表明在gm20541敲除鼠視網(wǎng)膜外節(jié)變短退化。sixko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型小鼠;dapi(4,6-diamidino-2-phenylindole):細胞核染料4,6-二脒基-2-苯基吲哚;rhodopsin:視紫紅質(zhì)抗體;merge:兩種顏色重疊。具體實施方式為使本發(fā)明實施例的目的、技術方案和優(yōu)點更加清楚,下面將對本發(fā)明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述。實施例中未注明具體條件者,按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者,均為可以通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。以下結合實施例對本發(fā)明的特征和性能作進一步的詳細描述。實施例11采用rt-pcr方法檢測gm20541基因在不同組織的表達情況。方法:分別提取小鼠腦、肝臟、視網(wǎng)膜、腸、肌肉、心臟、腎臟以及脾的總rna,然后用cdna合成試劑盒(invitrogen,waltham,ma,usa)合成cdna。根據(jù)gm20541的cdna序列設計引物:gm20541-cdna-f:5’-tcggtctcatcttcattccc-3;gm20541-cdna-r:5’-ggaaggctctgttccggtat-3。以提取的cdna為模板,進行rt-pcr。擴增后進行電泳,結果見圖1。結果見圖1中a和b,可以看出,通過rt-pcr方法檢測gm20541基因在小鼠腦、肝臟、視網(wǎng)膜、腸、肌肉、心臟、腎臟以及脾中的表達。裸鼠皮下成瘤:前肢近腋后皮下注射細胞懸液; 裸鼠原位瘤:胰腺成瘤;尾靜脈注射成瘤。西藏乳鼠動物模型建模
所述外顯子序列為第3外顯子序列。進一步地,在本發(fā)明的一些實施方案中,利用cre-loxp基因敲除技術敲除gm20541基因上的第3外顯子序列。上述敲除策略是采用cre-loxp敲除技術敲除gm20541基因。但在其他的實施例中,實現(xiàn)基因敲除的技術手段有很多,例如crispr/cas9技術、人工核酸酶介導的鋅指核酸酶技術(zinc-fingernucleases,zfn)、轉錄因子樣效應物核酸酶技術(transceriptionactivator-likeeffectornucleases,talen)等。因此,在其他的實施例中采用crispr/cas9技術或其他的技術手段敲除gm20541基因,也是屬于本發(fā)明的保護范圍。進一步地,在本發(fā)明的一些實施方案中,所述目標動物為哺乳動物。進一步地,在本發(fā)明的一些實施方案中,所述哺乳動物選自小鼠、大鼠、狗、豬、猴以及猿中的任意一種。需要說明是,本發(fā)明所述的目標動物并不限于上述的動物,其他類型的哺乳動物也是可行,無論選用何種動物,只要是具有gm20541基因或其同源基因的動物,均可作為本發(fā)明所述構建方法中的目標動物,在其前體細胞中敲除gm20541基因,使其表現(xiàn)出視網(wǎng)膜色素變性性疾病特征,作為視網(wǎng)膜色素變性疾病模型,這也是屬于本發(fā)明的保護范圍。第二方面。北京裸鼠動物模型手術由于卵巢早衰的病因多種多樣,如自身免疫功能異常、遺傳因素、代謝因素、化療、放療及等。
可在設定的壓差標準內(nèi)無極調(diào)控,以保障系統(tǒng)對海拔(3000m~7000m)的微負壓進行模擬。并且,進排風風管裝有高效空氣過濾器,使進入飼養(yǎng)倉2的氣體潔凈。實施例3在實施例1的基礎上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng),所述高原低氧環(huán)境模擬裝置包括惰性氣源,所述惰性氣源與進風系統(tǒng)13連接,所述惰性氣源與進風系統(tǒng)13之間設置有比例式氣閥,還包括設置在飼養(yǎng)倉2內(nèi)的嵌入式氧測定儀。本實施例的工作原理:惰性氣源可以是惰性氣體儲備罐或者是液態(tài)惰性氣體儲備罐。在模擬低氧環(huán)境時,外接惰性氣體儲備罐連接進風系統(tǒng)13。比例式氣閥和嵌入式氧測定儀均與功能控制面板19連接,通過功能控制面板19上的氧濃度表顯示濃度來調(diào)節(jié)比例式氣閥,通過加惰性氣體來來實現(xiàn)降低氧氣濃度。當倉體內(nèi)的氧氣濃度較高時,手動打開惰性氣體儲備罐與進風系統(tǒng)之間的氣閥,調(diào)節(jié)惰性氣體進入量,使倉體內(nèi)氧氣濃度降低,觀察控制面板上的氧濃度顯示,調(diào)整氣閥開度大小,達到需求的氧濃度,以此調(diào)節(jié)實現(xiàn)高原缺氧環(huán)境的模擬。本技術方案采用的惰性氣體為對生命體無危害的惰性氣體。實施例4在實施例1的基礎上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng)。
但是目前對znf124的研究還處于初期階段,其小鼠同源基因為gm20541(predictedgene20541,mgi:5142006),該基因位于小鼠17號染色體3,全長2750kb,其cdna全長1406bp,包含3個外顯子,其cdna序列如seqid所示,如下:gaatgcagtgacctatgatgatgtgtgtgtgaacttcactctggaagaatggactttactggatccttcacagaagagtctctacagagatgtgatgcaggaaacctacaggaatctcactgctataggctacaattgggaagatgacaatattgaagactattttcaaagttctagaagacatggaaggcatgaaagaaatcatagtggagagaaaccttatgcttgtaaccaatgtgataaagccttttcatgtcatcatagtctccaaatacataaaagaagacatactggagagaaactctatgaatgtaaccgttgtaataaaggctttccatatcccagtgctctacaaatacataaaaggatacacagtggagagaaaccctatgaatgtaaacaatgtggtaaagcctttgcatgtcacagttctcttcaaaggcatgaaagaatacatactggtgagaaaccttatgaatgtagccaatgtggtaaagcctttacacatcaaaagagtctccaaatacataaaagaactcacagtggagaaaaaccatatgggtgtagtcagtgtggaaaagactttgtaagtcagagtcgtcttctagaacataaaaggacacatactggagagaaaccctatgaatgtaaccaatgtggtaaagcctttgcatattccaacagtctccaaatacatcaaagaacacacactggagagaaaccctatgaatgtaaccagtgtggtaaagcctttgcatatcacaatagtctccaaatacata。骨質(zhì)疏松癥是以骨量減少及骨組織微觀結構為特征的一種全身性骨骼疾病,伴有骨的脆性增加、易于發(fā)生骨折。
疾病神經(jīng)系統(tǒng)疾病模型動物抗抑郁對腦突觸體攝取5-HT、NA、DA的抑制作用(樣品篩選、IC50測定)大鼠強迫游泳試驗(大/小鼠,Noduls軟件、視屏分析)大/小鼠小鼠懸尾試驗(Noduls軟件、視屏分析)小鼠5-羥色胺增強試驗小鼠利血平誘導眼瞼下垂試驗小鼠育亨賓毒性增強試驗小鼠高劑量阿撲拮抗小鼠大鼠慢性輕度不可預見性刺激(CUMS)模型大鼠新環(huán)境進食抑制實驗大/小鼠小鼠腦內(nèi)單胺氧化酶MAO-A、MAO-B活性測定小鼠對新生大鼠海馬神經(jīng)細胞的保護作用(谷氨酸損傷、過氧化氫損傷、缺糖缺氧損傷、損傷等)新生大鼠對SH-SY5Y細胞合成分泌BDNF的作用SH-SY5Y細胞抗驚厥育亨賓毒性增強試驗小鼠戊四唑驚厥小鼠荷包牡丹堿驚厥小鼠印防己驚厥小鼠抗焦慮與戊巴比妥類藥物的協(xié)同作用小鼠對巴比妥閾下劑量的影響小鼠再入睡試驗小鼠曠場實驗(大/小鼠,全程攝像監(jiān)控、軟件處理)大/小鼠大鼠高架十字迷宮法(全程攝像監(jiān)控、軟件處理)大鼠大鼠穿梭箱法(全程攝像監(jiān)控、軟件處理)大鼠抗帕金森氏癥抗帕金森氏癥6-羥多巴胺致大鼠帕金森病模型大鼠MPTP模型(雙側損毀PD模型)大/小鼠氧化震顫素致顫模型大/小鼠疼痛??梢院喕瘜嶒灢僮骱蜆悠肥占I虾DX定位動物模型培養(yǎng)
APOE-/-鼠左頸動脈結扎糖尿病模型。西藏乳鼠動物模型建模
首先,預實驗必須要當做正式實驗來對待(態(tài)度要放端正,這是必須的)。預實驗的每一步都需要詳細規(guī)劃,多方籌謀。不論是實驗動物的選擇,還是檢測試劑的購買,都盡量和正式實驗統(tǒng)一標準。建議大家先把所有試劑和藥物購買完畢后,再去購買實驗動物。因為動物會長胖,長胖后給藥劑量就要增加,不僅多花錢,并且還容易影響實驗效果。筆者曾經(jīng)提前將實驗動物買回,但因為特殊原因沒能購買到造模藥物,終只能忍痛割愛將動物贈送他人,白白虧了一筆血汗錢(那批老鼠在我這兒白吃白喝長得太胖,沒辦法用作造模)。動物及試劑購買首先需要考慮:實驗動物品種、體重、性別、周齡(通常根據(jù)既往文獻報道可以獲得答案)、數(shù)量(需要考慮到實驗有一定動物死亡率或者動物本身會打架互毆,因此需要提前購買足夠的動物)。動物購買的途徑、安置的地點,飲食管理(一般實驗室會有動物房,也可以從其他地方購買),動物免疫證明、倫理證明需要提前準備好。實驗相關的試劑和藥物:比如造模藥物和器械,動物干預所需藥物,陽物選擇及購買(有些藥物購買很困難,必須通過特殊程序才能買到)。如果涉及到有創(chuàng)操作,要提前準備好物(建議提前購買),手術器械。需要了解自身實驗平臺能完成哪些技術。西藏乳鼠動物模型建模