激光掃描共聚焦顯微鏡是目前生物學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用和圖像分辨率比較高的實(shí)驗(yàn)儀器它是在熒光顯微鏡成像基礎(chǔ)上加裝了激光掃描裝置,利用計(jì)算機(jī)進(jìn)行圖像處理,使用紫外或可見光激發(fā)熒光探針,從而得到細(xì)胞或**內(nèi)部微細(xì)結(jié)構(gòu)的熒光圖像 已成為形態(tài)學(xué)、分子細(xì)胞生物學(xué)、材料科學(xué)等諸多領(lǐng)域中有力的研究工具。激光掃描共聚焦顯微鏡主要由 1、光學(xué)顯微鏡部分 2、激光發(fā)射器 本院的LSCM使用三個(gè)激光器氬離子激光器 488nm 氦氖綠激光器543nm 氦氖紅激光器 633nm 這三個(gè)激光器可做三通道熒光標(biāo)記 可使用絕大多數(shù)常見的綠、紅或遠(yuǎn)紅外激發(fā) 3、掃描裝置 檢測***光柵、分光鏡、發(fā)射熒光分色器等 4、光檢測器 高靈敏度的光電倍增管(PMT) 電壓越高 則光信號(hào)轉(zhuǎn)換成的電信號(hào)越強(qiáng) 可將熒光圖像的強(qiáng)度按照0~255分級顯示 5、計(jì)算機(jī)系統(tǒng)(包括數(shù)據(jù)采集、處理、轉(zhuǎn)換、應(yīng)用軟件) 6、圖像輸出設(shè)備六部分組成。 雙光子顯微鏡是怎么操作的？吉林生物顯微鏡廠家
1、動(dòng)態(tài)連續(xù)掃描及三維圖像重組
LSCM可以對對活細(xì)胞或細(xì)胞切片樣品的不同層面進(jìn)行連續(xù)
逐層掃描, 來獲得各個(gè)層面的圖像 即所謂的“無損傷的光學(xué)切片”。
LSCM掃描的每個(gè)層面之間的間距可以達(dá)到0.1um甚至更小。獲得的圖像
通過計(jì)算機(jī)重組 可獲得精細(xì)的細(xì)胞骨架、染色體、細(xì)胞器和細(xì)胞膜系
統(tǒng)的三維圖像 與普通光學(xué)顯微鏡獲得的圖像相比 LSCM所得的重組
三維圖像清晰度高、立體感強(qiáng), 可通過計(jì)算機(jī)軟件對細(xì)胞內(nèi)所研究的結(jié)
構(gòu)進(jìn)行各種測量 對細(xì)胞內(nèi)的空間結(jié)構(gòu)和某些物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的定位方面
的研究中有應(yīng)用。
2、同時(shí)多種物質(zhì)標(biāo)記
利用LSCM 通過對膜上、胞漿內(nèi)多種物質(zhì)的熒光標(biāo)記 可以實(shí)現(xiàn)
在同一樣品上同時(shí)進(jìn)行多重物質(zhì)的觀察 比如檢測細(xì)胞內(nèi)鈉、鈣、鎂等
離子濃度的比率及動(dòng)態(tài)變化。 西藏顯微鏡質(zhì)量推薦激光掃描共聚焦顯微鏡的規(guī)格。
首先我們從放大的倍數(shù)分析， 國產(chǎn)的金相顯微鏡放大倍數(shù)標(biāo)的都是很大的， 有的都是幾千倍，
但是實(shí)際效果卻大不大這么大的倍數(shù)， 實(shí)際上的倍數(shù)頂多也就幾百倍， 然而進(jìn)口的放大倍數(shù)
標(biāo)的只有一千倍， 但是誤差卻很少， 這是一點(diǎn)， 另外我們從光學(xué)系統(tǒng)方面說， 光學(xué)系統(tǒng)是金
相顯微鏡的心臟， 國產(chǎn)有鏡片上的鍍膜標(biāo)準(zhǔn)是達(dá)不到的， 所以導(dǎo)致質(zhì)量上也不達(dá)標(biāo)， 和國際
標(biāo)準(zhǔn)相差很遠(yuǎn)， 國產(chǎn)的一般都是有限的光學(xué)系統(tǒng)， 進(jìn)口的卻是無限的光學(xué)系統(tǒng)； 從校正能力
上來分析， 國產(chǎn)金相顯微鏡也是無法比擬的， 分辨的能力懸殊也很大； 從使用壽命上來分析，
能夠長時(shí)間維持高清圖像質(zhì)量的只有進(jìn)口金相顯微鏡， 國產(chǎn)的使用壽命和進(jìn)口的使用壽命相
差也很大； 售后服務(wù)方面進(jìn)口的金相顯微鏡要比國產(chǎn)的好， 就像進(jìn)口的奔馳汽車， 奔馳公司
可以開著飛機(jī)去給你免費(fèi)維修， 當(dāng)然光學(xué)產(chǎn)品沒有那么夸張， 但是服務(wù)態(tài)度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于國產(chǎn)金
相顯微鏡。
2． 為什么說雙光子顯微鏡一般不需要配備紫外激發(fā)激光器？
雙光子顯微鏡技術(shù)是建立在雙光子激發(fā)效應(yīng)的基礎(chǔ)上的一種熒光激發(fā)技術(shù)： 熒光染料分子可以同時(shí)吸收低
能量的兩個(gè)光子而被激發(fā)（兩個(gè)光子到達(dá)熒光分子的時(shí)間間隔小于 1 飛秒） ， 其激發(fā)效果可以等同于吸收
一個(gè) 1/2 波長的高能量光子。 例如， 吸收兩個(gè)紅色波長的光子， 相當(dāng)于一個(gè)吸收紫外的分子。 長波長的光
子不易被細(xì)胞吸收， 因此對活細(xì)胞的光毒性減少， 也降低了光漂白。 這樣即起到紫外激發(fā)的功能， 又避免
了紫外光線對樣品的傷害。 雙光子顯微鏡哪個(gè)牌子的好？
在傳統(tǒng)熒光顯微鏡中， 一個(gè)熒光團(tuán)吸收一個(gè)光子， 該光子能量對應(yīng)于
熒光團(tuán)基態(tài)和激發(fā)態(tài)能量之差。 通過一個(gè)較短壽命的虛態(tài)， 也可以通過同
時(shí)吸收兩個(gè)較低能量（即更高的波長） 的光子激發(fā)熒光。 例如， 吸收兩個(gè)
紅色波長的光子， 可以激發(fā)一個(gè)吸收紫外的分子。 雙光子激發(fā)是一個(gè)非線
性過程， 對激發(fā)光強(qiáng)度有平方依賴關(guān)系。
使用單激發(fā)光源， 雙光子具有相同的波長， 該技術(shù)被稱為雙光子激發(fā)
熒光顯微術(shù)。 如果兩個(gè)光子具有不同的波長， 就稱作雙色激發(fā)熒光顯微術(shù)。
雙光子吸收幾率依賴于兩個(gè)入射光子在空間和時(shí)間上的重合程度（兩
個(gè)光子必須在 10－18 秒內(nèi)到達(dá)）。 雙光子吸收截面很小， 對若丹明 B 一般
為 10－50cm4 s photon－1 molecule－1， 這樣， 只有在具有很大光子流量
的區(qū)域的熒光團(tuán)才會(huì)被激發(fā)。 鈦寶石激光器等鎖模的， 高峰值功率激光可
以為雙光子激發(fā)提供足夠的強(qiáng)度。 激光掃描共聚焦顯微鏡的種類有哪些？湖南掃描探針顯微鏡生產(chǎn)廠家哪家好
在哪里可以買到雙光子顯微鏡？吉林生物顯微鏡廠家
電子顯微鏡的分辨率達(dá)0.1nm左右.因此亞微米數(shù)量級樣品的觀察一直主要靠電子顯微鏡.但電子顯微鏡結(jié)構(gòu)復(fù)雜,且使用電子顯微鏡需要將樣品置于真空環(huán)境,這樣環(huán)境會(huì)迅速破壞必須在潮濕化學(xué)狀態(tài)上才能維持的全部生物活性,而且樣品容易受到高能電子束引起的輻射損傷.與之相比,光學(xué)顯微鏡具有結(jié)構(gòu)簡單,操作方便,直觀,可以在自然狀態(tài)下觀察樣品,且對樣品無任何損傷等優(yōu)越性.但經(jīng)典光學(xué)顯微鏡受衍射的限制,分辨率不高,不能適應(yīng)現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展.因而研究超**辨率光學(xué)顯微鏡具有重要意義. 吉林生物顯微鏡廠家
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