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隨著科技的進(jìn)步,冷凍與解凍技術(shù)也在不斷創(chuàng)新。例如,玻璃化冷凍技術(shù)因其快速冷凍和解凍的特點(diǎn),能夠有效減少冷凍過程中的冰晶形成和滲透壓變化對(duì)紡錘體的損傷。此外,一些研究者還嘗試將微流控技術(shù)應(yīng)用于卵母細(xì)胞的冷凍保存中,以實(shí)現(xiàn)更精確的溫度控制和更均勻的冷凍保護(hù)劑分布。無(wú)損觀察技術(shù)如偏光顯微鏡(Polscope)和冷凍電鏡(Cryo-EM)等的應(yīng)用為MI期紡錘體卵冷凍研究提供了新的視角。這些技術(shù)能夠在不破壞卵母細(xì)胞活性的情況下實(shí)時(shí)觀察紡錘體的形態(tài)和變化,從而更準(zhǔn)確地評(píng)估冷凍保存的效果。紡錘體在細(xì)胞分裂完成后迅速解體,為細(xì)胞進(jìn)入下一個(gè)周期做準(zhǔn)備。北京卵母細(xì)胞紡錘體改善分級(jí)
亨廷頓病是一種由亨廷頓基因突變引起的神經(jīng)退行性疾病,其主要病理特征是亨廷頓蛋白的異常聚集。研究表明,紡錘體功能障礙在亨廷頓病的發(fā)生和發(fā)展中也起著重要作用。亨廷頓病患者中,亨廷頓蛋白的異常聚集影響微管的穩(wěn)定性和紡錘體的組裝,導(dǎo)致染色體分離異常和細(xì)胞周期紊亂。紡錘體功能障礙會(huì)導(dǎo)致染色體不穩(wěn)定,增加基因組的不穩(wěn)定性,進(jìn)而影響神經(jīng)元的正常功能和存活。紡錘體功能障礙會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞周期紊亂,增加細(xì)胞凋亡的風(fēng)險(xiǎn),加速神經(jīng)元的丟失。 武漢紡錘體實(shí)時(shí)成像紡錘體卵質(zhì)量評(píng)估紡錘體的形成和功能受到多種信號(hào)分子的調(diào)控,如生長(zhǎng)因子等。
紡錘體在有絲分裂中發(fā)揮著至關(guān)重要的導(dǎo)航作用,其主要功能包括:排列與分裂染色體:紡錘體的完整性決定了染色體分裂的正確性。在細(xì)胞分裂中期,染色體在紡錘絲的牽引下,自動(dòng)在赤道板排列整齊。當(dāng)細(xì)胞進(jìn)入分裂后期,紡錘體微管收縮,將染色體牽引至兩極,形成兩組數(shù)目相等的姐妹染色單體。這一過程確保了遺傳信息的準(zhǔn)確傳遞,避免了染色體分離錯(cuò)誤導(dǎo)致的遺傳異常。決定胞質(zhì)分裂的分裂面:在染色體分裂的同時(shí),紡錘體中的一部分微管不隨染色體分裂到兩極,而是停弛在紡錘體中間形成紡錘中心體。紡錘中心體的中心區(qū)域?yàn)閮山M極性相反的微管交疊區(qū),稱為紡錘中心區(qū),它決定了接下來的胞質(zhì)分裂面。胞質(zhì)分裂開始于分裂后期的較晚期,一般結(jié)束于分裂末期后1-2小時(shí),此期間兩個(gè)子細(xì)胞由中心顆粒體連接。紡錘體通過精確控制胞質(zhì)分裂面的位置,確保了細(xì)胞分裂的對(duì)稱性和穩(wěn)定性。
在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,卵母細(xì)胞冷凍保存技術(shù)作為輔助生殖技術(shù)的重要組成部分,近年來取得了進(jìn)展。尤其是針對(duì)成熟卵母細(xì)胞紡錘體的冷凍保存研究,不僅關(guān)乎女性生育能力的保存,還涉及到遺傳學(xué)的穩(wěn)定性和安全性。成熟卵母細(xì)胞,即處于第二次減數(shù)分裂中期(MII期)的卵母細(xì)胞,其內(nèi)部包含一個(gè)高度復(fù)雜且精細(xì)的紡錘體結(jié)構(gòu)。紡錘體由微管組成,這些微管通過動(dòng)態(tài)變化,將染色體緊密地聯(lián)系在一起,并確保在細(xì)胞分裂過程中染色體的正確分離。成熟卵母細(xì)胞的紡錘體對(duì)溫度變化和機(jī)械刺激極為敏感,這使得其冷凍保存過程充滿了挑戰(zhàn)。紡錘體在細(xì)胞分裂中扮演關(guān)鍵角色,確保遺傳物質(zhì)均等分配。
Oosight影像分析系統(tǒng)采用液晶偏光成像技術(shù),無(wú)需對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行染色,即可實(shí)時(shí)、清晰、高對(duì)比度地進(jìn)行紡錘體結(jié)構(gòu)和透明帶成像,對(duì)ICSI、核移植操作、卵母細(xì)胞質(zhì)量評(píng)價(jià)等有很好的輔助作用。
主要應(yīng)用ICSI:在單精胞漿注射過程中定位初級(jí)卵母細(xì)胞,避免卵的破裂損傷,增強(qiáng)胚胎的發(fā)育潛能。卵評(píng)估:利用定量的分析數(shù)據(jù)對(duì)卵進(jìn)行分級(jí),改善對(duì)胚胎的選擇。體外成熟評(píng)估:在未成熟卵催化(IVM)過程判斷成熟期,判斷依據(jù)采用的是準(zhǔn)確的識(shí)別紡錘體,而非不準(zhǔn)確的極體。質(zhì)量控制:利用定量的分析數(shù)據(jù)對(duì)卵進(jìn)行分級(jí),改善對(duì)胚胎的選擇。
核移植:顯著提高核移植的成功率。由于在核摘除的過程可以清楚的看到核質(zhì),使得核移植的成功率增加了80%,并減少了線粒體DNA的摘除。卵冷凍研究:對(duì)冷凍的初級(jí)卵母細(xì)胞進(jìn)行解凍前和解凍后的定量分析,從而判斷卵的發(fā)育力,改善妊娠率。紡錘體研究:檢測(cè)胚胎中紡錘體的發(fā)育過程,確定正常和非正常分裂率(只可用于搭配有培養(yǎng)箱的顯微鏡)??梢詫?duì)染色體非正常的或非整倍體的胚胎成像,從而選擇***的前體做PGD診斷。透明帶研究:測(cè)量卵母細(xì)胞的透明帶;準(zhǔn)確測(cè)量紡錘體和透明帶中分子排列方向的差別變化,判斷紡錘體和透明帶是否處于正常狀態(tài) 紡錘體的異??赡軐?dǎo)致遺傳信息的丟失或重復(fù),進(jìn)而引發(fā)遺傳性疾病。北京卵母細(xì)胞紡錘體改善分級(jí)
紡錘體微管的數(shù)量和分布隨細(xì)胞分裂階段而變化。北京卵母細(xì)胞紡錘體改善分級(jí)
液晶偏振光顯微鏡是一種將液晶可變減速器、電子成像及數(shù)碼成像技術(shù)結(jié)合起來的成像系統(tǒng),能夠觀測(cè)到具有雙折性特征的細(xì)胞結(jié)構(gòu),如紡錘體和透明帶。Polscope成像系統(tǒng)無(wú)需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行固定和染色,因此能夠評(píng)估卵母細(xì)胞的質(zhì)量與紡錘體、透明帶等的相關(guān)性。在紡錘體卵冷凍研究中,Polscope成像系統(tǒng)可用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)冷凍過程中紡錘體的形態(tài)變化,評(píng)估冷凍保護(hù)劑的效果和冷凍速率對(duì)紡錘體的影響。此外,解凍后也可利用Polscope成像系統(tǒng)評(píng)估紡錘體的恢復(fù)情況和穩(wěn)定性,從而篩選出高質(zhì)量的卵母細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)操作。北京卵母細(xì)胞紡錘體改善分級(jí)