CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點(diǎn):3.2**分析儀閾值的確定(1)精子灰度、對(duì)比度閾值:由于分析儀是根據(jù)灰度的高低來判斷精子的真?zhèn)?,?duì)亮度和對(duì)比度要求特別高,檢測時(shí)應(yīng)多次試用,尋找能準(zhǔn)確識(shí)別精子的比較好灰度閾值[8]。(2)碎片:測定精子濃度準(zhǔn)確性受**中細(xì)胞成份和非精子的顆粒物質(zhì)的干擾,測定活動(dòng)精子的百分率也受精子中非精子物質(zhì)的影響[9],這些也是需要注意的。對(duì)于系統(tǒng)誤認(rèn)為精子的非精子成分,如精原細(xì)胞、白細(xì)胞和非白細(xì)胞顆粒等,可人為準(zhǔn)確記數(shù)后在可刪除雜質(zhì)一欄將其舍去。3.3出現(xiàn)1次異常結(jié)果應(yīng)間隔復(fù)查反復(fù)檢查2?3次方能得出比較正確的結(jié)果。3.4對(duì)于無精子的患者應(yīng)仔細(xì)進(jìn)行視野檢查注意不要將雜質(zhì)誤認(rèn)為精子計(jì)數(shù)在內(nèi),應(yīng)將**3000ɡ離心15分鐘后,再涂片檢查,確認(rèn)無精后再出報(bào)告。CASA系統(tǒng)通過計(jì)算機(jī)分析精子運(yùn)動(dòng)參數(shù),能夠提供精確的量化數(shù)據(jù),優(yōu)于人工檢測方法。前向運(yùn)動(dòng)精子分析高準(zhǔn)確率
精子計(jì)數(shù)是在顯微鏡下計(jì)算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計(jì)數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后,滴于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上,在顯微鏡下計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)內(nèi)的所有精子數(shù)并換算為每m1內(nèi)所含精子數(shù)。此外還可用電子細(xì)胞計(jì)數(shù)儀經(jīng)調(diào)整閾值設(shè)置后計(jì)數(shù)精子數(shù)量。將已經(jīng)液化的精液標(biāo)本均勻混合,用白細(xì)胞計(jì)數(shù)吸管吸精液至0.5刻度,再吸稀釋液至11刻度,振蕩三分鐘,然后置于血球計(jì)數(shù)板內(nèi),計(jì)數(shù)二大格(每格面積1平方毫米)之精子數(shù),在尾數(shù)后加5個(gè)“0”即得每毫升精液內(nèi)精子數(shù)。例如計(jì)數(shù)為1280個(gè),則每毫升精子應(yīng)為128,000,000。精液稀釋液之配制:重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內(nèi)重碳酸鈉有消化粘液的作用,福爾馬林有使精子制動(dòng)的作用。如精液之稠度過高而不易吸取時(shí),可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內(nèi),稀釋后進(jìn)行計(jì)數(shù)。如精子的數(shù)目極少,亦可改為稀釋10倍計(jì)數(shù)。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的,還有25%是由輸精管道的其他部分來的,因此單憑一次排精的精子計(jì)數(shù)來衡量睪丸生精機(jī)能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查,才能比較正確地從這些精子計(jì)數(shù)來反映睪丸的生精機(jī)能。北京計(jì)數(shù)精子分析精子分析儀節(jié)省時(shí)間,提高實(shí)驗(yàn)室的工作效率,讓醫(yī)生和科研人員更快速地獲取實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果。
CASA可將每個(gè)精子的活力按以下分級(jí):(1)前向運(yùn)動(dòng)型(PR):精子運(yùn)動(dòng)活躍、線性運(yùn)動(dòng)或者在較大的范圍內(nèi)運(yùn)動(dòng)。(2)非前向運(yùn)動(dòng)型(NP):所有其他非前向運(yùn)動(dòng)的形式,如精子在較小的范圍內(nèi)運(yùn)動(dòng),精子頭部輕微移位或只觀察到尾部擺動(dòng)。(3)完全不動(dòng)型(IM):精子完全不動(dòng)。CASA系統(tǒng)檢測的這些參數(shù)有一套標(biāo)準(zhǔn)的術(shù)語。(1)VCL=曲線速度(mm/s)。精子頭沿其實(shí)際的曲線,即在顯微鏡下見到的二維方式運(yùn)動(dòng)軌跡的平均速度。檢測細(xì)胞活力。(2)VSL=直線速度(mm/s)。根據(jù)精子頭在開始檢測時(shí)的位置與***所處位置之間的直線運(yùn)動(dòng)的時(shí)間平均速度。(3)VAP=平均路徑速度(mm/s)。精子頭沿其空間平均軌跡移動(dòng)的時(shí)間平均速度。(4)ALH=精子頭側(cè)擺幅度(mm)。精子頭沿其空間平均軌跡側(cè)擺的幅度。以側(cè)擺的最大值或平均數(shù)值表示。(5)LIN=直線性。曲線軌跡的直線性。即VSL/VCL。(6)WOB=擺動(dòng)性。精子頭沿其實(shí)際軌跡的空間平均路徑擺動(dòng)的尺度。即VAP/VCL。(7)STR=前向性??臻g平均路徑的直線性。即VSL/VAP。(8)BCF=鞭打頻率(Hz)。精子曲線軌跡越過其平均路徑軌跡的時(shí)間平均速率。(9)MAD=平均移動(dòng)角度(度)。精子頭沿其曲線軌跡瞬間轉(zhuǎn)折角度的時(shí)間平均***值。
方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評(píng)價(jià)4種計(jì)數(shù)方法的準(zhǔn)確性和精確性,并比較4種方法計(jì)數(shù)精液的結(jié)果。結(jié)果:計(jì)數(shù)乳膠珠時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計(jì)數(shù)精液時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計(jì)數(shù)池、CASA系統(tǒng)與血細(xì)胞計(jì)數(shù)池、Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:計(jì)數(shù)精液時(shí),CASA系統(tǒng)與CellVU計(jì)數(shù)結(jié)果差異無***性。各實(shí)驗(yàn)室可選擇合適的手工或CASA計(jì)數(shù)方法。CASA系統(tǒng)減少了人為因素對(duì)檢測結(jié)果的影響,提高了檢測的客觀性和可重復(fù)性?。
二、生化及免疫學(xué)檢驗(yàn):1、精漿果糖測定【正常參考值】9.11-17.67mmol/L?!九R床意義】(1)精液果糖為0,可見于先天性兩側(cè)輸精管及精囊腺缺如、兩側(cè)輸精管完全阻塞或逆行**。(2)精液果糖降低,常見于精囊炎和雄***分泌不足,果糖不足可導(dǎo)致精子運(yùn)動(dòng)能量缺乏,甚至不易受孕。2、精漿酸性磷酸酶測定【正常參考值】金氏法:>255nmol·s-1/L【臨床意義】(1)精漿酸性磷酸酶含量增高,常見于前列腺肥大或早期前列腺惡性**患者。(2)精漿酸性磷酸酶含量降低,常見于前列腺炎患者。(3)精漿酸性磷酸酶檢測是法醫(yī)鑒定有無精液**敏感的方法。3、精漿頂體酶活性測定【正常參考值】36.72±21.43U/L。【臨床意義】精子頂體酶活力與精子密度及精子頂體完整率呈正相關(guān),其活力不足,可導(dǎo)致男性不育。4、精漿乳酸脫氫酶-X同功酶(LDH-X)測定【正常參考值】LDH-X***活性:2620±1340U/L;LDH-X相對(duì)活性:≥0.426。【臨床意義】LDH-X具有睪丸及精子的組織特異性,是精于運(yùn)動(dòng)獲能的關(guān)鍵酶,該酶檢測可作為診斷男性不育有價(jià)值的指標(biāo)。睪丸萎縮患者LDH-X降低或消失,精子發(fā)生缺陷時(shí)無LDH-X形成,少精或無精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。?精子分析可以分析參數(shù)有,曲線速率(VCL)?:精子頭沿其實(shí)際曲線運(yùn)動(dòng)的時(shí)均速率。兔子精子分析STR
Hamilton Thorne精子分析儀具備快速和高效的分析功能,能夠在短時(shí)間內(nèi)處理大量樣本,提高工作效率。前向運(yùn)動(dòng)精子分析高準(zhǔn)確率
五、精子活動(dòng)力檢測[正常參考值]**后30-60分鐘活動(dòng)力為Ⅲ級(jí)以上的精子>0.80:**后120分鐘內(nèi)活動(dòng)力為Ⅲ級(jí)以上的精子>0.60;**120分鐘后0.25-0.60的精子仍能活動(dòng)。[臨床意義]活動(dòng)不良或不活動(dòng)的精子增多,是導(dǎo)致不育的重要原因之一。常見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系的非特異性***如大腸桿菌***,某些代謝藥、抗瘧藥、雌***、氧化氮芥等,也可使精子活動(dòng)力下降。六、精子計(jì)數(shù)[正常參考值](100-150)×109/L或一次排精總數(shù)為(4-6)×108。[臨床意義]1.精子計(jì)數(shù)小于20×109/L或一次排精總數(shù)少于1×108為不正常,見于精索靜脈曲張、鉛金屬等有害工業(yè)污染、大劑量放射線及某些藥物影響。2.精液多次未查到精子為無精癥,主要見于睪丸生精功能低下,先天性輸精管、精囊缺陷或輸精管阻塞。輸精管結(jié)扎術(shù)2個(gè)月后精液中應(yīng)無精子,否則說明手術(shù)失敗。3.老年人從50歲開始精子數(shù)減少以至逐步消失。前向運(yùn)動(dòng)精子分析高準(zhǔn)確率