精子檢測(cè)是通過(guò)一系列檢測(cè)方法來(lái)評(píng)估男性生育能力的指標(biāo)之一。而檢測(cè)方法的選擇直接影響到檢測(cè)的準(zhǔn)確性和結(jié)果的可靠性。目前,常用的檢測(cè)方法有手動(dòng)計(jì)數(shù)法、顯微鏡計(jì)數(shù)法、電子顯微鏡計(jì)數(shù)法、精子運(yùn)動(dòng)軌跡分析法等。手動(dòng)計(jì)數(shù)法是通過(guò)顯微鏡手動(dòng)計(jì)算精液中精子數(shù)量的方法,該方法簡(jiǎn)單易行,但因操作者技能不同,容易出現(xiàn)誤差。顯微鏡計(jì)數(shù)法是通過(guò)顯微鏡觀察精液中精子數(shù)量的方法,該方法比手動(dòng)計(jì)數(shù)法更加準(zhǔn)確,但需要專業(yè)的技能和經(jīng)驗(yàn)。電子顯微鏡計(jì)數(shù)法是通過(guò)電子顯微鏡觀察精液中精子數(shù)量的方法,該方法非常準(zhǔn)確,但需要昂貴的設(shè)備。精子運(yùn)動(dòng)軌跡分析法是通過(guò)計(jì)算機(jī)分析精子運(yùn)動(dòng)軌跡來(lái)判斷精子活力和數(shù)量的方法,該方法不僅準(zhǔn)確性,而且可以直觀地顯示精子的運(yùn)動(dòng)狀態(tài),但需要較為復(fù)雜的技術(shù)。除了以上常見(jiàn)的檢測(cè)方法,還有一些新興的檢測(cè)方法,如流式細(xì)胞術(shù)、全自動(dòng)分析系統(tǒng)等。這些檢測(cè)方法雖然在檢測(cè)精子數(shù)量、活力等方面具有一定優(yōu)勢(shì),但由于技術(shù)上的限制和設(shè)備的昂貴,目前還沒(méi)有得到廣泛應(yīng)用。在選擇檢測(cè)方法時(shí),需要考慮檢測(cè)的目的、檢測(cè)的準(zhǔn)確性和結(jié)果的可靠性等因素。同時(shí),需要選擇正規(guī)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè),避免因設(shè)備不足或技術(shù)不過(guò)關(guān)等因素導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)誤差。全自動(dòng)精子分析儀在臨床Z療中展現(xiàn)了明顯的優(yōu)勢(shì)。北京密度精子分析頻閃光源
CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學(xué)評(píng)估。CASA系統(tǒng)可用來(lái)定量分析精子頭部形態(tài)學(xué)、中段甚至主段的形態(tài),可以把精子頭部和中段分類為正?;蛘卟徽#€可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和中位數(shù),以及對(duì)染色的精子頂體區(qū)進(jìn)行測(cè)量[3]。與人工操作相比,自動(dòng)化系統(tǒng)更具客觀性,精確度和重復(fù)性的潛力[4]。精確度和重復(fù)性不低于7%[5],這優(yōu)于有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員的手工評(píng)估。兩個(gè)研究已經(jīng)提示在CASA結(jié)果與生育力之間存在***聯(lián)系。Coetzee等發(fā)現(xiàn)自動(dòng)分析的正常精子形態(tài)的結(jié)果是預(yù)示體外受精率和妊娠率的有意義指標(biāo)[6]。Garrett等發(fā)現(xiàn)**中能與透明帶結(jié)合的、具有某些頭部形態(tài)特征的精子所占的百分比(Z%),和直線速度(VSL)的精子的百分比,與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關(guān)系。Z%和VSL與生育力間的關(guān)系顯示是連續(xù)的,而且沒(méi)有顯示臨界值;高于臨界值,妊娠率也不會(huì)進(jìn)一步增加[7]。北京瀕危物種精子分析VCLHamilton Thorne自動(dòng)精子分析儀具有高精度、高效率和自動(dòng)化的優(yōu)點(diǎn)。
精子分析儀使用注意事項(xiàng)1.樣品制備是CASA取得高質(zhì)量檢查結(jié)果的關(guān)鍵。CASA采用深度為10um樣品池,能保證精子在單層界面內(nèi)自由運(yùn)動(dòng)。取樣分析前標(biāo)本必須充分混勻,用微量取液器取5~7ul**加入樣品池中,用0.5mm厚皿蓋片蓋緊。2.不潔凈的計(jì)數(shù)池可影響精子的活力,尤其影響灰度CASA精子計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。3.精子樣品密度過(guò)大時(shí),造成圖像處理上的粘連,無(wú)法分析每個(gè)精子的運(yùn)動(dòng)特性。**中所含精子太少時(shí),需增加檢查視野數(shù)量或者使用低倍物鏡觀察,以提高樣品檢出率。
醫(yī)生為了鑒定男性生育能力,常囑男方作精液檢查,正常精液顏色為灰白色或乳白色。如節(jié)欲時(shí)間長(zhǎng)者,可呈淡黃色,若出現(xiàn)鮮紅色.暗紅色,則提示患者有炎癥或生殖道損傷。每次排精量為2~6毫升,常受排精次數(shù)與頻率的影響。新鮮精液呈稠厚膠凍狀,1小時(shí)之內(nèi)應(yīng)液化為稀薄的液體,用一根小玻璃棒插入精液中再提起,所形成的精液絲長(zhǎng)度一般不超過(guò)2厘米,否則視為異常。精液呈弱堿性,PH值為7.2~7.8。正常精子數(shù)應(yīng)超過(guò)2000萬(wàn)/毫升。排精后1小時(shí)內(nèi)活動(dòng)精>=50%。世界衛(wèi)生組織推薦精子活動(dòng)力分為四級(jí):0級(jí):不活動(dòng);1級(jí):精子原地?cái)[動(dòng);2級(jí):有中等的前向運(yùn)動(dòng);3級(jí):前向運(yùn)動(dòng)活躍,快速直線運(yùn)動(dòng)。正常的精子活動(dòng)力為2~3級(jí)的精子>=40%~50%.精子形態(tài):畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能單從精液的一項(xiàng)指標(biāo)定論,應(yīng)對(duì)精子數(shù)量活力活動(dòng)率液化時(shí)間畸形率等多方面進(jìn)行綜合能力分析。采集精液前5~7天內(nèi)必須停止性生活,并且不得有**、夢(mèng)遺等情況,還應(yīng)禁煙戒酒,忌服對(duì)生精功能有影響的藥物等。Hamilton Thorne精子分析儀具有高度的可靠性和穩(wěn)定性,能夠長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定運(yùn)行,保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。
在精子形態(tài)學(xué)檢查中,通過(guò)CASA系統(tǒng)對(duì)精子形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行分析,有些特征(細(xì)胞大小、形狀、光學(xué)密度、尾的存在以及其它)可由操作者選擇,這樣就會(huì)引起同一標(biāo)本在不同實(shí)驗(yàn)室或不同分析者測(cè)得的結(jié)果一致性較差[10]。4結(jié)論和展望計(jì)算機(jī)輔助**分析具有較好的可靠性、重復(fù)性和穩(wěn)定性,與傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡目測(cè)估計(jì)相比,更具有快速方便、對(duì)比性強(qiáng)、便于交流等明顯優(yōu)點(diǎn)[11],常規(guī)**檢查無(wú)法測(cè)定精子微細(xì)運(yùn)動(dòng)特點(diǎn),顯示CASA在男性不育癥診斷篩選中的優(yōu)越性。王益鑫亦發(fā)現(xiàn),部分手工**檢查正常的不育患者,進(jìn)行**全自動(dòng)分析及生化檢測(cè),均發(fā)現(xiàn)明顯異常[12]。因此,CASA系統(tǒng)在男性生殖能力檢驗(yàn)方面具有重要的實(shí)際應(yīng)用意義。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),鞭打頻率(BCF)?:精子曲線路徑跨越其平均路徑的平均頻率。北京水生動(dòng)物精子分析
精子分析儀與人工方法相比具有客觀,高效,高精度的優(yōu)點(diǎn)。北京密度精子分析頻閃光源
CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點(diǎn):3.2**分析儀閾值的確定(1)精子灰度、對(duì)比度閾值:由于分析儀是根據(jù)灰度的高低來(lái)判斷精子的真?zhèn)危瑢?duì)亮度和對(duì)比度要求特別高,檢測(cè)時(shí)應(yīng)多次試用,尋找能準(zhǔn)確識(shí)別精子的比較好灰度閾值[8]。(2)碎片:測(cè)定精子濃度準(zhǔn)確性受**中細(xì)胞成份和非精子的顆粒物質(zhì)的干擾,測(cè)定活動(dòng)精子的百分率也受精子中非精子物質(zhì)的影響[9],這些也是需要注意的。對(duì)于系統(tǒng)誤認(rèn)為精子的非精子成分,如精原細(xì)胞、白細(xì)胞和非白細(xì)胞顆粒等,可人為準(zhǔn)確記數(shù)后在可刪除雜質(zhì)一欄將其舍去。3.3出現(xiàn)1次異常結(jié)果應(yīng)間隔復(fù)查反復(fù)檢查2?3次方能得出比較正確的結(jié)果。3.4對(duì)于無(wú)精子的患者應(yīng)仔細(xì)進(jìn)行視野檢查注意不要將雜質(zhì)誤認(rèn)為精子計(jì)數(shù)在內(nèi),應(yīng)將**3000ɡ離心15分鐘后,再涂片檢查,確認(rèn)無(wú)精后再出報(bào)告。北京密度精子分析頻閃光源