湖南小鼠動物模型培養(yǎng)

或者是還包括為這種過程、方法、物品或者設(shè)備所固有的要素。在沒有更多限制的情況下，由語句“包括一個……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的過程、方法、物品或者設(shè)備中還存在另外的相同要素。以下結(jié)合實(shí)施例對本實(shí)用新型的特征和性能作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。實(shí)施例1本實(shí)用新型提供一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng)，包括功能設(shè)備集成底座1和設(shè)置在功能設(shè)備集成底座1上的飼養(yǎng)倉2，所述飼養(yǎng)倉2具有無極調(diào)控微負(fù)壓裝置、高原低氧環(huán)境模擬裝置、高原光照環(huán)境模擬裝置15、高原溫度環(huán)境模擬裝置16、高原濕度環(huán)境模擬裝置17、動物行為學(xué)遠(yuǎn)程觀察單元18，所述飼養(yǎng)倉2內(nèi)設(shè)置有若干代謝籠3，飼養(yǎng)倉2前后箱體上設(shè)置有觀察窗4和若干操作窗5，飼養(yǎng)倉2左右箱體上分別設(shè)置有小物件傳遞窗6和大物件傳遞窗7，所述代謝籠3還包括設(shè)置在代謝籠3上的投料斗8、飲水瓶9和設(shè)置在代謝籠3下方的聚糞斗10、尿液排出口11、糞便排出口12。本實(shí)施例的工作原理：本裝置的各個功能均通過設(shè)置在飼養(yǎng)倉2上的功能控制面板19控制，本裝置外形采用304不銹鋼，具有良好的氣密性。實(shí)驗(yàn)動物送入飼養(yǎng)倉2內(nèi)部后，關(guān)閉小物件傳遞窗6和大物件傳遞窗7，通過功能控制面板19實(shí)現(xiàn)飼養(yǎng)倉2內(nèi)部環(huán)境模擬。博萊霉素是具有多種抗腫瘤作用的多組分，其毒副作用之一是引起肺纖維化。湖南小鼠動物模型培養(yǎng)

輕微的接觸角膜的中心頂端。一通道正極接右眼，二通道正極接左眼。通過針管對雙眼滴生理鹽水，改善金環(huán)電極及角膜的接觸效果。保證兩個金環(huán)電極以相同的角度、方式接觸兩眼角膜中心正端的相同位置。5記錄示波信號確認(rèn)無誤后，關(guān)閉暗紅光?？梢韵葒L試記錄一下暗適應(yīng)光強(qiáng)為·s/m2的erg檢測，確認(rèn)一下信號的質(zhì)量：如果雙眼的振幅出現(xiàn)了與預(yù)期不同的較大差異，建議再次檢查金環(huán)電極的安裝位置。然后依次記錄暗適應(yīng)光強(qiáng)為·s/m2的信號。需要注意的是，完成暗適應(yīng)·s/m2光強(qiáng)檢測后，系統(tǒng)將自動打開背景光。同樣的，需要打開定時器，光適應(yīng)10-15分鐘，再記錄。6經(jīng)過光適應(yīng)后，依次記錄光適應(yīng)·s/m2以及·s/m2光強(qiáng)下波形，記錄·s/m2光強(qiáng)下閃爍視網(wǎng)膜誘發(fā)電位。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在4個月時，與ctrl(對照)小鼠比較，cko(gm20541基因敲除純合子小鼠)小鼠的a波和b波在暗適應(yīng)和光適應(yīng)條件下均明顯降低，表明gm20541敲除后導(dǎo)致視力受損(見圖5和圖6)。實(shí)施例4視網(wǎng)膜石蠟切片h&e染色：對4月齡小鼠的視網(wǎng)膜進(jìn)行石蠟切片、蘇木精-伊紅染色法(h&e染色方法)染色，具體操作如下：1)快速取小鼠眼球組織，并置于固定液中固定24h；2)石蠟包埋，切片，厚度為4μm；3)切片常規(guī)用二甲苯脫蠟。上海動物模型建模大腦中動脈(MCA)為臨床上發(fā)生腦缺血損傷常見的部位之一。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)在這些組織中，gm20541均有表達(dá)，說明該基因可能在體內(nèi)發(fā)揮重要功能。2采用免疫印跡(westernblot)的方法檢測gm20541基因在不同組織中的表達(dá)。方法：(1)分別獲取小鼠腦、肝臟、視網(wǎng)膜、心臟、腎臟以及脾，充分研磨后加入200μl蛋白裂解液ripa。(2)超聲破碎細(xì)胞后，在冰上裂解20min。(3)4℃，16000g離心10min后，取上清轉(zhuǎn)移至另一干凈離心管，加入50μl的蛋白上樣液，混勻后95℃加熱5min。(4)待樣本冷卻后，分別取20μl，160v電壓進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳(sds-page)以分離蛋白。(5)sds-page結(jié)束后，根據(jù)需要，裁剪適當(dāng)大小的硝酸纖維素膜，按順序鋪上濾紙、膠、硝酸纖維素膜及濾紙，并趕去氣泡，轉(zhuǎn)膜槽放入冰水浴中，采用恒流，轉(zhuǎn)膜2h。(6)轉(zhuǎn)膜完畢后，純水沖洗硝酸纖維素膜一遍，晾干并標(biāo)記。然后用8％的脫脂牛奶封閉2h。(7)封閉完成后，加入一定量的按一定比例(按照抗體使用說明書)稀釋于封閉液的一抗，4℃孵育過夜。(8)回收一抗，1×tbst緩沖液洗膜4次，每次10min，根據(jù)一抗來源，選擇合適二抗，用1×tbst稀釋辣根過氧化氫酶(hrp)標(biāo)記的二抗，室溫于搖床上孵育2h。(9)二抗孵育結(jié)束后，用1×tbst洗膜3次，每次10min，用thermo的elc發(fā)光試劑盒檢測蛋白。

曾為國內(nèi)、外醫(yī)藥企業(yè)做過多個藥物的臨床前藥理研究，研發(fā)產(chǎn)品已成功上市。在中國工作期間參加完成10項(xiàng)課題，在美國參與完成了NIH(NationalInstitutesofHealth)及AHA(AmericanHeartAssociation)的多個基金項(xiàng)目。發(fā)表學(xué)術(shù)論文60余篇，曾獲得省部級一、二等科技獎7項(xiàng)。在學(xué)術(shù)期刊如Nature,ProceedingsoftheNationalAcademyofSciences,JournalofClinicalInvestigation,Circulation,CirculationResearch,Cell,NatureCommunications,NatureMetabolism,ScienceTranslationalMedicine發(fā)表多篇論文。手術(shù)疾病模型精選案例1.心肌梗死模型（左冠狀動脈結(jié)扎術(shù)）與缺血再灌注損傷模型2.主動脈弓縮窄3.慢性心力衰竭模型賽業(yè)生物可提供的小動物手術(shù)疾病模型及相關(guān)服務(wù)心腦血管系統(tǒng)手術(shù)心肌梗死模型（左冠狀動脈結(jié)扎術(shù)）心臟缺血再灌注損傷模型主動脈弓縮窄術(shù)(TAC)升主動脈縮窄術(shù)腹主動脈縮窄術(shù)（模型）心力衰竭模型肺動脈高壓模型大腦中動脈栓塞。人類疾病的動物模型是指各種醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動物。

微波爐中融化后制成1％的瓊脂糖膠。取10μlpcr產(chǎn)物于加樣孔中，120v恒壓瓊脂糖電泳15min.用凝膠成像系統(tǒng)成像。圖4中a上方是gm20541條件性敲除鑒定結(jié)果，wt表示野生型對照，條帶大小為223bp；het表示雜合子，有兩個條帶223bp和358bp；sixko表示純合子，條帶大小為358bp。圖4中a下方是six3－cre鑒定結(jié)果。six3－cre大小為200bp。根據(jù)圖4中a的結(jié)果，顯示所采用的鑒定方法可對新生小鼠的基因型進(jìn)行有效鑒定。其中，gm20541基因敲除純合子小鼠即可作為視網(wǎng)膜色素變性疾病模型(后文用sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠；ctr是指野生型；het是指雜合子)，并進(jìn)行相關(guān)表型的驗(yàn)證。(5)rt-pcr實(shí)驗(yàn)分析six3-cre敲除小鼠視網(wǎng)膜中基因敲除效率驗(yàn)證，方法如下：(a)分別分離野生型和突變型小鼠視網(wǎng)膜組織，置于，加入1mltrizol提取液，室溫20分鐘；(b)加入200μl氯仿，充分混勻，室溫靜置10分鐘；(c)將樣品置于4度離心機(jī)，10000轉(zhuǎn)離心15分鐘；(d)小心吸取上清液，加入等體積異丙醇，充分混勻，10000轉(zhuǎn)離心沉淀rna；(e)75％乙醇清洗析出的總rna，離心再次沉淀，然后晾干加入depc水溶解；(f)提取的總rna用cdna合成試劑盒(invitrogen,waltham,ma,usa)合成cdna。肺泡上皮細(xì)胞及內(nèi)皮損傷，造成彌漫性肺間質(zhì)及肺泡水腫，導(dǎo)致的急性低氧性呼吸功能不全。湖北實(shí)驗(yàn)動物模型飼養(yǎng)

博來霉素誘導(dǎo)急性肺損傷小鼠模型。湖南小鼠動物模型培養(yǎng)

但是目前對znf124的研究還處于初期階段，其小鼠同源基因?yàn)間m20541(predictedgene20541，mgi：5142006)，該基因位于小鼠17號染色體3，全長2750kb，其cdna全長1406bp，包含3個外顯子，其cdna序列如seqid所示，如下：gaatgcagtgacctatgatgatgtgtgtgtgaacttcactctggaagaatggactttactggatccttcacagaagagtctctacagagatgtgatgcaggaaacctacaggaatctcactgctataggctacaattgggaagatgacaatattgaagactattttcaaagttctagaagacatggaaggcatgaaagaaatcatagtggagagaaaccttatgcttgtaaccaatgtgataaagccttttcatgtcatcatagtctccaaatacataaaagaagacatactggagagaaactctatgaatgtaaccgttgtaataaaggctttccatatcccagtgctctacaaatacataaaaggatacacagtggagagaaaccctatgaatgtaaacaatgtggtaaagcctttgcatgtcacagttctcttcaaaggcatgaaagaatacatactggtgagaaaccttatgaatgtagccaatgtggtaaagcctttacacatcaaaagagtctccaaatacataaaagaactcacagtggagaaaaaccatatgggtgtagtcagtgtggaaaagactttgtaagtcagagtcgtcttctagaacataaaaggacacatactggagagaaaccctatgaatgtaaccaatgtggtaaagcctttgcatattccaacagtctccaaatacatcaaagaacacacactggagagaaaccctatgaatgtaaccagtgtggtaaagcctttgcatatcacaatagtctccaaatacata。湖南小鼠動物模型培養(yǎng)