定量測定是醫(yī)學發(fā)展的重要保證。WHO1980年出版了男科實驗室手冊***版及以后版本[1]?對有關(guān)男科的實驗進行了詳細的闡述。對計算機輔助精子分析進行質(zhì)量管理包括:計算機本身的軟硬件、CASA分析結(jié)果、工作人員的具體操作幾方面。CASA參數(shù)包括精子數(shù)量和各種活動力變量?其質(zhì)量包括所測得數(shù)據(jù)的可靠性、精確度、如何避免差錯和數(shù)據(jù)的正確性及確認?以及分析中的標準[2]。CASA質(zhì)量管理關(guān)系到男科實驗室中**分析的質(zhì)量?具有以下特點:⑴在實驗室內(nèi)部質(zhì)量和醫(yī)生處置質(zhì)量方面?優(yōu)于其它測定精子運動的方法;⑵CASA結(jié)果及結(jié)果質(zhì)量的評估較困難;⑶WHO標準是醫(yī)生處置質(zhì)量保證的基礎(chǔ);⑷今后應(yīng)加強操作人員的培訓。所有操作人員都應(yīng)接受規(guī)范的CASA分析儀使用培訓,嚴格按照使用指南進行操作?。上海Hamilton Thorne精子分析W.H.O 4
CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學評估。CASA系統(tǒng)可用來定量分析精子頭部形態(tài)學、中段甚至主段的形態(tài),可以把精子頭部和中段分類為正?;蛘卟徽#€可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數(shù)、標準差和中位數(shù),以及對染色的精子頂體區(qū)進行測量[3]。與人工操作相比,自動化系統(tǒng)更具客觀性,精確度和重復(fù)性的潛力[4]。精確度和重復(fù)性不低于7%[5],這優(yōu)于有經(jīng)驗的技術(shù)人員的手工評估。兩個研究已經(jīng)提示在CASA結(jié)果與生育力之間存在***聯(lián)系。Coetzee等發(fā)現(xiàn)自動分析的正常精子形態(tài)的結(jié)果是預(yù)示體外受精率和妊娠率的有意義指標[6]。Garrett等發(fā)現(xiàn)**中能與透明帶結(jié)合的、具有某些頭部形態(tài)特征的精子所占的百分比(Z%),和直線速度(VSL)的精子的百分比,與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關(guān)系。Z%和VSL與生育力間的關(guān)系顯示是連續(xù)的,而且沒有顯示臨界值;高于臨界值,妊娠率也不會進一步增加[7]。上海CASA精子分析DCL該設(shè)備的設(shè)計緊湊,占用空間小,適合不同規(guī)模的實驗室使用。
精液顯微鏡檢查精子計數(shù):正常人精子計數(shù)為0.6×1012~1.5×0.012/L,相當于一次排出的精子總數(shù)為400×106~600×106。當精子計數(shù)值<20×106/ml或一次排精總數(shù)<100×106為精子減少,超過致孕極限而導(dǎo)致不育。精液直接涂片或離心沉淀后均未查到精子為無精癥。見于先天性睪丸發(fā)育不全、畸形或后天睪丸損傷和萎縮(如睪丸結(jié)核、炎癥、淋病、垂體或腎上腺功能異常的內(nèi)分泌性疾病等)、輸精管阻塞或是先天性輸精管及精囊缺陷,是導(dǎo)致少精或無精的重要原因,也是導(dǎo)致不育的重要原因。檢查有無精子也是檢查輸精管結(jié)扎術(shù)的效果觀察。結(jié)扎六周后,連續(xù)檢查無精子,說明手術(shù)成功,如果結(jié)扎兩個月后,精液中仍有精子,說明手術(shù)不成功。
前沿性檢查:目前不作為生育力低下男性初步評估的常規(guī)方法。這一部分包括了非常專業(yè)化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測技術(shù)。有研究認為,氧化應(yīng)激可能是影響人類精子功能和妊娠結(jié)局的重要因素;新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質(zhì)組裝與生育力的關(guān)系。前沿性檢查一節(jié)中詳細介紹了精子氧化應(yīng)激和活性氧實驗、精子染色質(zhì)檢測(苯胺藍和色霉素A3染色)的具體實驗操作及討論。手冊重寫了計算機輔助精子分析(CASA)部分,強調(diào)了CASA對于檢測精子濃度的局限性與質(zhì)控要求,增加了CASA檢測精子超活化運動的內(nèi)容。對精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運的功能分析,可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此,手冊新增了檢測精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運的內(nèi)容。CASA系統(tǒng)可以給出多種精子運動狀態(tài)的參數(shù),這些參數(shù)能夠幫助更有效地了解精子的運動特性。
男科實驗室中通常所指的質(zhì)量包含三個方面:實驗室內(nèi)部質(zhì)量、醫(yī)生處置的質(zhì)量以及結(jié)果的質(zhì)量[3]。1.實驗室內(nèi)部質(zhì)量與**分析有關(guān)的實驗室內(nèi)部質(zhì)量主要是工作人員的素質(zhì)和所采用儀器的質(zhì)量。工作人員應(yīng)經(jīng)過特殊的培訓?儀器必須處于正常狀態(tài)、確保準確的結(jié)果?操作應(yīng)符合規(guī)程[4]。CASA系統(tǒng)本身的質(zhì)量難于評定。硬件?如顯微鏡、影像攝影機和計算機經(jīng)檢查便可確定其可靠性。但軟件并非如此?軟件中存在不確定的因素?算法是軟件中**重要的部分?通常制造者保守這些秘密;因此?有關(guān)軟件的數(shù)學上、信息性的、統(tǒng)計學的或生物測量方面的檢查實驗室難于進行。精子分析儀參數(shù),平均路徑速率(VAP)?:精子頭沿其平均路徑移動時的時均速率。香港水生動物精子分析DSL
通過計算機圖像處理功能對顯微鏡下放大的精子圖像進行識別和跟蹤計算,從而得出精子動靜態(tài)各項參數(shù)。上海Hamilton Thorne精子分析W.H.O 4
精子分析儀是計算機技術(shù)和圖像處理技術(shù)結(jié)合的**分析儀器設(shè)備,通過顯微鏡下攝像和計算機快速分析多個視野內(nèi)精子的運行軌跡,客觀記錄了精子的密度、活動力、活動率和存活率等各項參數(shù)。計算機輔助**分析儀由硬件系統(tǒng)和軟件系統(tǒng)組成。硬件系統(tǒng)主要由顯微攝像系統(tǒng)、圖像采集系統(tǒng)、恒溫系統(tǒng)、計算機處理系統(tǒng)等四大系統(tǒng)構(gòu)成。此外,儀器一般配有**樣品盒,以確保單層取樣[1]。1.顯微攝像系統(tǒng):由顯微鏡及CCD組成??梢詫吮拘盘柾ㄟ^顯微放大由CCD傳輸?shù)接嬎銠C2.圖像采集系統(tǒng):由圖像卡構(gòu)成,其功能是對CCD信號進行抓拍、識別、預(yù)處理后,將成熟信號輸送到計算機。3.恒溫系統(tǒng):由加溫和保溫設(shè)備組成。加溫是通過熱吹風機不斷將適宜的溫度熱風鼓入封閉保溫罩內(nèi),提供穩(wěn)定、可靠的檢查環(huán)境。4.計算機系統(tǒng):對圖像信號進行***系統(tǒng)的加工處理,對獲得的數(shù)據(jù)進行輸出和存儲的設(shè)備。軟件系統(tǒng)采用**的精子質(zhì)量分析軟件,利用現(xiàn)代化的計算機識別技術(shù)和圖像處理技術(shù),對精子的動靜態(tài)特征進行***的量化分析,對精子的密度、活力、活率、運動軌跡等特征進行量的檢測分析上海Hamilton Thorne精子分析W.H.O 4