北京紡錘體觀測儀

紡錘體觀測儀在補(bǔ)救ICSI中的應(yīng)用我們知道，成熟的卵母細(xì)胞含有1個極體，也就是***極體。IVF加入精子后，精子會穿透層層障礙**終進(jìn)入卵子，隨著時間的推移，～6小時后卵子的紡錘體會將染色單體拉向兩極，進(jìn)而排出第二極體，再往后大約加精后9～16小時，雌雄原核會出現(xiàn)，而原核的出現(xiàn)才是受精的標(biāo)志。但是對于那些沒有受精的卵子，到了原核出現(xiàn)的時間窗發(fā)現(xiàn)沒有受精時再去補(bǔ)救ICSI，往往錯過了卵子的比較好受精時間，因?yàn)闆]有受精的卵子會在體外老化，即使受精，胚胎的發(fā)育潛能也很低。所以，我們在加精后的4～6小時，通過觀察第二極體的排出來初步判斷是否受精，**的增加了那些受精障礙患者的受精率，也避免了卵子的老化。當(dāng)然，偶爾也會出現(xiàn)錯誤補(bǔ)救。文獻(xiàn)報道對IVF受精后的未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救，實(shí)驗(yàn)組用紡錘體觀測儀觀察并統(tǒng)計紡錘體的數(shù)目，82.7%含有一個紡錘體，17.3%含有兩個紡錘體，并對含有一個紡錘體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI；而對照組并未用紡錘體觀測儀觀察紡錘體，只對未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI。結(jié)果發(fā)現(xiàn)使用紡錘體觀測儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率，降低多原核受精比率。紡錘體的異?？赡軐?dǎo)致細(xì)胞分裂過程中的停滯或凋亡。北京紡錘體觀測儀

    紡錘體在有絲分裂中發(fā)揮著至關(guān)重要的導(dǎo)航作用，其主要功能包括：排列與分裂染色體：紡錘體的完整性決定了染色體分裂的正確性。在細(xì)胞分裂中期，染色體在紡錘絲的牽引下，自動在赤道板排列整齊。當(dāng)細(xì)胞進(jìn)入分裂后期，紡錘體微管收縮，將染色體牽引至兩極，形成兩組數(shù)目相等的姐妹染色單體。這一過程確保了遺傳信息的準(zhǔn)確傳遞，避免了染色體分離錯誤導(dǎo)致的遺傳異常。決定胞質(zhì)分裂的分裂面：在染色體分裂的同時，紡錘體中的一部分微管不隨染色體分裂到兩極，而是停弛在紡錘體中間形成紡錘中心體。紡錘中心體的中心區(qū)域?yàn)閮山M極性相反的微管交疊區(qū)，稱為紡錘中心區(qū)，它決定了接下來的胞質(zhì)分裂面。胞質(zhì)分裂開始于分裂后期的較晚期，一般結(jié)束于分裂末期后1-2小時，此期間兩個子細(xì)胞由中心顆粒體連接。紡錘體通過精確控制胞質(zhì)分裂面的位置，確保了細(xì)胞分裂的對稱性和穩(wěn)定性。 上?？寺〖忓N體透明帶紡錘體的微管具有極性，一端為正端，另一端為負(fù)端。

紡錘體的完整性決定了染色體分裂的正確性。在有絲分裂前期，中心體被復(fù)制形成兩個中心體，并逐漸分離，形成兩個紡錘體。紡錘體的微管從中心體發(fā)出，與染色體上的著絲粒（kinetochore）結(jié)合。著絲粒是一組復(fù)雜的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，可以與微管的末端結(jié)合。當(dāng)纖維束的微管末端與著絲粒結(jié)合時，纖維束開始縮短，將染色體拉向兩端，實(shí)現(xiàn)染色體的精確分離。這一過程不僅確保了每個新細(xì)胞都能獲得正確數(shù)量的染色體，還保證了遺傳信息的穩(wěn)定傳遞。

為了減少冷凍過程中紡錘體的損傷，研究者們嘗試在冷凍液及解凍液中添加細(xì)胞骨架保護(hù)劑，如紫杉醇（Taxol）。紫杉醇能夠穩(wěn)定微管結(jié)構(gòu)，防止其在低溫下解聚。通過偏光成像技術(shù)，研究者可以實(shí)時監(jiān)測紫杉醇對紡錘體的保護(hù)效果，評估其在冷凍保存過程中的作用機(jī)制。此外，還可以進(jìn)一步觀察解凍后卵母細(xì)胞的發(fā)育潛能，為臨床應(yīng)用提供可靠依據(jù)。無需對細(xì)胞進(jìn)行固定和染色，保持細(xì)胞的活性與完整性。能夠?qū)崟r監(jiān)測紡錘體的形態(tài)變化，評估冷凍效果。能夠捕捉到細(xì)微的紡錘體形態(tài)變化，提高評估的準(zhǔn)確性。紡錘體的微管在細(xì)胞分裂過程中具有自我修復(fù)和再生的能力。

紡錘體生成在含中心體的細(xì)胞中，紡錘體的生成開始于細(xì)胞分裂前初期-即在細(xì)胞核膜分解(NuclearEnvelopeBreakdown,NEB)之前。初期的結(jié)構(gòu)為兩個**的以中心體為核的星狀體(asters)。當(dāng)細(xì)胞核膜分解后，染色體和星狀體發(fā)生一系列復(fù)雜的互動反應(yīng)。**終結(jié)果為所有的染色體在紡錘體的**(赤道板,)排列整齊，每兩條染色體有一個著絲點(diǎn)，每一個著絲點(diǎn)被一束極性相同的微管（通常稱為紡錘絲）附著。此時細(xì)胞處于分裂中期，紡錘體生成完畢。實(shí)驗(yàn)證明，中心體在這個過程中的作用不是必需的。動物細(xì)胞在中心體被激光搗毀后仍舊能夠筑構(gòu)紡錘體，但其位置通常不在細(xì)胞的大致幾何中心，其后的胞質(zhì)分裂也會受嚴(yán)重影響。紡錘體[1]在不含中心體的細(xì)胞中，紡錘體的生成是由染色體本身主導(dǎo)的。此過程由一小分子量的GTP連接蛋白（RanGTPase）控制。細(xì)胞核分解后，紡錘絲由染色體周圍生成。其后這些紡錘絲會在動力分子與為微管動力的合作影響下自動排列為極性相反大致數(shù)目相同的兩組。每組的極性相對于一組著絲點(diǎn)。同時在微管遠(yuǎn)端的動力蛋白dynein會將這些微管束集中到一點(diǎn)，形成紡錘極區(qū)(SpindlePolarZone)。與此同時，染色體會自動在赤道板排列整齊。紡錘體生成完畢。紡錘體在細(xì)胞分裂中的功能受到嚴(yán)格的時間和空間控制。昆明無損觀察紡錘體玻璃底培養(yǎng)皿

紡錘體在減數(shù)分裂中也發(fā)揮重要作用，確保生殖細(xì)胞染色體正確分離。北京紡錘體觀測儀

在有絲分裂過程中，紡錘體的形成和功能是高度協(xié)調(diào)的。從前期到中期，紡錘體逐漸成熟，染色體被精確排列在細(xì)胞的中間區(qū)域。到了后期和末期，紡錘體開始分解，將染色體拉向細(xì)胞的兩極，并完成胞質(zhì)分裂。這一過程中，紡錘體的微管通過縮短和伸長來協(xié)調(diào)染色體的移動和定位，確保遺傳信息的準(zhǔn)確傳遞。雖然無絲分裂過程中不形成明顯的紡錘體結(jié)構(gòu)，但紡錘體的相關(guān)成分（如微管和動力蛋白）仍在細(xì)胞分裂中發(fā)揮作用。例如，在質(zhì)體分裂中，紡錘體成分同樣起到了精確定位和運(yùn)動染色體的作用。在減數(shù)分裂過程中，紡錘體的形成和功能更加復(fù)雜。以人卵母細(xì)胞為例，其紡錘體在減數(shù)分裂過程中會經(jīng)歷一段較長時間的“多極紡錘體”階段，而后才形成雙極狀紡錘體。這一過程需要多種關(guān)鍵蛋白（如HAUS6、KIF11和KIF18A）的參與和調(diào)控。紡錘體的正確組裝和雙極化對于保證卵母細(xì)胞的正常發(fā)育和受精至關(guān)重要。北京紡錘體觀測儀