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腹主動(dòng)脈縮窄致心衰大鼠模型一、服務(wù)信息1、動(dòng)物模型名稱:腹主動(dòng)脈縮窄致心衰大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雌性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:成年5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:180~220g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級二、服務(wù)項(xiàng)目服務(wù)編號服務(wù)內(nèi)容服務(wù)周期價(jià)錢DH2015腹主動(dòng)脈縮窄致心衰大鼠模型15周詢價(jià)1、實(shí)驗(yàn)方法:采用主動(dòng)脈縮窄法建立模型大鼠麻醉后,仰臥位固定、去腹毛、消毒,沿腹正中線切開皮膚及肌層,分離出腹主動(dòng)脈,在腎動(dòng)脈上方將腹主動(dòng)脈與鈍頭8號探針一起結(jié)扎后,小心抽出針頭。手術(shù)造模后大鼠正常飼養(yǎng)3個(gè)月。大鼠終末體重(BW),心室重(VW),計(jì)算心體比(VW/BW),并進(jìn)行心功能檢測,包括心率(HR)、左室收縮壓(LVSP)、左室舒張末壓(LVEDP)及左室最大壓力上升及下降速度(±dp/dtmax),并對心肌組織進(jìn)行病理學(xué)檢測.2、檢測標(biāo)準(zhǔn):模型組大鼠VW/BW明顯增加,LVSP明顯降低,LVEDP明顯升高,±dp/dtmax則**減小,與正常對照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。病理學(xué)檢測結(jié)果表明心肌出現(xiàn)典型心衰樣病理改變。三、交付標(biāo)準(zhǔn):1.提供動(dòng)物模型構(gòu)建過程中的原始實(shí)驗(yàn)記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動(dòng)物或相關(guān)組織材料。四、服務(wù)項(xiàng)目說明:1、如有特殊要求,請另詢價(jià)。通過阿霉素(Adriamycin,ADR)腹腔注射給藥(Adriamycin,ADR)試圖造成小鼠心衰。上海C57動(dòng)物模型飼養(yǎng)
e:不同光強(qiáng)下gm20541基因敲除小鼠的暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖b波統(tǒng)計(jì);scotopicamplitude:暗光測定峰值;flashintensity:閃光強(qiáng)度;a-wave:a波;b-wave:b波。圖6:光適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖(erg)檢測結(jié)果;圖中:a-b:不同光強(qiáng)下gm20541基因敲除小鼠的光適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖軌跡圖;c:20cd·s/m2光強(qiáng)下gm20541基因敲除小鼠的光適應(yīng)閃爍(flicker)視網(wǎng)膜電圖軌跡圖;d:不同光強(qiáng)下gm20541基因敲除小鼠的光適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖a波統(tǒng)計(jì);e:不同光強(qiáng)下gm20541基因敲除小鼠的光適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖b波統(tǒng)計(jì);f:20cd·s/m2光強(qiáng)下gm20541基因敲除小鼠的光適應(yīng)閃爍(flicker)視網(wǎng)膜電圖統(tǒng)計(jì)。sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖7:視網(wǎng)膜前體細(xì)胞特異敲除gm20541基因小鼠視網(wǎng)膜切片免疫組化染色結(jié)果;小鼠年齡:4個(gè)月;os:outer-segment(外節(jié));is:inner-segment(內(nèi)節(jié));onl:outernuclearlayer(外核層);inl:innernuclearlayer(內(nèi)核層);圖中:a:視網(wǎng)膜前體細(xì)胞特異敲除gm20541基因小鼠視網(wǎng)膜石蠟切片的h&e染色結(jié)果,外核層及內(nèi)核層均變??;b:對不同部位的gm20541敲除鼠視網(wǎng)膜外核層厚度統(tǒng)計(jì)。圖8:視網(wǎng)膜前體細(xì)胞特異敲除gm20541基因小鼠ihc染色結(jié)果。上海模式動(dòng)物模型上面是我們已構(gòu)建成功的動(dòng)物模型,我們還可以根據(jù)客戶實(shí)驗(yàn)方案構(gòu)建其它模型,具體要求請咨詢。
可在設(shè)定的壓差標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)無極調(diào)控,以保障系統(tǒng)對海拔(3000m~7000m)的微負(fù)壓進(jìn)行模擬。并且,進(jìn)排風(fēng)風(fēng)管裝有高效空氣過濾器,使進(jìn)入飼養(yǎng)倉2的氣體潔凈。實(shí)施例3在實(shí)施例1的基礎(chǔ)上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng),所述高原低氧環(huán)境模擬裝置包括惰性氣源,所述惰性氣源與進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)13連接,所述惰性氣源與進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)13之間設(shè)置有比例式氣閥,還包括設(shè)置在飼養(yǎng)倉2內(nèi)的嵌入式氧測定儀。本實(shí)施例的工作原理:惰性氣源可以是惰性氣體儲(chǔ)備罐或者是液態(tài)惰性氣體儲(chǔ)備罐。在模擬低氧環(huán)境時(shí),外接惰性氣體儲(chǔ)備罐連接進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)13。比例式氣閥和嵌入式氧測定儀均與功能控制面板19連接,通過功能控制面板19上的氧濃度表顯示濃度來調(diào)節(jié)比例式氣閥,通過加惰性氣體來來實(shí)現(xiàn)降低氧氣濃度。當(dāng)倉體內(nèi)的氧氣濃度較高時(shí),手動(dòng)打開惰性氣體儲(chǔ)備罐與進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)之間的氣閥,調(diào)節(jié)惰性氣體進(jìn)入量,使倉體內(nèi)氧氣濃度降低,觀察控制面板上的氧濃度顯示,調(diào)整氣閥開度大小,達(dá)到需求的氧濃度,以此調(diào)節(jié)實(shí)現(xiàn)高原缺氧環(huán)境的模擬。本技術(shù)方案采用的惰性氣體為對生命體無危害的惰性氣體。實(shí)施例4在實(shí)施例1的基礎(chǔ)上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng)。
指明方向。盡管現(xiàn)在基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組、蛋白質(zhì)組等組學(xué)已經(jīng)取得了非凡的突破,但人類對于組學(xué)的整體性和復(fù)雜性認(rèn)識還是很初級,也就比開始高明那么一點(diǎn)點(diǎn),對橫亙在組學(xué)和個(gè)體之間的裂隙毫無辦法——這也是目前生物研究被黑的重要原因之一:由于目前還不存在什么生物根本性原理,很多研究還是得靠盲人摸象式的實(shí)驗(yàn)、觀察和歸納。當(dāng)年山中伸彌找到誘導(dǎo)分化細(xì)胞核重編程(也就是IPSc技術(shù))的四個(gè)基因,可不是用理論算出來的,是大海撈針般地從成百上千個(gè)轉(zhuǎn)錄因子基因組合中篩選出來的。盡管以前的研究能有所幫助,但本質(zhì)還是差別不大,這也是為什么分子生物學(xué)科研常常被類比成民工搬磚。明白了這個(gè)背景,你大概就能理解小鼠的意義。既然我們對復(fù)雜系統(tǒng)的架構(gòu)原理毫無辦法,那我們不妨就建立一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)模型,自上而下地研究問題。誠然,動(dòng)物模型和人類差別巨大,小鼠、大鼠、兔、猴身上做的好好的實(shí)驗(yàn),放在人身上就不靈了(有時(shí)候,即使是針對某一個(gè)人群成功的實(shí)驗(yàn),換一個(gè)人群就不靈了,人類內(nèi)部的多樣性都不容小覷)。但是,同在哺乳動(dòng)物大家庭,大家的系統(tǒng)架構(gòu)應(yīng)該是差不多的,差別只在細(xì)節(jié),問題已經(jīng)從大海撈針變成了池塘撈針。為什么藥物會(huì)失效呢?如果是靶點(diǎn)有差異。通過截?cái)啻笫竺娌可窠?jīng)致面癱模型的建立。
根據(jù)gm20541的cdna序列設(shè)計(jì)引物:gm20541-cdna-f:5’-tcggtctcatcttcattccc-3;gm20541-cdna-r:5’-ggaaggctctgttccggtat-3;(g)以提取的cdna為模板,進(jìn)行rt-pcr。擴(kuò)增后進(jìn)行電泳。結(jié)果見圖4中b,可以看出,通過rt-pcr方法檢測gm20541在gm20541基因敲除純合子小鼠的視網(wǎng)膜中表達(dá)量降低。圖4的b中ctrl是指野生型對照,sixko是指gm20541基因敲除純合子小鼠;gm20541rnalevel是指rna表達(dá)水平相對變化,以野生型表達(dá)水平為1。實(shí)施例3對4月齡的gm20541基因敲除純合子小鼠進(jìn)行erg視力檢測:1暗適應(yīng)動(dòng)物應(yīng)整夜暗適應(yīng),環(huán)境應(yīng)做到?jīng)]有光線;2次日麻醉:稱重,腹腔內(nèi)注射;宜深度麻醉;3動(dòng)物固定及散瞳:麻醉完成后,在暗紅光照明下將小鼠用膠帶固定在動(dòng)物試驗(yàn)平臺的前方:需保證小鼠正"趴",即相對于閃光刺激器的刺激口,雙眼高度一致,充分暴露,滴加散瞳劑。4電極安裝:將視網(wǎng)膜電圖儀(espionvisualelectrophysiologysystem,diagnosysllc,littleton,ma,usa)預(yù)熱后,在耳夾電極涂上導(dǎo)電膏,夾尾巴,插入放大器“地”接口;雙頭的針電極插入后頸皮(大約在兩耳中間),同時(shí)接兩個(gè)通道的“負(fù)”接口;金環(huán)電極夾在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)平臺的電極支架上,仔細(xì)調(diào)整其角度。控制原發(fā)病,遏制其誘導(dǎo)的全身失控性炎癥反應(yīng),是預(yù)防和ALI/ARDS的必要措施。寧夏外包動(dòng)物模型建模
肺泡上皮細(xì)胞及內(nèi)皮損傷,造成彌漫性肺間質(zhì)及肺泡水腫,導(dǎo)致的急性低氧性呼吸功能不全。上海C57動(dòng)物模型飼養(yǎng)
brain:腦組織;liver:肝臟;retina:視網(wǎng)膜,intestine:腸;muscle:肌肉;heart:心臟;kidney:腎臟;spleen:脾;b:圖1中a的統(tǒng)計(jì)結(jié)果;c:westernblot檢測gm20541蛋白在不同組織的表達(dá);d:圖1中c的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。圖2:gm20541基因敲除小鼠的構(gòu)建路線;圖中sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖3:中長距離pcr鑒定子一代鼠的結(jié)果;圖中:a:擴(kuò)增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r,擴(kuò)增產(chǎn)物為;其中a2,3,6,9,10,b1為陽性;b:擴(kuò)增3’端長臂使用引物對neof和gm3’lrr,擴(kuò)增產(chǎn)物為。其中:a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽性雜合子,+/+為野生型對照。圖4:gm20541基因敲除小鼠的鑒定;a:gm20541基因敲除小鼠的基因型鑒定結(jié)果;b:實(shí)時(shí)定量pcr實(shí)驗(yàn)分析gm20541敲除小鼠視網(wǎng)膜中基因敲除效率,證明gm20541在敲除小鼠視網(wǎng)膜中不再表達(dá);sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖5:暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖(electroretinogram,erg)檢測結(jié)果;圖中:a-c:不同光強(qiáng)下gm20541基因敲除小鼠的暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖軌跡圖;d:不同光強(qiáng)下gm20541基因敲除小鼠的暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖a波統(tǒng)計(jì)。上海C57動(dòng)物模型飼養(yǎng)