香港紡錘體實時成像紡錘體Hoechst染料

無需染色紡錘體觀察技術(shù)能夠?qū)崟r監(jiān)測冷凍過程中紡錘體的形態(tài)變化，從而準(zhǔn)確評估冷凍保存的效果。通過對比冷凍前后紡錘體的形態(tài)和穩(wěn)定性，研究者可以優(yōu)化冷凍保護(hù)劑的配方和濃度，以及改進(jìn)冷凍程序，減少冷凍損傷，提高解凍后卵母細(xì)胞的存活率和發(fā)育潛能。解凍后的卵母細(xì)胞在無需染色的情況下，可以直接通過Polscope系統(tǒng)進(jìn)行紡錘體觀察。這一技術(shù)能夠迅速評估解凍后卵母細(xì)胞的質(zhì)量，包括紡錘體的形態(tài)、位置、穩(wěn)定性等關(guān)鍵指標(biāo)，為后續(xù)的受精和胚胎發(fā)育提供重要參考。紡錘體的形成和功能與細(xì)胞的周期調(diào)控密切相關(guān)。香港紡錘體實時成像紡錘體Hoechst染料

正常情況下，成熟的神經(jīng)元處于G0期，不會重新進(jìn)入細(xì)胞周期。然而，紡錘體功能障礙會導(dǎo)致細(xì)胞周期紊亂，使神經(jīng)元重新進(jìn)入細(xì)胞周期。由于紡錘體功能障礙，神經(jīng)元無法完成正常的細(xì)胞分裂，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。細(xì)胞周期重新進(jìn)入是神經(jīng)退行性疾病中神經(jīng)元丟失的一個重要機(jī)制。紡錘體功能障礙會影響線粒體的正常運輸和分布，導(dǎo)致線粒體功能障礙。線粒體是細(xì)胞的能量工廠，其功能障礙會導(dǎo)致能量代謝紊亂，進(jìn)一步加劇神經(jīng)元的損傷和死亡。在帕金森病中，線粒體功能障礙是導(dǎo)致多巴胺能神經(jīng)元丟失的重要機(jī)制。美國雙折射性紡錘體起偏器紡錘體微管的穩(wěn)定性受到細(xì)胞內(nèi)外多種信號的調(diào)節(jié)。

    紡錘體在有絲分裂中發(fā)揮著至關(guān)重要的導(dǎo)航作用，其主要功能包括：排列與分裂染色體：紡錘體的完整性決定了染色體分裂的正確性。在細(xì)胞分裂中期，染色體在紡錘絲的牽引下，自動在赤道板排列整齊。當(dāng)細(xì)胞進(jìn)入分裂后期，紡錘體微管收縮，將染色體牽引至兩極，形成兩組數(shù)目相等的姐妹染色單體。這一過程確保了遺傳信息的準(zhǔn)確傳遞，避免了染色體分離錯誤導(dǎo)致的遺傳異常。決定胞質(zhì)分裂的分裂面：在染色體分裂的同時，紡錘體中的一部分微管不隨染色體分裂到兩極，而是停弛在紡錘體中間形成紡錘中心體。紡錘中心體的中心區(qū)域為兩組極性相反的微管交疊區(qū)，稱為紡錘中心區(qū)，它決定了接下來的胞質(zhì)分裂面。胞質(zhì)分裂開始于分裂后期的較晚期，一般結(jié)束于分裂末期后1-2小時，此期間兩個子細(xì)胞由中心顆粒體連接。紡錘體通過精確控制胞質(zhì)分裂面的位置，確保了細(xì)胞分裂的對稱性和穩(wěn)定性。

紡錘體觀測儀在補(bǔ)救ICSI中的應(yīng)用我們知道，成熟的卵母細(xì)胞排出***極體。IVF加入精子后，精子會穿透層層障礙**終進(jìn)入卵子，隨著時間的推移，卵子的紡錘體會將染色單體拉向兩極，進(jìn)而排出第二極體，再往后大約加精后9-16小時，雌雄原核會出現(xiàn)，而原核的出現(xiàn)才是受精的標(biāo)志。但是對于那些沒有受精的卵子，到了原核出現(xiàn)的時間窗，發(fā)現(xiàn)沒有受精時再去補(bǔ)救ICSI，往往錯過了卵子的比較好受精時間，因為沒有受精的卵子會在體外老化，即使受精，胚胎的發(fā)育潛能也很低。所以，我們在加精后的4-6小時，通過觀察第二極體的排出來初步判斷是否受精，**的增加了那些受精障礙患者的受精率，也避免了卵子的老化。當(dāng)然，偶爾也會出現(xiàn)錯誤補(bǔ)救。文獻(xiàn)報道對IVF受精后的未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行ICSI補(bǔ)救，實驗組用紡錘體觀測儀觀察并統(tǒng)計紡錘體的數(shù)目，82.7%含有一個紡錘體，17.3%含有兩個紡錘體，并對含有一個紡錘體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI；而對照組并未用紡錘體觀測儀觀察紡錘體，只對未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，使用紡錘體觀測儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率，降低多原核受精比率。紡錘體的形態(tài)在細(xì)胞分裂的不同階段會有所變化。

    減數(shù)分裂是生物體形成配子（精子和卵子）的過程，其特點是一次DNA復(fù)制后細(xì)胞連續(xù)分裂兩次，形成四個遺傳物質(zhì)相似的子細(xì)胞。在減數(shù)分裂過程中，紡錘體同樣發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。在減數(shù)分裂Ⅰ的前期，同源染色體發(fā)生配對、聯(lián)會、交換和交叉，形成四分體。這一過程依賴于紡錘體的微管網(wǎng)絡(luò)，它確保了同源染色體能夠正確地配對和交換遺傳信息。隨后，在減數(shù)分裂Ⅰ的中期，染色體在紡錘絲的牽引下，排列在赤道板上。與有絲分裂不同的是，此時排列在赤道板上的染色體是同源染色體對，而不是姐妹染色單體。當(dāng)細(xì)胞進(jìn)入減數(shù)分裂Ⅰ的后期，同源染色體在紡錘體的牽引下分離，分別移向細(xì)胞的兩極。這一過程實現(xiàn)了同源染色體的分離，為后續(xù)的遺傳重組和配子形成奠定了基礎(chǔ)。在減數(shù)分裂Ⅱ中，紡錘體的作用與有絲分裂更為相似。姐妹染色單體在紡錘絲的牽引下分離，分別移向細(xì)胞的兩極。這一過程確保了每個子細(xì)胞都能獲得完整的染色體組，從而保證了配子的遺傳完整性。 紡錘體微管網(wǎng)絡(luò)的復(fù)雜性保證了染色體分離的準(zhǔn)確性。北京哺乳動物紡錘體改善分級

紡錘體的一端連接著染色體，另一端則錨定在細(xì)胞兩極。香港紡錘體實時成像紡錘體Hoechst染料

在卵母細(xì)胞冷凍保存過程中，紡錘體的形態(tài)變化是評估冷凍效果的重要指標(biāo)之一。傳統(tǒng)的紡錘體觀察方法往往需要將卵母細(xì)胞固定并進(jìn)行免疫熒光染色，這不僅破壞了細(xì)胞的活性，還限制了進(jìn)一步觀察其發(fā)育潛能的機(jī)會。而偏光成像技術(shù)則能夠在不解凍、不染色的情況下，直接觀察紡錘體的形態(tài)變化。通過Polscope系統(tǒng)，研究者可以實時監(jiān)測冷凍過程中紡錘體的形態(tài)變化，評估冷凍保護(hù)劑對紡錘體的保護(hù)效果，以及解凍后紡錘體的恢復(fù)情況。冷凍后的卵母細(xì)胞紡錘體及染色體異常率增高，這將直接影響解凍后卵母細(xì)胞的減數(shù)分裂進(jìn)程和胚胎的染色體正常性。利用偏光成像技術(shù)，研究者可以準(zhǔn)確評估冷凍前后紡錘體的異常率，包括紡錘體的形態(tài)、位置、穩(wěn)定性等參數(shù)。通過對比分析，可以明確冷凍過程對紡錘體的具體影響，為優(yōu)化冷凍保存條件提供科學(xué)依據(jù)。香港紡錘體實時成像紡錘體Hoechst染料