在胚胎選擇領(lǐng)域,傳統(tǒng)方法主要依賴于形態(tài)學(xué)評(píng)分,通過(guò)觀察胚胎碎片數(shù)量、胞質(zhì)均勻性、細(xì)胞形狀規(guī)則性及對(duì)稱性等因素,在有限的幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行篩選,這無(wú)疑限制了選擇的全面性和準(zhǔn)確性。面對(duì)外觀相似的胚胎,盡管我們察覺(jué)到細(xì)微差異,卻往往陷入選擇的困境,難以確定哪個(gè)更適合移植,哪個(gè)應(yīng)被淘汰,這種無(wú)奈常常讓人感到惋惜。然而,隨著時(shí)差培養(yǎng)系統(tǒng)的出現(xiàn),胚胎選擇迎來(lái)了新的曙光。該系統(tǒng)能夠捕捉胚胎在卵裂過(guò)程中的細(xì)微變化,幫助我們分辨哪些變化對(duì)胚胎發(fā)育不利,哪些變化則是有益的。通過(guò)結(jié)合形態(tài)學(xué)與發(fā)育動(dòng)力學(xué)的雙重評(píng)估,我們能夠更加精細(xì)地挑選出具有更高發(fā)育潛能的胚胎。這樣的選擇策略不僅提高了移植后的妊娠成功率,還明顯降低了流產(chǎn)幾率,為胚胎移植帶來(lái)了更加可靠和科學(xué)的依據(jù)。正確擺放樣本在時(shí)差培養(yǎng)箱中至關(guān)重要。歐洲MIRI TL時(shí)差培養(yǎng)箱溫度無(wú)打擾驗(yàn)證
二氧化碳濃度過(guò)高或過(guò)低故障原因:二氧化碳?xì)怏w供應(yīng)系統(tǒng)故障,如氣瓶壓力不足、氣體管路泄漏、流量計(jì)故障;或者是二氧化碳傳感器故障,導(dǎo)致濃度控制不準(zhǔn)確。排除方法:檢查二氧化碳?xì)馄康膲毫Γ鼡Q氣瓶或補(bǔ)充氣體;檢查氣體管路是否有泄漏,修復(fù)或更換泄漏的管路部件;校準(zhǔn)流量計(jì),確保二氧化碳?xì)怏w流量的準(zhǔn)確控制;更換二氧化碳傳感器,重新校準(zhǔn)濃度控制系統(tǒng)。氧氣濃度異常故障原因:氧氣供應(yīng)系統(tǒng)故障(如果培養(yǎng)箱具備氧氣控制功能),如氧氣瓶壓力不足、氧氣管路堵塞、氧氣傳感器故障;或者是培養(yǎng)箱內(nèi)的細(xì)胞代謝活動(dòng)異常,導(dǎo)致氧氣消耗或產(chǎn)生變化。排除方法:檢查氧氣瓶的壓力和氧氣管路的通暢情況,處理相應(yīng)的故障;校準(zhǔn)氧氣傳感器,確保氧氣濃度的準(zhǔn)確監(jiān)測(cè);如果是細(xì)胞代謝問(wèn)題,需要進(jìn)一步分析細(xì)胞培養(yǎng)條件和狀態(tài),調(diào)整培養(yǎng)參數(shù),如細(xì)胞密度、培養(yǎng)液成分等,以維持合適的氧氣濃度環(huán)境。北京預(yù)混合氣體時(shí)差培養(yǎng)箱無(wú)打擾監(jiān)控時(shí)差培養(yǎng)箱的自動(dòng)化功能減輕了研究人員的負(fù)擔(dān)。
定期更換氣體過(guò)濾器,以保證進(jìn)入培養(yǎng)箱內(nèi)的氣體純凈,防止對(duì)細(xì)胞造成污染。對(duì)于使用氧氣傳感器的培養(yǎng)箱,還應(yīng)定期校準(zhǔn)氧氣傳感器,確保氧氣濃度的準(zhǔn)確操控。傳動(dòng)系統(tǒng)檢查時(shí)差培養(yǎng)箱中的傳動(dòng)系統(tǒng)(如載物臺(tái)移動(dòng)裝置、自動(dòng)聚焦裝置等)需要定期檢查和維護(hù),以確保其正常運(yùn)行。檢查傳動(dòng)部件的潤(rùn)滑情況,添加適量的潤(rùn)滑油,減少磨損和噪音。同時(shí),檢查傳動(dòng)皮帶或鏈條的張緊度,如有松弛,應(yīng)及時(shí)調(diào)整。定期測(cè)試傳動(dòng)系統(tǒng)的精度和穩(wěn)定性,確保在長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)行過(guò)程中能夠準(zhǔn)確地移動(dòng)載物臺(tái)和聚焦細(xì)胞,保證圖像采集的準(zhǔn)確性。
time-lapse培養(yǎng)箱憑借其對(duì)胚胎發(fā)育動(dòng)力學(xué)的精細(xì)監(jiān)測(cè),能夠多面審視胚胎的發(fā)育歷程。從原核的初現(xiàn)與消逝,到細(xì)胞分裂所需的時(shí)間,再到細(xì)胞分離的過(guò)程及分裂的標(biāo)準(zhǔn)性,無(wú)一不被它細(xì)致捕捉。在此基礎(chǔ)上,它篩選出那些發(fā)育潛力出眾的胚胎,將其移植回母體,以期實(shí)現(xiàn)妊娠與活產(chǎn)。在篩選過(guò)程中,time-lapse培養(yǎng)箱首先會(huì)淘汰多精受精的胚胎,這些胚胎因染色體數(shù)目異常而無(wú)法發(fā)育成胎兒。接著,它會(huì)關(guān)注受精卵的分裂時(shí)間,通常認(rèn)為在受精后25-27小時(shí)內(nèi)發(fā)生卵裂的胚胎更具發(fā)育潛能。此外,胚胎每次分裂的耗時(shí)也是評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)之一,例如2細(xì)胞胚胎中一個(gè)細(xì)胞開(kāi)始分裂至形成3細(xì)胞所需的時(shí)間,若能在10-13分鐘內(nèi)完成,則被視為發(fā)育潛力更佳。同時(shí),細(xì)胞間連接的緊密程度以及2細(xì)胞和4細(xì)胞胚胎的多核現(xiàn)象也是選擇胚胎的重要參考,細(xì)胞間接觸多的胚胎更易融合形成囊胚,而多核現(xiàn)象則可能預(yù)示著非整倍體的危機(jī)增加。它能記錄細(xì)胞在不同時(shí)差條件下的形態(tài)改變。
現(xiàn)代時(shí)差培養(yǎng)箱不僅自身技術(shù)不斷完善,還與其他先進(jìn)技術(shù)實(shí)現(xiàn)了融合發(fā)展。例如,與基因編輯技術(shù)相結(jié)合,研究人員可以在觀察細(xì)胞動(dòng)態(tài)變化的同時(shí),對(duì)細(xì)胞的基因進(jìn)行精確編輯,研究特定基因?qū)?xì)胞行為的影響。與單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)的融合,使得在細(xì)胞水平上對(duì)基因表達(dá)進(jìn)行實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)成為可能,進(jìn)一步揭示了細(xì)胞異質(zhì)性和細(xì)胞命運(yùn)決定的分子機(jī)制。此外,時(shí)差培養(yǎng)箱還與微流控技術(shù)、生物傳感器技術(shù)等相結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了對(duì)細(xì)胞微環(huán)境的更精確控制和對(duì)細(xì)胞生理參數(shù)的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè),為細(xì)胞研究提供了更多面、深入的信息。精確的溫度調(diào)節(jié)是時(shí)差培養(yǎng)箱的關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)之一。美國(guó)PH實(shí)時(shí)監(jiān)控時(shí)差培養(yǎng)箱氣體快速恢復(fù)
不斷改進(jìn)的時(shí)差培養(yǎng)箱技術(shù)滿足了更高的科研要求。歐洲MIRI TL時(shí)差培養(yǎng)箱溫度無(wú)打擾驗(yàn)證
更換易損件根據(jù)設(shè)備的使用頻率和廠家建議,定期更換時(shí)差培養(yǎng)箱的易損件,如密封圈、燈泡、過(guò)濾器等。密封圈的老化可能導(dǎo)致培養(yǎng)箱的密封性下降,影響溫濕度的控制和氣體的泄漏;燈泡的壽命有限,及時(shí)更換可以保證充足的照明和圖像質(zhì)量;過(guò)濾器的堵塞會(huì)影響氣體和空氣的流通,增加污染的風(fēng)險(xiǎn)。定期更換這些易損件,可以有效預(yù)防設(shè)備故障的發(fā)生,延長(zhǎng)設(shè)備的使用壽命。整機(jī)維護(hù)除了日常的維護(hù)和部件檢查外,每隔一段時(shí)間(一般每年一次)應(yīng)對(duì)時(shí)差培養(yǎng)箱進(jìn)行多面的整機(jī)維護(hù)。由專業(yè)的技術(shù)人員對(duì)設(shè)備進(jìn)行拆解,清潔內(nèi)部的各個(gè)部件,檢查電路連接是否松動(dòng),電機(jī)、風(fēng)扇等運(yùn)轉(zhuǎn)是否正常。對(duì)設(shè)備的各項(xiàng)性能指標(biāo)進(jìn)行多面檢測(cè)和調(diào)試,如溫度均勻性、濕度穩(wěn)定性、圖像清晰度等,確保設(shè)備在比較好狀態(tài)下運(yùn)行。歐洲MIRI TL時(shí)差培養(yǎng)箱溫度無(wú)打擾驗(yàn)證