無動物源性Wnt3重組蛋白

來源: 發(fā)布時間:2022-03-13

ACROBiosystems是一個國際認(rèn)證專注于抗體藥研發(fā)領(lǐng)域的靶點(diǎn)重組蛋白供應(yīng)商,致力于提供藥物研發(fā)過程中所需的高質(zhì)量的靶點(diǎn)蛋白,滿足市場對大批量、高批間一致性的蛋白試劑的需求。公司的產(chǎn)品目錄涵蓋了從人類到其他常見物種的疾病相關(guān)的藥物靶點(diǎn)抗原和生物標(biāo)志物。應(yīng)用于自身免疫疾病、心血管病、傳染病等疾病的藥物早期發(fā)現(xiàn)及驗(yàn)證、藥物篩選及優(yōu)化、診斷試劑開發(fā)及優(yōu)化、臨床前實(shí)驗(yàn)及臨床試驗(yàn)、藥物生產(chǎn)過程及工藝控制(CMC)等研發(fā)及生產(chǎn)環(huán)節(jié)。致力于提供高質(zhì)量,高批間一致性的蛋白產(chǎn)品, 高水平的分子互作服務(wù)(SPR&BLI)以滿足藥物研發(fā)領(lǐng)域的嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)。重組蛋白藥物的發(fā)展動態(tài)。無動物源性Wnt3重組蛋白

糖基化是指糖基轉(zhuǎn)移酶作用下將糖轉(zhuǎn)移至蛋白質(zhì),和蛋白質(zhì)上的氨基酸殘基形成糖苷鍵。蛋白質(zhì)經(jīng)過糖基化作用,形成糖蛋白。糖基化是對蛋白的重要的修飾作用,有調(diào)節(jié)蛋白質(zhì),幫助蛋白質(zhì)折疊功能作用。在大多數(shù)情況下,生長因子或細(xì)胞因子的糖基化作用不會直接影響該蛋白與受體之間的結(jié)合。所以在體外研究中,重組生長因子或細(xì)胞因子的生物活性不會受糖基化作用的過多影響。不過,糖基化蛋白通常對蛋白酶的降解更不敏感具耐受性,所以在體內(nèi)的半衰期比未經(jīng)無糖基化的同種蛋白更長。因此在體內(nèi)研究中,以選擇哺乳動物表達(dá)系統(tǒng)或昆蟲表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)的重組蛋白可能是比大腸桿菌中生產(chǎn)的同種重組蛋白效果更好的一個選擇要好。無動物源性Wnt3重組蛋白選擇高品質(zhì)重組蛋白和生長因子。

如果說明書上沒有具體的說明,如何重溶(Reconstitute)凍干的重組蛋白?我們建議采用以下方式:(1)將試劑瓶和重溶緩沖液平衡至室溫。(2)短暫離心試劑瓶以確保在小瓶底部收集所有凍干物。(3)加入推薦的重溶緩沖液,達(dá)到產(chǎn)品說明上推薦的濃度。避免劇烈振蕩或移液器吹打,這可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性。(4)使試劑瓶在室溫下重溶15-30分鐘,可使用360度搖床或手動輕輕上下顛倒。(5)每管體積不小于10μL分裝,并按產(chǎn)品說明書上的指示儲存。(6)如果小瓶內(nèi)呈現(xiàn)薄片或顆粒,則在室溫下將產(chǎn)品混合幾小時,然后在4℃過夜。

在昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)中,昆蟲細(xì)胞需要桿狀病毒作為重組蛋白表達(dá)的中間體。桿狀病毒是一組不同的DNA病毒,能夠侵染各種昆蟲細(xì)胞。它們就像一個穿梭機(jī),將目標(biāo)基因?qū)虢o定的宿主細(xì)胞。加州親筆多核多角體病毒(AcMNPV) 在利用桿狀病毒這方面表現(xiàn)出突出的特征。簡單地說,將編碼感興趣蛋白質(zhì)的基因插入一個主要載體,然后將其克隆到一個名為Bacmid的次要載體上。Bacmid被轉(zhuǎn)移到一株細(xì)菌(通常是大腸桿菌)中進(jìn)行初步病毒生產(chǎn)和組裝,以獲得一代桿狀病毒(P1)。P1病毒在昆蟲細(xì)胞中被擴(kuò)增(例如sf9)以獲得合適的滴度(P2),然后P2病毒被用于侵染相同或不同的昆蟲細(xì)胞系(例如High-five)以實(shí)現(xiàn)重組蛋白表達(dá)。重組蛋白的表達(dá)系統(tǒng)有多種。

ProSpec是一家全球細(xì)胞因子蛋白及相關(guān)抗體生產(chǎn)和研發(fā)品牌。ProSpec的生產(chǎn)和研發(fā)工廠位于以色列,專注于蛋白(重組及合成)生產(chǎn)研發(fā),其獨(dú)有的細(xì)菌和哺乳動物表達(dá)和蛋白折疊技術(shù)使其能在17年內(nèi)成長為國際的科研級蛋白供應(yīng)商。目前ProSpec可以提供細(xì)胞因子,生長因子,信號蛋白,病毒抗原等近800種重組蛋白和100多種抗體,是世界上提供蛋白品種多的公司之一,其生產(chǎn)工藝和規(guī)模使其可以提供毫克到克級蛋白,價格優(yōu)于同類公司。絕大部分產(chǎn)品是天然成熟型蛋白,而不含有標(biāo)簽蛋白??紤]到大部分研究者希望能更靈活地配制蛋白溶液,ProSpec-Tany絕大部分產(chǎn)品沒有添加保護(hù)劑或鹽,這就對工藝提出了更高的要求。同時,ProSpec-Tany絕大部分產(chǎn)品為凍干粉,因此易于運(yùn)輸和保存。外企的重組蛋白藥物占據(jù)了全球?qū)⒔?0%的醫(yī)藥市場份額。義翹神州EGF重組蛋白

選擇重組蛋白定制需謹(jǐn)慎。無動物源性Wnt3重組蛋白

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