上海新型修飾蛋白組學分析研究

來源: 發(fā)布時間:2022-05-05

蛋白質組研究內容:1.蛋白質鑒定:可以利用一維電泳和二維電泳并結合Western等技術,利用蛋白質芯片和抗體芯片及免疫共沉淀等技術對蛋白質進行鑒定研究。2.翻譯后修飾:很多mRNA表達產生的蛋白質要經歷翻譯后修飾如磷酸化,糖基化,酶原刺激等。翻譯后修飾是蛋白質調節(jié)功能的重要方式,因此對蛋白質翻譯后修飾的研究對闡明蛋白質的功能具有重要作用?;?受體結合分析??梢岳没蚯贸头戳x技術分析基因表達產物-蛋白質的功能。另外對蛋白質表達出來后在細胞內的定位研究也在一定程度上有助于蛋白質功能的了解。蛋白質組的概念與基因組的概念有許多差別。上海新型修飾蛋白組學分析研究

蛋白質組學技術:電噴霧質譜:ESI-MS是利用高電場使質譜進樣端的毛細管柱流出的液滴帶電,在N2氣流的作用下,液滴溶劑蒸發(fā),表面積縮小,表面電荷密度不斷增加,直至產生的庫侖力與液滴表面張力達到雷利極限,液滴爆裂為帶電的子液滴,這一過程不斷重復使液滴非常細小呈噴霧狀,這時液滴表面的電場非常強大,使分析物離子化并以帶單電荷或多電荷的離子形式進入質量分析器。ESI-MS從液相中產生離子,一般說來,肽段的混合物經過液相色譜分離后,經過偶聯的與在線連接的離子阱質譜分析,給出肽片段的精確的氨基酸序列,但是分析時間一般較長。目前,許多實驗室兩種質譜方法連用,獲得有意義的蛋白質的肽段序列,設計探針或引物來獲得有意義的基因。隨著蛋白質組研究的深入,又有多種新型質譜儀出現,主要是在上述質譜儀的基礎上進行改進與重新組合。上海高通量蛋白質組學質譜分析DIA 定量蛋白質組學的循環(huán)時間固定,掃描點數均勻,定量準確度高。

蛋白質組學在醫(yī)療和健康方面有什么應用?作為主要研究策略的蛋白質組學:這與題目中的描述更相關些,蛋白質組學是研究中的關鍵方法(甚至是唯1方法)。具體而言,蛋白質組學在此類應用中,更多地用于提供高通量蛋白質定性定量信息。作為檢測手段的蛋白質組學:事實上,在當前的生物醫(yī)學Q研究和臨床診斷中,蛋白質組學相關技術有非常多的應用。因為蛋白質組學技術的本質(從分析化學角度來看),就是對蛋白質的定性定量分析。生物醫(yī)學和臨床診斷中,需要大量表征一種或多種蛋白質的含量、氨基酸序列、翻譯后修飾等信息。蛋白質組學相關技術目前在一小部分應用中具有獨特優(yōu)勢。有很多蛋白質組學的研究者在工業(yè)界和醫(yī)院進行相關研究和日常工作。

PRM靶向蛋白質組學:產品分類:a.相對定量(目的同WB)。b.一定定量(目的同Elisa)。技術優(yōu)勢:(1)無需抗體,可直接對樣本中目標蛋白質進行定量分析。(2)高特異性、準確度和靈敏度,靶向檢測目標蛋白對應的多個unique肽段。(3)通量高,可以同時實現幾十個蛋白的定量檢測。樣本要求:動物及臨床組織標本100mg/sample,血清、血漿200μL/sample,細胞、微生物1×107cells/sample。應用方向:驗證修飾和非修飾定量蛋白組學結果;目標蛋白相對定量和一定定量分析。蛋白質組學屬于后基因組時代的科學研究,針對基因表達產物進行檢測與定量。在未來的發(fā)展中,蛋白質組學的研究領域將更加普遍。

蛋白質組學在生物學領域的研究中的應用是怎樣的?研究對象涉及到生物體且生物體內表達蛋白,理論上都可以應用蛋白質組學。蛋白質組學是以研究生物體蛋白組成及其變化規(guī)律為目的的應用科學。主要使用的儀器為液質聯用高分辨率質譜儀。詳細來說,蛋白質組學包含許多分支:非標定量蛋白質組學(定性研究生物體的蛋白組成),定量蛋白質組學(對生物體蛋白表達含量進行測定),修飾蛋白質組學(對蛋白質翻譯后修飾進行檢測)及相互作用蛋白質組研究(蛋白質直接相互作用機制解析)等。蛋白質組學屬于后基因組時代的科學研究,針對基因表達產物進行檢測與定量。因此更能反應出生物體生理條件下的水平與狀態(tài)。蛋白質組與基因組相對應,也是一個整體的概念。深圳蛋白質組學服務

蛋白質組學在應用中,更多地用于提供高通量蛋白質定性定量信息。上海新型修飾蛋白組學分析研究

Label-free非標記的定量蛋白質組學:定量不需要標記處理,操作簡單,可以做任意樣本的總蛋白質差異定量,但對實驗操作的穩(wěn)定性、重復性要求較高,準確性也較標記定量差。因此,Label-free技術適合于大樣本量的定量比較,以及對無法用標記定量實現的實驗設計。iTRAQ標記的定量蛋白質組學:iTRAQ定量是目前定量蛋白質組學應用比較普遍的技術, 該技術的關鍵原理是多肽標記和定量,將多肽的含量轉化為114、115、116和117同位素的含量(或113、114、115、116、117、118、119和121的8標記),從而簡化了定量的復雜性,之后通過多肽定量值回歸到蛋白的定量值,從而測定出不同樣本之間蛋白質的差異。上海新型修飾蛋白組學分析研究