平板計數(shù)瓊脂(PCA):菌落總數(shù)測定的通用培養(yǎng)基平板計數(shù)瓊脂(PCA)是一種廣泛應用于菌落總數(shù)測定的非選擇性固體培養(yǎng)基,適用于食品、化妝品、飲用水、奶制品等多種樣品中微生物的計數(shù)。制備方法為:稱取23.5g培養(yǎng)基干粉,加入1000ml蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,121℃高壓滅菌15分鐘。檢驗原理胰蛋白胨提供碳源和氮源;酵母浸粉提供B族維生素;葡萄糖提供能源;瓊脂作為凝固劑。應用領域PCA培養(yǎng)基主要用于菌落總數(shù)的測定,廣泛應用于食品、化妝品、飲用水等領域的微生物檢測。使用方法稀釋倒平板法:稱取23.5g培養(yǎng)基,加入1000ml蒸餾水,加熱煮沸至完全溶解,121℃高壓滅菌15分鐘。取樣品25g或25ml,溶解于225ml無菌生理鹽水或無菌磷酸鹽緩沖液中,進行10倍梯度稀釋。選擇2-3個合適的稀釋度,吸取1ml稀釋液于無菌平皿中,加入45-50℃的培養(yǎng)基約15-25ml,混勻后冷卻凝固。翻轉(zhuǎn)平板,36±1℃培養(yǎng)48±2小時。平板涂布法:同稀釋倒平板法前幾步操作。將稀釋液0.1ml或0.2ml涂布于已倒好的平板上,36±1℃培養(yǎng)48±2小時。注意事項配制好的培養(yǎng)基應盡快使用,避免長時間放置導致細菌繁殖。倒平板時,培養(yǎng)基溫度應適宜,避免燙傷。
念珠菌顯色培養(yǎng)基:精細檢測菌的高效工具念珠菌顯色培養(yǎng)基是一種用于快速檢測和鑒定菌屬菌的微生物培養(yǎng)基。其關鍵原理是利用酶底物法,通過顯色反應來區(qū)分不同種類的菌。原理念珠菌顯色培養(yǎng)基含有特定的顯色底物,當菌在培養(yǎng)基上生長時,其代謝產(chǎn)物會與顯色底物發(fā)生反應,使菌落呈現(xiàn)特定的顏色。例如,白色念珠菌在培養(yǎng)基上通常呈現(xiàn)綠色或藍綠色,熱帶菌呈現(xiàn)藍灰色或鐵藍色,光滑菌呈現(xiàn)紫色,克柔假絲酵母菌呈現(xiàn)粉色,而其他菌則呈現(xiàn)白色。這種顯色特性使得菌能夠與其他微生物區(qū)分開來,提高了檢測的特異性和準確性。制備時,稱取4.85g培養(yǎng)基粉末加入100ml蒸餾水或純化水中,加熱煮沸至完全溶解,冷卻至45-50℃后傾注平皿,冷卻凝固后備用。操作步驟按國家標準或其他方法制備樣品液。取樣品液涂布或劃線接種于平板上。在25-30℃培養(yǎng)48小時。觀察菌落顏色:白色念珠菌為綠色或藍綠色,熱帶菌為藍灰色或鐵藍色,光滑菌為紫色,克柔假絲酵母菌為粉色,其他菌為白色。對可疑白色念珠菌菌落可劃線接種到PDA瓊脂平板上,25-30℃培養(yǎng)24-48小時,挑取單菌落做鏡檢和生化試驗。YSG瓊脂培養(yǎng)皿改良馬丁培養(yǎng)基的配方經(jīng)過優(yōu)化,能夠支持多種菌的生長,包括黑曲霉、白色念珠菌和酵母菌等。
3. 水解酪蛋白瓊脂(MH瓊脂)在細菌耐藥性研究中的應用細菌耐藥性是全球公共衛(wèi)生領域的重要問題,而MH瓊脂在這一研究中發(fā)揮了關鍵作用。通過MH瓊脂培養(yǎng)基,研究人員可以培養(yǎng)耐藥菌株,并分析其耐藥機制。例如,MH瓊脂可用于篩選攜帶耐藥基因的細菌,或評估新型抗生物質(zhì)對耐藥菌的抑制效果。此外,MH瓊脂還可用于研究細菌耐藥性的傳播機制,如質(zhì)粒轉(zhuǎn)移和基因突變。這些研究為開發(fā)新型抗物質(zhì)策略提供了重要依據(jù)。4.水解酪蛋白瓊脂(MH瓊脂)在病原菌分離與鑒定中的優(yōu)勢MH瓊脂因其成分簡單且營養(yǎng)豐富,成為分離和鑒定病原菌的理想培養(yǎng)基。在臨床樣本中,MH瓊脂能夠支持多種病原菌的生長,如金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和肺炎克雷伯菌等。通過觀察菌落形態(tài)、顏色和生長特性,研究人員可以初步鑒定病原菌的種類。此外,MH瓊脂還可與其他選擇性培養(yǎng)基結(jié)合使用,提高病原菌分離的效率和準確性。在食品安全和環(huán)境衛(wèi)生領域,MH瓊脂也被用于檢測食品和水源中的病原菌污染。
霉菌培養(yǎng)基具備靈活的 pH 調(diào)節(jié)能力,宛如為霉菌打造的 “酸堿平衡護盾”。霉菌在生長過程中會產(chǎn)生各種酸性或堿性代謝產(chǎn)物,如有機酸、氨等,這些物質(zhì)的積累可能導致培養(yǎng)基 pH 值發(fā)生變化,從而影響霉菌的生長和代謝。然而,該培養(yǎng)基的緩沖體系能夠有效應對這種情況。例如,磷酸鹽緩沖對可以在酸性條件下結(jié)合氫離子,在堿性條件下釋放氫離子,通過動態(tài)的酸堿平衡調(diào)節(jié)機制,將培養(yǎng)基的 pH 值穩(wěn)定在霉菌生長適宜的范圍內(nèi)。此外,培養(yǎng)基中還可能添加一些具有酸堿調(diào)節(jié)能力的物質(zhì),如碳酸鈣,當培養(yǎng)基變酸時,碳酸鈣可以與氫離子反應,生成二氧化碳和水,從而中和酸性物質(zhì),維持 pH 值的穩(wěn)定。這種靈活的 pH 調(diào)節(jié)機制為霉菌提供了一個穩(wěn)定的生長環(huán)境,保證了霉菌體內(nèi)酶的活性穩(wěn)定,使得霉菌的各項生理功能能夠正常運轉(zhuǎn),促進了霉菌的健康生長和代謝產(chǎn)物的高效合成。胰酪胨和大豆蛋白胨提供豐富的氮源和生長因子,葡萄糖作為碳源支持微生物生長,磷酸氫二鉀則起到緩沖作用。
三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基(TSI):腸道菌鑒定與生化反應研究的高效工具三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基(Triple Sugar Iron Agar,簡稱TSI)是一種經(jīng)典的鑒別性培養(yǎng)基,廣應用于腸道菌的生化反應鑒定,尤其適用于腸桿菌科細菌的發(fā)酵特性和硫化氫生成能力的檢測。培養(yǎng)基的特點TSI培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、牛肉浸出粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、酚紅、硫代硫酸鈉、硫酸亞鐵和瓊脂。其中,乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例為10:10:1,用于檢測細菌對不同糖類的發(fā)酵能力;酚紅作為酸堿指示劑,酸性時呈黃色,堿性時呈紅色;硫代硫酸鈉和硫酸亞鐵用于檢測硫化氫的生成。性能優(yōu)勢多重鑒別能力:TSI培養(yǎng)基能夠同時檢測細菌對三種糖(乳糖、蔗糖和葡萄糖)的發(fā)酵能力,以及硫化氫的生成,提供豐富的生化信息。直觀的顏色變化:通過酚紅指示劑,培養(yǎng)基的顏色變化直觀反映了細菌的代謝特性。例如,發(fā)酵乳糖的細菌會使整個培養(yǎng)基變黃,而只發(fā)酵葡萄糖的細菌會使斜面變紅、底層變黃。硫化氫檢測:某些細菌分解含硫氨基酸產(chǎn)生硫化氫,與培養(yǎng)基中的鐵鹽反應生成黑色沉淀,便于快速識別。應用廣:TSI培養(yǎng)基不僅用于臨床樣本中腸道致病菌的鑒定,還廣泛應用于食品微生物檢測和微生物學研究。該培養(yǎng)基的成分包括酸水解酪蛋白、葡萄糖、乙酸鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、DL-色氨酸、L-胱氨酸鹽酸鹽。TSAST培養(yǎng)皿
培養(yǎng)基的主要成分包括胰酪蛋白胨、酵母浸出粉、葡萄糖、氯化鈉、硫乙醇酸鈉、L-胱氨酸和刃天青。YSG瓊脂培養(yǎng)皿
0.1%蛋白胨水培養(yǎng)基:簡單而高效的微生物研究工具0.1%蛋白胨水培養(yǎng)基是一種簡單且廣泛應用于微生物學研究的基礎培養(yǎng)基,具有好的特點和優(yōu)勢。成分與配制該培養(yǎng)基的主要成分是蛋白胨,含量為0.1%(1.0g/L),pH值為7.1±0.2。蛋白胨作為氮源,為微生物生長提供必需的氨基酸和生長因子。配制時,將1.0g蛋白胨溶解于1L純化水中,加熱煮沸溶解后,分裝并進行121℃高壓滅菌15分鐘。特點與優(yōu)勢營養(yǎng)基礎性:蛋白胨提供豐富的氮源和生長因子,適合大多數(shù)細菌的生長。雖然其營養(yǎng)成分相對簡單,但足以支持許多常見菌株的生長。緩沖與穩(wěn)定性:其配方具有一定的緩沖能力,能夠維持培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定性,有利于微生物的生長和繁殖。經(jīng)濟與便捷:0.1%蛋白胨水培養(yǎng)基價格低廉,配制方法簡單,適合大規(guī)模實驗和樣品處理。廣泛應用:該培養(yǎng)基常用于樣品的稀釋和制備,也可用于***素對細菌生長抑制作用的觀察。性能與應用0.1%蛋白胨水培養(yǎng)基適用于多種微生物的培養(yǎng)和檢測,包括細菌、酵母和霉菌等。其無菌性經(jīng)過嚴格驗證,可在36±1℃下培養(yǎng)72小時無菌生長。此外,該培養(yǎng)基還可用于藥品和生物制品的無菌檢測YSG瓊脂培養(yǎng)皿