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能夠?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞供給必需物質(zhì),在微生物的培育中要為培育的微生物供給成長(zhǎng)因子。相同動(dòng)物細(xì)胞代謝進(jìn)程中有許多物質(zhì)是動(dòng)物細(xì)胞所必需而本身無(wú)法組成的的,例如堿基、維生素、氨基酸等微量物質(zhì),它們的效果十分重要,細(xì)胞需求它們組成核酸和蛋白質(zhì),缺少要導(dǎo)致細(xì)胞成長(zhǎng)不良乃至shi世;供給結(jié)合蛋白,能辨認(rèn)維生素、脂類、金屬和其他等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)生機(jī);供給對(duì)保持細(xì)胞指數(shù)成長(zhǎng)的,基礎(chǔ)培育基中沒(méi)有或量很少的養(yǎng)分物,以及首要的低分子養(yǎng)分物。這些物質(zhì)都存在于血清中,如果在制造培育基的時(shí)分一項(xiàng)項(xiàng)增加是十分費(fèi)事的。所以參加動(dòng)物血清相似微生物培育中的天然培育基的做法,簡(jiǎn)略便利、效果好。采集血量達(dá)到采集血管容積的 1/3 為宜,不要超過(guò) 2/3。南通新生牛血清
血清在細(xì)胞培養(yǎng)中為細(xì)胞提供氨基酸,蛋白質(zhì),維生素(特別是脂溶性維生素如A,D,E,K),碳水化合物,脂肪,,生長(zhǎng)因子,礦物質(zhì)及微量元素。此外,血清還可以緩沖培養(yǎng)基,抑制蛋白水解酶,增加培養(yǎng)基的粘度,降低在移液或攪拌時(shí)造成的剪切力。血清的保質(zhì)期是5年,儲(chǔ)存溫度-10~-30℃。血清長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。因此,長(zhǎng)期保存血清必須在-10℃以下儲(chǔ)存,并避免反復(fù)凍融。朝陽(yáng)區(qū)羊血清生產(chǎn)商碳水化合物,脂肪,生長(zhǎng)因子,礦物質(zhì)及微量元素。
如何進(jìn)行血清滅活處理?血清請(qǐng)先按上述「血清應(yīng)如何融解」中的操作步驟融化和混勻,熱滅活時(shí)請(qǐng)將血清置于56℃水浴30分鐘。為盡量減少熱滅活對(duì)血清品質(zhì)的影響,一次滅活的血清體積不宜過(guò)大。比較好準(zhǔn)備同樣的容器裝相等體積的水(與血清相同溫度),滅活時(shí)將裝有血清和水的容器同時(shí)放入56℃水浴,在裝水的容器中放置溫度計(jì),加熱過(guò)程中不時(shí)輕輕旋轉(zhuǎn)混勻血清,當(dāng)溫度計(jì)顯示達(dá)到56℃左右,開(kāi)始計(jì)時(shí)。56℃水浴后,建議馬上轉(zhuǎn)移到冰上降溫。
蛋白激酶是酶類這個(gè)家族中比較龐大的一員,被用來(lái)完成蛋白磷酸化作用的催化,這是控制細(xì)胞生命活動(dòng)中比較通常的機(jī)制。其中相當(dāng)有有效性的蛋白激酶之一可能就是CK2。蛋白激酶CK2(protein kinase CK2, PKCK2),過(guò)去曾經(jīng)被稱為酪蛋白激酶-2或Ⅱ(cascin kinase2 or Ⅱ)。它是由兩個(gè)催化亞基(aa’)和兩個(gè)調(diào)節(jié)亞基(ββ)構(gòu)成的不均一四聚體。蛋白激酶CK2是由兩個(gè)分別為42—44KDa和38KDa的aa’ββ型異四聚體結(jié)構(gòu)。該結(jié)構(gòu)很穩(wěn)定,在體外只有在變性的條件下才能被解離。除了細(xì)胞基質(zhì),一些病毒蛋白也被CK2所磷酸化。蛋白激酶CK2在轉(zhuǎn)錄、信號(hào)、增殖,并且在導(dǎo)致發(fā)生的各細(xì)胞步驟中發(fā)揮作用。細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),要保證細(xì)胞可以順利生長(zhǎng)和增殖,需添加10%~20%的血清,動(dòng)物血清還可起到酸堿度緩沖液的作用。
豬血清(貨號(hào):C2500-0100/0500/1000)豬血清在染色體研究中表現(xiàn)非常出色,可用于淋巴細(xì)胞培養(yǎng),疫苗生產(chǎn)(生產(chǎn)支原體)中和脂質(zhì)體包裹的腺相關(guān)病毒(AAV),用于誘導(dǎo)大鼠肝纖維化,作為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)中的標(biāo)準(zhǔn)陰性參考。//兔血清(貨號(hào):C2520-0100/0500)正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對(duì)照。在免疫組織化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)方面,各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑。//羊血清(貨號(hào):C2530-0010/0100/0500)用于生物醫(yī)學(xué)研究的大多數(shù)細(xì)胞系和原代培養(yǎng)物上,F(xiàn)BS的合適替代物,病毒分離和鑒定,病毒學(xué)研究。用作魚類細(xì)胞培養(yǎng)的有效NBCS替代物??沙晒Φ卮嫣ヅQ逶谏L(zhǎng)培養(yǎng)基中長(zhǎng)期用于環(huán)孢蘑菇的體外繁殖。//雞血清(貨號(hào):C2550-0100/0500)適用于單抗研制、規(guī)模化培養(yǎng)的疫苗生產(chǎn)、生物醫(yī)學(xué)研究和診斷試劑生產(chǎn)。//驢血清(貨號(hào):C2540-0010/0100/0500)適用于單抗研制、免疫組化、規(guī)?;囵B(yǎng)的疫苗生產(chǎn)、生物醫(yī)學(xué)研究和診斷試劑生產(chǎn)。在采集血過(guò)程中一定要注意如果用一次性真空管時(shí)血液應(yīng)不間斷地流入管中。上海胎牛血清培養(yǎng)基
真正的胎牛血清凝血功能差,紅細(xì)胞容易破裂,一般表現(xiàn)出微紅色或橘紅色。南通新生牛血清
決定血清的顏色的因素胎牛血清的顏色會(huì)根據(jù)血紅蛋白(鮮紅色)、膽紅素(黃色)含量的不同而表現(xiàn)出黃色、淡黃色、橘紅色、微紅色。因胎牛血清為動(dòng)物來(lái)源,同一品牌的不同批次間的胎牛血清顏色也會(huì)因?yàn)檠t蛋白、膽紅素含量的不同而有差異。造成血清沉淀較多的原因:①對(duì)血清進(jìn)行了熱滅活處理;②血清反復(fù)凍融;③血清長(zhǎng)期4℃儲(chǔ)存;④室溫或者37℃融化血清;⑤長(zhǎng)期室溫儲(chǔ)存。有關(guān)血清批間差異的疑問(wèn)血清來(lái)源于動(dòng)物,其組成成分有1000多種,血清成分的組成及含量受供體動(dòng)物年齡、生理?xiàng)l件、營(yíng)養(yǎng)條件而有差別。每個(gè)批次的血清成分百分比含量是不確定的,批間差異是存在的。尤其是一些較為難培養(yǎng)的敏感細(xì)胞,批間差異會(huì)表現(xiàn)得較為明顯。南通新生牛血清
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