蛋白質翻譯后修飾組學技術原理:首先將蛋白樣本酶解成肽段混合物,然后使用液相色譜對酶解后的肽段混合物進行組分分離以降低樣本復雜程度,然后通過高質量的修飾類抗體和生物材料對修飾肽段進行富集,之后上樣至液相色譜 - 串聯(lián)質譜中進行分析,通過相應的數據庫檢索匹配,一次可鑒定成百上千個修飾位點。蛋白質磷酸化位點分析樣品經酶解后,用 TiO2 微球對磷酸化肽段進行富集,富集后的產物由質譜分析,并通過軟件完成數據檢索。琥珀?;揎椀鞍踪|組技術特點:采用主流抗體親和富集方法,特異性高,富集效率好。蛋白質翻譯后修飾幾乎參與了細胞所有正常生命活動的過程。浙江蛋白質琥珀酰化修飾組學有哪些
翻譯后修飾蛋白組分析:蛋白質翻譯后修飾是影響蛋白質功能并調節(jié)整個細胞過程的重要方式,幾乎在每個細胞過程中都是不可或缺的。分析和鑒定翻譯后修飾蛋白質對揭示蛋白質的功能和深入了解各種生理現象具有重要意義。大多數翻譯后修飾蛋白以低化學計量和豐度存在,這限制了在分析全細胞裂解液時對其的檢測。蛋白質是各種細胞功能比較重要的執(zhí)行者,其功能正常與否決定著生命活動能否有序、高效的進行,而其中翻譯后修飾起著至關重要的作用。翻譯后修飾改變了蛋白質中不同氨基酸殘基上的生物化學官能團,進而改變其化學性質或結構,使得蛋白質具有更為復雜的結構和更為完善的功能,實現更為精細的調節(jié)。蛋白質的翻譯后修飾過程極其復雜,已知的翻譯后修飾種類有20多種。但其中較為常見的主要是磷酸化、泛素化、SUMO化、酰(含乙酰)化、甲基化以及糖基化。濟南亞硝基化修飾蛋白質組學質譜鑒定蛋白質翻譯后修飾組學有什么重要的作用呢?
泛素化修飾蛋白質組學的作用:泛素化、心血管等疾病的發(fā)病密切相關。因此,作為近年來生物化學研究的一個重大成果,它已然成為研究、開發(fā)新藥物的新靶點。技術原理是首先將蛋白樣本酶解成肽段混合物,然后使用液相色譜對酶解后的肽段混合物進行組分分離以降低樣本復雜程度,然后通過高質量的泛素化修飾抗體和生物材料對修飾肽段進行富集,之后上樣至液相色譜-串聯(lián)質譜中進行分析定量。技術優(yōu)勢:高特異性的修飾抗體;高分辨率、高靈敏度質譜儀;鑒定通量高;可與代謝組學等進行多組學聯(lián)合分析。
蛋白質乙?;揎椊M學:乙?;揎検侵冈诿富蚍敲缸饔孟拢瑢⒁阴oA的乙?;鶊F轉移至蛋白質氨基酸的殘基上。蛋白質乙酰化也是一種可逆的酶促反應過程。乙酰基轉移酶可以將乙?;鶊F(CH3C=O)從乙酰輔酶A轉移至蛋白質。同理,去乙?;竸t可以逆轉這種反應。蛋白質上的賴氨酸乙?;羌毎麅纫环N重要的PTMs過程。不僅發(fā)生在細胞核內組蛋白、轉錄因子等上,在細胞質和線粒體中也存在著諸多蛋白的乙酰化修飾。在植物研究領域內,乙?;揎椫饕獏⑴c植物光合作用、生長發(fā)育、脅迫響應等過程。在醫(yī)學領域,乙酰化修飾可調節(jié)人體內某種代謝酶,控制糖尿病,這一發(fā)現為糖尿病干預與療理帶來新的希望。磷酸化修飾蛋白質組學是原核生物和真核生物中比較重要的調控修飾形式。
泛素化修飾蛋白質組技術原理:首先將蛋白樣本酶解成肽段混合物,然后使用液相色譜對酶解后的肽段混合物進行組分分離以降低樣本復雜程度,然后通過高質量的泛素化修飾類抗體和生物材料對修飾肽段進行富集,之后上樣至液相色譜-串聯(lián)質譜中進行分析定量。技術優(yōu)勢:1、高特異性的修飾類泛抗體;2、高分辨率、高靈敏度質譜儀;應用領域:泛素化修飾還參與了細胞周期、增殖、細胞凋亡、分化、轉錄調控、基因表達、轉錄調節(jié)、信號傳遞、損傷修復、炎癥免疫等幾乎一切生命活動的調控。泛素化心血管等疾病的發(fā)病密切相關。因此,作為近年來生物化學研究的一個重大成果,它已然成為研究、開發(fā)新藥物的新靶點。蛋白質的N-糖基化位點修飾是重要的蛋白質翻譯后修飾之一。濟南亞硝基化修飾蛋白質組學質譜鑒定
翻譯后修飾是指對翻譯后的蛋白質進行共價加工的過程。浙江蛋白質琥珀?;揎椊M學有哪些
蛋白質的甲基化修飾 :蛋白質的甲基化(methylation)是指將甲基酶促轉移到蛋白質的某個殘基上,通常是賴氨酸或精氨酸,也包括組氨酸、半胱氨酸和天冬酰胺等。蛋白質的甲基化是一種普遍的修飾,在大鼠肝細胞核的總蛋白提取物中,大約2%的精氨酸殘基是二甲基化的。蛋白質甲基化經常與乙?;⒘?,因為它們都是常見的表觀遺傳修飾,經常發(fā)生在組蛋白上。不過從化學反應的角度來看,乙?;梢运阕饕环N短鏈脂?;揎?,這里主要討論甲基化方面的問題。浙江蛋白質琥珀?;揎椊M學有哪些