GMP級IL-9重組蛋白

來源: 發(fā)布時間:2022-07-20

在重組蛋白生產(chǎn)中,酵母表達系統(tǒng)與大腸桿菌表達有所不同,大腸桿菌表達只需將質(zhì)粒/載體轉(zhuǎn)入到宿主菌體內(nèi),其載體攜帶復(fù)制原點隨著宿主染色體的復(fù)制而復(fù)制,可以穩(wěn)定存在。而酵母表達相對復(fù)雜,設(shè)計的質(zhì)粒/載體均不帶有酵母自身復(fù)制原點,因此如果直接導(dǎo)入到宿主菌中,不能穩(wěn)定存在。所以必須將質(zhì)粒/載體線性化,以同源重組的方式與宿主菌的染色體進行整合,這樣外源基因才能夠穩(wěn)定存在,而且同源重組一旦形成會很穩(wěn)定,在通過后期的篩選排除沒有整合成功的質(zhì)粒/載體和宿主菌,挑選整合成功并能夠高表達的重組轉(zhuǎn)化子,某種程度上與哺乳動物穩(wěn)定細胞系構(gòu)建原理類似。重組蛋白的表達系統(tǒng)有多種。GMP級IL-9重組蛋白

R&D Systems作為全球免疫學(xué)和細胞生物學(xué)產(chǎn)品的生產(chǎn)商,1976年創(chuàng)立于美國明尼蘇達州,至今已為學(xué)術(shù)界服務(wù)近40年。其母公司Bio-Techne(原Techne公司)于1983年在美國NASDAQ上市。目前,R&D Systems擁有近30,000種產(chǎn)品,95%以上由自己研發(fā)生產(chǎn)。其產(chǎn)品包括重組蛋白、細胞因子、ELISA試劑盒、生長因子、趨化因子、抗體、Animal-Free?蛋白、Luminex 液相芯片、多因子檢測固相芯片、流式細胞分析與細胞篩選、干細胞及細胞培養(yǎng)等;覆蓋發(fā)育、糖生物、內(nèi)分泌、免疫、神經(jīng)學(xué)、蛋白酶、信號傳導(dǎo)等學(xué)科研究領(lǐng)域;且每年有近2,000種新產(chǎn)品不斷問世,以滿足不同科研工作者的研究需要。義翹神州BMP-5重組蛋白怎么樣中國的重組蛋白藥物市場,前景廣闊。

CHO細胞即:中國倉鼠卵巢細胞(Chinese Hamster Ovary),它是基因工程疫苗研究中具有代表性的哺乳動物表達載體,是用來表達外源蛋白多也是成功的一類細胞。市場上超過70%的蛋白質(zhì)藥物選擇的制造細胞就是CHO細胞。CHO細胞可以在外源表達的蛋白質(zhì)上摻入復(fù)雜的聚糖,如N-連接聚糖。有助于蛋白質(zhì)的折疊和細胞內(nèi)運輸。重組蛋白表達側(cè)重于大化每個分子中含有唾液酸的復(fù)雜聚糖的數(shù)量,CHO細胞糖基化之后,能增加對蛋白水解的抵抗力和延長體內(nèi)血清半衰期,所以CHO細胞成為用作重組蛋白的哺乳動物細胞系。

蛋白的溶解性與很多因素有關(guān),其中比較重要的是pH值和離子強度。購買的重組蛋白按照說明上所標(biāo)明的溶解液來溶解。如果您所用的溶解液的pH值和離子強度與說明書中所標(biāo)明的不符,很多時候會造成細胞因子或重組蛋白不能完全溶解或者根本無法溶解,這樣所配得的細胞因子或重組蛋白必然活性不夠或喪失。重組蛋白溶解時一定要溶解到指定的濃度,高于或低于該濃度范圍,都可能會導(dǎo)致重組蛋白不穩(wěn)定,出現(xiàn)活性下降的現(xiàn)象。另外,重組蛋白在溶解時,一定不能用渦旋儀進行快速振蕩,以免出現(xiàn)蛋白鏈斷裂。重組蛋白的凍干粉是非常容易溶解的,一般用移液器的吸頭輕輕吹幾下,即可使細胞因子或重組蛋白完全溶解。溶解后的重組蛋白如何保存?

對于臨床使用的 GMP 級蛋白,批次間一致性是重要的指標(biāo)之一。其次,要符合 GMP 要求的質(zhì)量管理體系,至少,所選供應(yīng)商應(yīng)通過 ISO 9001: 2008/2015 相關(guān)認證的質(zhì)量管理體系(QMS),質(zhì)量管理體系是經(jīng)過認證的符合相關(guān)政策的大量的文件和記錄管理系統(tǒng)以及生產(chǎn)過程的可追溯性。而后,要挑選無動物源性的重組蛋白,相較于普通實驗條件生產(chǎn)的重組蛋白,Animal-free 重組蛋白具有如下突出的優(yōu)勢:不會引入瘋牛病病毒或者其它未知病原體;不會引起異種免疫排斥和過敏反應(yīng);不會因微量動物活性成分引發(fā)副作用。重組蛋白的表達與純化方法。義翹神州IL-7重組蛋白

選擇合適的重組蛋白表達系統(tǒng),至關(guān)重要。GMP級IL-9重組蛋白

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