中而下的蛋白質(zhì)組學技術可用于組蛋白修飾的分析。樣品制備與普遍使用的自下而上的分析策略相同，直到得到純化的組蛋白。提取組蛋白后，用GluC進行消化。然后用弱陽離子交換/親水相互作用色譜與配備電子轉(zhuǎn)移解離（的高分辨率質(zhì)譜聯(lián)機聯(lián)用，對樣品進行理想的分離。譜識別可以用傳統(tǒng)的軟件進行，但是由于估計適當?shù)腻e誤發(fā)現(xiàn)率的問題，需要對結果進行過濾。南京糖基化修飾蛋白質(zhì)組學費用蛋白質(zhì)翻譯后修飾（PTMs）是指蛋白質(zhì)在翻譯中或翻譯后的化學修飾過程。

乙?；揎椀鞍捉M學應用方向有什么？1、基礎醫(yī)學、臨床診斷：生物標志物，疾病機理機制，疾病分型，個性化治理等；2、生物醫(yī)藥：藥物作用機理，藥效評價，藥物開發(fā)等；3、微生物領域：致病機理，耐藥機制，病原體-宿主相互作用研究等；4、海洋水產(chǎn)：漁業(yè)資源，海水養(yǎng)殖，漁業(yè)環(huán)境與水產(chǎn)品安全等；5、生物能源、環(huán)境科學領域：發(fā)酵過程優(yōu)化，生物燃料生產(chǎn)，環(huán)境危定風險評估研究等；6、食品營養(yǎng)：食品儲藏及加工條件優(yōu)化，食品組分及品質(zhì)鑒定，功能性食品開發(fā)，食品安全監(jiān)檢測等。

定量N-糖基化蛋白質(zhì)翻譯修飾組學：蛋白質(zhì)的N-糖基化位點修飾是重要的蛋白質(zhì)翻譯后修飾之一，主要在復雜的多細胞或組織形成過程中起關鍵作用。蛋白質(zhì)的N-糖基化修飾位點具有保守的氨基酸序列NX（S/T）（其中X為除脯氨酸以外的其它氨基酸）凝集素親和法是目前糖蛋白質(zhì)組學中應用普遍的分離富集方法。凝集素（lectin）是一類糖結合蛋白質(zhì)，能專一識別某一特殊結構的單糖或聚糖中特定的糖基序列而與之結合，它們與糖鏈可逆非共價結合，糖蛋白或糖肽被凝集素捕獲之后，通常用特定的單糖通過競爭結合凝集素將糖蛋白或糖肽洗脫下來。研究蛋白質(zhì)磷酸化對闡明蛋白質(zhì)功能具有重要意義。

蛋白翻譯后修飾位點鑒定：蛋白質(zhì)翻譯后修飾（Post-Translational Modifications, PTMs）幾乎參與了細胞所有正常生命活動的過程，并發(fā)揮十分重要的調(diào)控作用。蛋白質(zhì)修飾位點能夠影響蛋白的多種屬性，包括蛋白質(zhì)折疊、活性以及之后的功能，對于蛋白質(zhì)修飾位點的發(fā)現(xiàn)及研究對闡明蛋白質(zhì)的功能具有重要作用。技術特點：時間快，周期短；識別位點準確，采用高分辨率質(zhì)譜技術可以準確定位到發(fā)生修飾的氨基酸位點。適用范圍：已知蛋白序列；明確翻譯后修飾的類型。蛋白質(zhì)糖基化是一種常見的蛋白質(zhì)翻譯后修飾。北京丙?；揎椀鞍踪|(zhì)組學質(zhì)譜鑒定

糖基化蛋白質(zhì)翻譯修飾組學主要在復雜的多細胞或組織形成過程中起關鍵作用。江蘇蛋白質(zhì)琥珀?；揎椊M學鑒定

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