Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的,與MEM培養(yǎng)基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍,同時(shí)還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。DMEM培養(yǎng)基**初設(shè)計(jì)葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來(lái)又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。HEPES是一種優(yōu)良的生物緩沖劑,對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性作用,添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長(zhǎng)時(shí)間保持恒定的PH范圍,可以有效的防止培養(yǎng)液PH波動(dòng)較大對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)產(chǎn)生不利的影響。可用于無(wú)CO2培養(yǎng)箱。酚紅在培養(yǎng)基中被用來(lái)作為PH值的指示劑,用以持續(xù)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時(shí)酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,而較高的PH值時(shí)使培養(yǎng)液呈紫色,PH值~,**適合細(xì)胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點(diǎn),研究表明酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的細(xì)胞時(shí)(如乳腺組織),比較好使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會(huì)干擾流式細(xì)胞分析時(shí)候的檢測(cè)。此外,一些無(wú)血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會(huì)干擾鈉-鉀平衡。 Dulbecco’s 改良培養(yǎng)基–DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle Medium)現(xiàn)已廣應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。貴州樣本細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)廠
RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國(guó)紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀(jì)念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)開發(fā)出來(lái)的,RPMI是該研究所開發(fā)的一類細(xì)胞培養(yǎng)基,1640是培養(yǎng)基代號(hào)。RPMI-1640是改進(jìn)型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基,采用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng),與大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基**初是為淋巴細(xì)胞培訓(xùn)專門設(shè)計(jì)的,現(xiàn)在已普遍應(yīng)用于各種正常細(xì)胞和惡性**的培養(yǎng),包括HeLa細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、PC12細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和惡性**,是采用極其普遍的培養(yǎng)基之一。RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比之下其他培養(yǎng)基之所以具與眾不同的功效,是因?yàn)槠渲懈缓€原劑谷胱甘肽和高濃度的維他命。RPMI1640培養(yǎng)基包含生物素、維他命B12以及PABA,這些成份是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對(duì)普遍的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,我們提供多種組分的RPMI1640改進(jìn)培養(yǎng)基。上海醫(yī)用細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)Ham’s F-12常作為無(wú)血清培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)液,在低血清含量下時(shí),特別適合單細(xì)胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng)。
DMEM,即 Dulbecco 改良的 Eagle 培養(yǎng)基,在細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域占據(jù)著極為重要的地位。它源于經(jīng)典的 Eagle 培養(yǎng)基,經(jīng)科學(xué)家 Dulbecco 改良優(yōu)化后,煥發(fā)出全新活力。DMEM 培養(yǎng)基成分豐富,氨基酸濃度是原始 Eagle 培養(yǎng)基的兩倍,還涵蓋了非必需氨基酸,為細(xì)胞蛋白質(zhì)合成筑牢根基。其維生素含量亦是 Eagle 培養(yǎng)基的四倍之多,積極參與細(xì)胞內(nèi)各類代謝反應(yīng),助力細(xì)胞維持正常生理功能。同時(shí),培養(yǎng)基中包含酸,這一糖酵解途徑的關(guān)鍵物質(zhì),在細(xì)胞能量供應(yīng)方面發(fā)揮著重要作用,時(shí)刻為細(xì)胞的生命活動(dòng)提供動(dòng)力支持。
培養(yǎng)液的滲透壓是一個(gè)非常重要的因素,細(xì)胞通??赡褪?60mOsm/kg~320mOsm/kg。標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動(dòng)。特別注意:向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會(huì)明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓,特別是溶于強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中的物質(zhì)。向培養(yǎng)液中添加HEPES時(shí)需按以下方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度。緩沖系統(tǒng)大多數(shù)細(xì)胞所需pH在-。但是,細(xì)胞培養(yǎng)適pH值隨培養(yǎng)的細(xì)胞種類不同而不同。成纖維細(xì)胞喜歡較高pH(-),而傳代轉(zhuǎn)化細(xì)胞系則需要偏酸pH(-)。由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉(NaHCO3)與CO2體系進(jìn)行緩沖,因此,氣相中的CO2濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設(shè)定在5%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為;如果CO2濃度維持在10%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為。細(xì)胞培養(yǎng)瓶蓋不應(yīng)擰得太緊,以保證氣體交換。HEPES是一種非離子緩沖液,在pH-范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,但是非常昂貴,在高濃度時(shí)對(duì)一些細(xì)胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉()共用,以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。在這種培養(yǎng)條件下,細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊,以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑,酸性培養(yǎng)液呈橙黃色,堿性培養(yǎng)液呈深紅色。DMEM/F12:經(jīng)典雙培養(yǎng)基配方,為各類細(xì)胞提供均衡營(yíng)養(yǎng)與穩(wěn)定生長(zhǎng)環(huán)境。
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(animalcellculture)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞(使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶)然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。細(xì)胞培養(yǎng)基的種類有哪些?按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。DMEM(Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium)是由Dulbecco在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良獲得的,各成分份量加倍,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)兩種類型。細(xì)胞生長(zhǎng)快。附著稍差的腫瘤細(xì)胞、克隆培養(yǎng)用高糖效果較好,常用于雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)。2.神經(jīng)元基礎(chǔ)培養(yǎng)基可為神經(jīng)元生長(zhǎng)提供基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。IPL-41昆蟲培養(yǎng)基(IPL-41InsectMedium)旨在用于大規(guī)模擴(kuò)增草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda)細(xì)胞系,也常用于通過(guò)桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)(BEVS)進(jìn)行蛋白表達(dá)。IPL-41培養(yǎng)基是對(duì)原始IPL配方的改良,由美國(guó)農(nóng)業(yè)部昆蟲病理實(shí)驗(yàn)室Weiss等人開發(fā),用于大規(guī)模擴(kuò)增草地貪夜蛾衍生細(xì)胞系。Weiss向基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入了胎牛血清和TPB培養(yǎng)基(TryptosePhosphateBroth),成功地實(shí)現(xiàn)了IPL-21AE。Fischer’s培養(yǎng)基不含蛋白質(zhì)、脂類或任何生長(zhǎng)因子,故此產(chǎn)品需搭配血清或無(wú)血清添加物使用。四川細(xì)胞培養(yǎng)基源頭直供
Ham’s F-12營(yíng)養(yǎng)混合物(Ham’s F-12 Nutrient Mixture)初用于CHO細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)。貴州樣本細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)廠
MEMα是一種改良的MEM培養(yǎng)基,與MEM培養(yǎng)基相比MEMα培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)更為豐富,在MEM的基礎(chǔ)上又添加了NEAA、**酸鈉、硫酸鋅、VB12、生物素、抗壞血酸等成分,廣泛應(yīng)用于各種哺乳動(dòng)物懸浮和貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。不含核苷和脫氧核苷的MEMα培養(yǎng)基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細(xì)胞的篩選培養(yǎng)基。酚紅在培養(yǎng)基中被用來(lái)作為PH值的指示劑,用以持續(xù)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時(shí)酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,而較高的PH值時(shí)使培養(yǎng)液呈紫色,PH值~,**適合細(xì)胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點(diǎn),研究表明酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的細(xì)胞時(shí)(如乳腺組織),比較好使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會(huì)干擾流式細(xì)胞分析時(shí)候的檢測(cè)。此外,一些無(wú)血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會(huì)干擾鈉-鉀平衡。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,是體外培養(yǎng)中為預(yù)防微生物污染**常用的***,其中,青霉素能夠干擾細(xì)菌細(xì)胞壁的合成,對(duì)革蘭陽(yáng)性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細(xì)菌核糖體30S亞單位結(jié)合,抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成,對(duì)革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌均有效,但對(duì)革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預(yù)防絕大部分的細(xì)菌污染。 貴州樣本細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)廠
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