蛋白的溶解性與很多因素有關(guān)，其中比較重要的是pH值和離子強(qiáng)度。購(gòu)買(mǎi)的重組蛋白按照說(shuō)明上所標(biāo)明的溶解液來(lái)溶解。如果您所用的溶解液的pH值和離子強(qiáng)度與說(shuō)明書(shū)中所標(biāo)明的不符，很多時(shí)候會(huì)造成細(xì)胞因子或重組蛋白不能完全溶解或者根本無(wú)法溶解，這樣所配得的細(xì)胞因子或重組蛋白必然活性不夠或喪失。重組蛋白溶解時(shí)一定要溶解到指定的濃度，高于或低于該濃度范圍，都可能會(huì)導(dǎo)致重組蛋白不穩(wěn)定，出現(xiàn)活性下降的現(xiàn)象。另外，重組蛋白在溶解時(shí)，一定不能用渦旋儀進(jìn)行快速振蕩，以免出現(xiàn)蛋白鏈斷裂。重組蛋白的凍干粉是非常容易溶解的，一般用移液器的吸頭輕輕吹幾下，即可使細(xì)胞因子或重組蛋白完全溶解。什么是重組蛋白？如何產(chǎn)生？小鼠BMP-10重組蛋白
客戶購(gòu)買(mǎi)的重組蛋白一般為裝在塑料管中的凍干粉，凍干粉在運(yùn)輸過(guò)程中可能會(huì)因顛簸而漂散并粘貼于管壁或管蓋上，所以在打開(kāi)塑料瓶蓋前，需將凍干粉通過(guò)離心收集到管底，以便用很小體積的液體即可將凍干粉完全溶解。那么應(yīng)該用多少轉(zhuǎn)速、多長(zhǎng)時(shí)間離心試劑管，才能達(dá)到良好的收集效果？答：有些小型高速離心機(jī)(多為進(jìn)口品牌)的面板上有一個(gè)Spin鍵，按了此鍵后，離心機(jī)會(huì)自動(dòng)快速上升到速度(10000rpm或12000rpm)，上升后速度即刻下降，直至停止旋轉(zhuǎn)，整個(gè)過(guò)程大約30s。這個(gè)Spin鍵足以很好的將細(xì)胞因子或蛋白收集到管底。但有些實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有這樣的高速離心機(jī)，只有轉(zhuǎn)速為4000-4500rpm的離心機(jī)。這種情況下，需3000-3500rpm離心5min，也能達(dá)到類(lèi)似的效果。PeproTechLIF重組蛋白外企的重組蛋白藥物占據(jù)了全球?qū)⒔?0%的醫(yī)藥市場(chǎng)份額。
上海普欣生物技術(shù)有限公司是一家專(zhuān)業(yè)從事生物試劑研發(fā)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售的****，創(chuàng)立于2006年，總部位于中國(guó)上海。其產(chǎn)品和服務(wù)涵蓋了分子生物學(xué)、蛋白化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)的諸多領(lǐng)域。普欣生物擁有基因克隆，蛋白表達(dá)，菌種發(fā)酵，蛋白純化，蛋白凍干以及抗體制備等完整的技術(shù)平臺(tái)，并擁有自己的GMP中試生產(chǎn)車(chē)間。開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)的重組蛋白細(xì)胞因子產(chǎn)品遠(yuǎn)銷(xiāo)海外，已成為國(guó)內(nèi)外多家生物試劑公司和臨床診斷公司的OEM供應(yīng)商。其眾多重組蛋白產(chǎn)品被用于研究和臨床前試驗(yàn)。2014年，普欣加入了Bio-Techne的大家族。
不同表達(dá)系統(tǒng)所生成的重組蛋白間有何主要區(qū)別？以賽默飛為例，Thermo Fisher Scientific? 所提供的重組蛋白產(chǎn)品通常在大腸桿菌，昆蟲(chóng)細(xì)胞或哺乳動(dòng)物細(xì)胞等不同的表達(dá)系統(tǒng)中產(chǎn)生。不同表達(dá)系統(tǒng)之間產(chǎn)生的重組蛋白的主要差別在于這些蛋白所攜帶的翻譯后修飾，如糖基化修飾。在大腸桿菌中生成的重組蛋白未經(jīng)糖基化。在昆蟲(chóng)細(xì)胞中產(chǎn)生的重組蛋白通常經(jīng)有部分糖基化，但不含半乳糖和唾液脫鹽酸，糖鏈也無(wú)復(fù)雜分支。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中生成的重組蛋白會(huì)發(fā)生附帶完全的糖基化修飾。備注：Mimic? Sf9 昆蟲(chóng)細(xì)胞（來(lái)源于sf9昆蟲(chóng)細(xì)胞系，經(jīng)改造可穩(wěn)定表達(dá)多種哺乳動(dòng)物糖基轉(zhuǎn)移酶）可產(chǎn)生用于表達(dá)帶末端唾液酸和半乳糖的復(fù)雜的N-糖鏈。溶解后的重組蛋白如何保存？
生產(chǎn)重組蛋白的酵母表達(dá)系統(tǒng)兼有原核和高等真核系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)，培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單、生長(zhǎng)速度快、表達(dá)水平高、操作簡(jiǎn)便、成本低廉，蛋白翻譯后能進(jìn)行正確加工、修飾，合理的空間折疊，使得蛋白的可溶性得到提高，是較優(yōu)的重組真核生物蛋白生產(chǎn)制備工具。其中畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)應(yīng)用較多，與其他表達(dá)系統(tǒng)相比，其較強(qiáng)的AOX1（醇氧化酶）、3-磷酸甘油醛脫氫酶、FLD1（醛脫氫酶）等啟動(dòng)子、蛋白穩(wěn)定持久表達(dá)、表達(dá)效率高、可分泌表達(dá)蛋白、雜蛋白少、翻譯后修飾等優(yōu)點(diǎn)使其成為酵母表達(dá)重組蛋白的優(yōu)先選擇。PeproTech提供多種高質(zhì)量細(xì)胞因子和重組蛋白，包裝規(guī)格多，備受科學(xué)家青睞。小鼠BMP-10重組蛋白
重組蛋白的生物學(xué)活性定義。小鼠BMP-10重組蛋白
重組蛋白具有極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和科研價(jià)值，但是在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中使用穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法將會(huì)消耗大量的時(shí)間，而傳統(tǒng)的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染方法，在產(chǎn)量上也難以令人滿意。所以重組蛋白大規(guī)模的瞬時(shí)表達(dá)技術(shù)是近年來(lái)的一個(gè)研究熱點(diǎn)，已有報(bào)道能放大到 100L反應(yīng)器中生產(chǎn)重組蛋白，產(chǎn)量（分泌型蛋白）可達(dá) 1-10mg/L。不過(guò)該方法技術(shù)條件要求高，如質(zhì)粒的純度、轉(zhuǎn)染的效率等。哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)中，重組蛋白的表達(dá)水平與許多 因素相關(guān)，如轉(zhuǎn)錄和翻譯調(diào)控元件、RNA剪接過(guò)程、mRNA穩(wěn) 定性、基因在染色體上的整合位點(diǎn)、重組蛋白對(duì)細(xì)胞的毒性作 用以及宿主細(xì)胞的遺傳特性等。小鼠BMP-10重組蛋白
上海研助寶生物醫(yī)藥有限公司是一家貿(mào)易型類(lèi)企業(yè)，積極探索行業(yè)發(fā)展，努力實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品創(chuàng)新。公司致力于為客戶提供安全、質(zhì)量有保證的良好產(chǎn)品及服務(wù)，是一家有限責(zé)任公司（自然）企業(yè)。以滿足顧客要求為己任；以顧客永遠(yuǎn)滿意為標(biāo)準(zhǔn)；以保持行業(yè)優(yōu)先為目標(biāo)，提供***的試劑，儀器，耗材，試劑盒。研助寶以創(chuàng)造***產(chǎn)品及服務(wù)的理念，打造高指標(biāo)的服務(wù)，引導(dǎo)行業(yè)的發(fā)展。