山東靶向代謝組學(xué)應(yīng)用

靶向代謝組學(xué)分析成功的關(guān)鍵因素是準(zhǔn)確度、高通量和可靠性。靶向代謝組學(xué)鑒定一般采用 GC/MS 系統(tǒng)的選擇性離子監(jiān)測(cè) (SIM)，或在三重串聯(lián)四極桿 LC/MS 系統(tǒng)上用多反應(yīng)離子監(jiān)測(cè) (MRM) 進(jìn)行靶向 MS/MS。SIM 比全掃描圖譜采集具有更高的靈敏度，在單四極桿質(zhì)譜中,這種靈敏度增強(qiáng)的原因是延長(zhǎng)了所選擇離子的采集時(shí)間。因?yàn)楸O(jiān)測(cè)的是一個(gè)很小的質(zhì)量窗口，所以質(zhì)量色譜圖只表示對(duì)極為特定質(zhì)量的檢測(cè)。在大多數(shù)情況下，靈敏度可以提高 10 倍。MRM 是進(jìn)行質(zhì)譜定量的選擇方法，與 SIM 相比更為靈敏、更加特異。可以產(chǎn)生獨(dú)特的碎片離子，可對(duì)非常復(fù)雜基質(zhì)中的目標(biāo)化合物進(jìn)行監(jiān)測(cè)和定量。代謝組學(xué)先進(jìn)分析檢測(cè)技術(shù)結(jié)合模式識(shí)別和**系統(tǒng)等計(jì)算分析方法是代謝組學(xué)研究的基本方法。山東靶向代謝組學(xué)應(yīng)用

代謝組學(xué)樣本收集注意事項(xiàng)：（1）血液離開動(dòng)物或人體后，應(yīng)盡快開展血清、血漿的分離，并嚴(yán)格按照操作說(shuō)明進(jìn)行。（2）采集到的血清為黃色透明液體、血漿為淡黃色半透明液體，如果發(fā)現(xiàn)樣本中是紅色，說(shuō)明在已經(jīng)發(fā)生了了溶血現(xiàn)象，樣本需重新制備。（3）血清與血漿的主要區(qū)別在于血清中不含纖維蛋白原。血清和血漿中脂質(zhì)，氨基酸，核苷酸等代謝譜存在差別。糞便樣本收集：1.人糞便：（1）用無(wú)菌勺挖取新鮮的，排泄中后部的內(nèi)側(cè)糞便（避免尿液及其他壁對(duì)樣本污染）；（2）分裝樣本20mg/管。（3）迅速放入液氮中冷凍處理至少15min.（4）-80℃冰箱凍存。寄樣需足量干冰。山東靶向代謝組學(xué)應(yīng)用代謝組學(xué)技術(shù)得到了迅速發(fā)展。

代謝組學(xué)（英語(yǔ)：metabolomics）是對(duì)細(xì)胞，生物流體，組織或生物體內(nèi)的小分子（通常稱為代謝物，metabolites）的大規(guī)模研究。 這些小分子及其在生物系統(tǒng)中的相互作用統(tǒng)稱為代謝組。能夠?qū)ι飿颖局械拇x物進(jìn)行全方面分析的一項(xiàng)新興技術(shù)，被定義為代謝組學(xué)技術(shù)。代謝組學(xué)是在后基因組學(xué)時(shí)代興起的一門跨領(lǐng)域?qū)W科，其主要目標(biāo)是定量的研究生命體對(duì)外界刺激、病理生理變化、以及本身基因突變而產(chǎn)生的其體內(nèi)代謝物水平的多元?jiǎng)討B(tài)反應(yīng)。之后得到迅速發(fā)展并滲透到多項(xiàng)領(lǐng)域，比如疾病診斷、醫(yī)藥研制開發(fā)、營(yíng)養(yǎng)食品科學(xué)、毒理學(xué)、環(huán)境學(xué)，植物學(xué)等與人類健康護(hù)理密切相關(guān)的領(lǐng)域。

代謝組學(xué)樣品收集方法及所需樣本量是什么？(1) 血清樣品： 避免反復(fù)凍融。血液收集在離心管中靜置30分鐘進(jìn)行凝血。8000rpm離心10分鐘，取上清分裝到凍存管中，放置液氮中或-80度凍存；單個(gè)樣本要求體積為50μL。(2) 尿液樣品：臨床樣本請(qǐng)全部取清晨第1次尿液。尿液直接分裝到離心管中，8000rpm離心10分鐘，取上清分裝到凍存管中，放置液氮中或-80度凍存，-80度凍存；單個(gè)樣本要求體積為100μL。(3) 其他樣本收集辦法請(qǐng)咨詢譜領(lǐng)工作人員。代謝組學(xué)的發(fā)展很迅速。

代謝組學(xué)發(fā)展前景：代謝組學(xué)是繼基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)后出現(xiàn)的新興“組學(xué)”,每年發(fā)表的代謝組學(xué)研究的文章數(shù)量都在不斷增加。代謝組學(xué)的發(fā)展很迅速，盡管還沒(méi)有經(jīng)典論文出現(xiàn),但是研究人員相信，與基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)相比，代謝組學(xué)將在臨床上發(fā)揮更大的作用。許多公司通過(guò)市場(chǎng)研究發(fā)現(xiàn)，健康人并不希望進(jìn)行基因型分析，所以，對(duì)于這些人群來(lái)說(shuō)，基因組學(xué)研究在臨床上的應(yīng)用很有限。而代謝組學(xué)與臨床化學(xué)較為相似，且相對(duì)于基因組學(xué)來(lái)說(shuō)，提供的個(gè)人信息更少，故其在臨床上的應(yīng)用有可能產(chǎn)生一定的影響。代謝組學(xué)是對(duì)某一生物或細(xì)胞中相對(duì)分子量小于1,000的小分子代謝產(chǎn)物進(jìn)行定性和定量分析的一門新學(xué)科。杭州LC-MS／MS非靶向代謝組學(xué)技術(shù)服務(wù)

與其他“組學(xué)”研究相比，代謝組學(xué)的費(fèi)用更低。山東靶向代謝組學(xué)應(yīng)用

GC-MS非靶向代謝組學(xué)能檢測(cè)到哪些類別的代謝物？衍生化極大地拓展了GC/MS的檢測(cè)分析范圍。GC/MS能檢測(cè)到有機(jī)酸、氨基酸、單糖、糖醇、胺類、脂肪酸、吲哚、單甘油酯、核苷、二糖、生育酚、甾醇和膽汁酸等代謝物。如何提高定性準(zhǔn)確度？GC/MS的定性有雙重標(biāo)準(zhǔn)，一是保留指數(shù)，二是質(zhì)譜信息的相似度（similarity）。不同于LC/MS的軟電離源，GC/MS使用的EI源屬于硬電離，能量較強(qiáng)且穩(wěn)定，在將代謝物分子電離后，分子離子峰進(jìn)一步碎裂產(chǎn)生豐富的碎片離子。因此，我們很難在GC/MS上看到分子離子峰。GC/MS提供的是代謝物的“指紋圖譜”，將儀器得到的實(shí)際指紋圖譜和質(zhì)譜庫(kù)（如NIST庫(kù)）進(jìn)行比對(duì)后，我們將會(huì)得到一個(gè)叫相似度的指標(biāo)。保留指數(shù)和相似度都必須滿足設(shè)定的閾值，軟件才會(huì)給出色譜峰的定性結(jié)果。然后采用標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)譜信息進(jìn)行完全比對(duì)定性，也就是說(shuō)只有經(jīng)過(guò)標(biāo)準(zhǔn)品比對(duì)，代謝物才是被100%定性。山東靶向代謝組學(xué)應(yīng)用

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